彌漫性大B細胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表達及臨床意義

孟亞紅，孫麗華

(上海復旦大學附屬中山醫院青浦分院 血液科，上海201700)

*通訊作者

彌漫性大B細胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表達及臨床意義

孟亞紅，孫麗華*

(上海復旦大學附屬中山醫院青浦分院 血液科，上海201700)

淋巴瘤是淋巴造血系統中常見的惡性腫瘤，WHO造血和淋巴組織腫瘤分類(2008)將淋巴瘤分為霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(NHL)[1]。彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中發病最多、惡性程度高的一個亞型,占非霍奇金淋巴瘤的30%-40%[2]。彌漫性大B淋巴瘤的生成與調控機制極其復雜，有多種信號通路參與，原癌基因Bcl-6、凋亡抑制基因Bcl-2與DLBCL的發生、發展關系密切，NF-κB屬于Rel基因，為多顯性核轉錄因子，參與機體炎癥、細胞增殖、細胞凋亡等基因的調節，具有調控腫瘤細胞凋亡和免疫活性的作用[3]。本研究通過免疫組化法檢測Bcl-6、Bcl-2和NF-κB在彌漫性大B細胞淋巴瘤的表達，并結合臨床病理特征，探討他們在彌漫性大B細胞淋巴瘤發生發展中的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集我院2013年1月至2015年12月病理科明確診斷的彌漫性大B細胞淋巴瘤58例，其中男性32例，女性26例；年齡17-76歲。臨床分期根據Ann Arbor 分期系統，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，其中Ⅰ-Ⅱ期22例，Ⅲ-Ⅳ期36例；分型參照2008年WHO關于淋巴造血組織腫瘤分類標準，GCB細胞型(21例)和ABC細胞型(37例)。納入標準：①病例診斷均符合《淋巴瘤診斷標準》；②病例手術前均未接受化療和放療；③免疫指標包含Bcl-2、Bcl-6和NF-κB;④資料完整。

同時選擇同期24例反應性增生淋巴組織為對照組，男性14例，女性10例，年齡16-74歲。兩組年齡、性別、乳酸脫氫酶水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB試劑盒由上海酶研生物科技有限公司提供，按試劑盒說明書操作。

1.3 統計學分析 采用SPSS統計學分析軟件，建立數據庫，計量資料選擇t檢驗，計數資料選擇χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表達比較

兩組研究對象的組織切片均在顯微鏡(*400)下觀察細胞形態及病理變化，結果顯示Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平淋巴瘤組均高表達，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平在兩組中的表達比較

2.2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL臨床病理特征的關系研究

表2結果分別顯示Bcl-2表達水平與DLBCL患者的乳酸脫氫酶(LDH)水平、臨床分期有關(P<0.05)，與性別、年齡無關(P>0.05)；Bcl-6與DLBCL患者的臨床分期有關(P<0.05)，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關(P>0.05)；NF-κB表達水平與DLBCL患者的臨床分期有關(P<0.05)，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關(P>0.05)

2.3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL不同分型的關系

由表3結果可見，DLBCL的不同病理分型，Bcl-2、Bcl-6和NF-κB表達水平不同，Bcl-2和NF-κB在ABC亞型高表達，Bcl-6在GCB亞型高表達，差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表達與彌漫性大B細胞淋巴瘤臨床病理特征的關系

表3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL病理分型的關系

3 討論

彌漫性大B細胞淋巴瘤是WHO分類中最常見的非霍奇金淋巴瘤，其細胞來源、遺傳學特點、基因表達和免疫表型以及臨床表現等有顯著的異質性，預后也不盡相同，各個年齡段均可發病，高發于老年人，性別無明顯差異[4]。

B細胞淋巴瘤(Bcl)家族基因在細胞凋亡的調控過程中起著不可替代的作用，Bcl-2基因是原癌基因，具有抑制凋亡作用。Bcl-2可以抑制由多種細胞毒素引起的細胞死亡，機體細胞凋亡的各種信號途徑有共同的通路，該通路受Bcl-2調節。Bcl-2定位于線粒體外膜，拮抗促凋亡蛋白的功能。機體大多數促凋亡蛋白定位于細胞質，當受到凋亡因子的誘導時就會向線粒體轉位，導致線粒體中的凋亡因子釋放，激活caspase，導致細胞凋亡[5,6]。人類原癌基因Bcl-6位于染色體3q27區域，長26kb，含10個外顯子和7個內含子，Bcl-6通過與轉錄因子相互作用影響轉錄因子的轉錄活性，發揮轉錄抑制作用，進而抑制細胞凋亡[7,8]。

本研究發現Bcl-2水平表達與彌漫性大B細胞淋巴瘤患者的乳酸脫氫酶水平、臨床分期有關，與性別、年齡無關；Bcl-6與彌漫性大B細胞淋巴瘤患者的臨床分期有關，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關。ABC亞型Bcl-2水平高表達，BCG亞型Bcl-6水平高表達。

NF-κB為轉錄因子蛋白家族，是一類與多種基因啟動子/增強子部位κB位點特異性結合并促進其轉錄的蛋白質，能調控多種基因如細胞因子、趨化因子、免疫因子、轉錄因子等，發揮包括參與炎癥反應、調節細胞凋亡、自身轉錄及細胞周期調控等多種生物學功能。NF-κB通路在調節免疫和炎癥進程中可以發揮其作用，并且在許多細胞類型中和細胞存活、增生和腫瘤形成有關[10]。Davis等研究發現，ABC亞型的DLBCL中NF-κB持續活化，ⅠκB激酶活性增強，ⅠκBa降解加速，在GCB亞型中未見到該情況，考慮與ABC亞型預后不好有關[11]。有研究證實NF-κB可以針對ABC分型及其他依賴NF-κB活化存活和增殖的淋巴瘤的治療靶標[12]。本研究結果ABC亞型NF-κB高表達，與GCB亞型比較差異有顯著性；與彌漫性大B細胞淋巴瘤患者的臨床分期有關，與性別、年齡無關。

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