豬傳染性腦脊髓炎的診斷與防治研究

林明敏曲寧寧趙燕春

（1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440；2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440；3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440）

豬傳染性腦脊髓炎的診斷與防治研究

林明敏1曲寧寧2趙燕春3

（1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440；2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440；3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站，山東威海 266440）

豬傳染性腦脊髓炎在國(guó)內(nèi)當(dāng)前發(fā)病較少，但是隨著與國(guó)際養(yǎng)豬業(yè)的交流日益頻繁，其發(fā)病幾率陡然升高，加強(qiáng)對(duì)其了解非常必要。本文對(duì)該病進(jìn)行了較為詳盡的分析，重點(diǎn)分析了其診斷方法和防治措施，希望能引起相關(guān)部門(mén)的重視。

豬傳染性腦脊髓炎；診斷；防治

1 病原

病原為小RNA病毒科腸道病毒屬成員。病原可分為兩類，即豬捷申病毒（PTV）和豬腸道病毒（PEV）。病毒對(duì)外界環(huán)境具有很強(qiáng)的抵抗力，15℃下能存活168d，在液體糞尿中保存很長(zhǎng)時(shí)間。病毒對(duì)乙醚有抵抗力，在眾多消毒劑中，次氯酸鈉、20%漂白粉和70%乙醇能使病毒完全失活。病毒在pH2～9條件下穩(wěn)定，在低溫下保存時(shí)間較長(zhǎng)，如保存于50%甘油中可于4℃下長(zhǎng)期保持毒力，-70℃下存活數(shù)年。冷凍干燥明顯降低毒力。

2 流行病學(xué)

病豬和帶毒豬是本病的傳染源，病毒隨糞便排出體外，污染飼料、飲水和圈舍等。臨床康復(fù)豬在第7周仍能通過(guò)糞便排毒。

本病毒主要通過(guò)糞便-口腔途徑傳播，此外，也可通過(guò)呼吸道和帶毒的公豬精液傳播。通過(guò)消化道和呼吸道感染后，病毒很快在腸道內(nèi)復(fù)制。強(qiáng)毒感染后，能夠形成病毒血癥，但弱毒感染則不能形成病毒血癥。豬是本病唯一的易感動(dòng)物，成年豬往往為隱性感染，仔豬感染后死亡率很高。迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)其他動(dòng)物能感染豬腸病毒的報(bào)道，然而妊娠豚鼠感染豬腸道病毒后（PEV-8），胎盤(pán)可發(fā)生病變。

3 主要癥狀與病理變化

潛伏期2～28d，平均14d。

PTV血清1型強(qiáng)毒株感染豬后，引起嚴(yán)重的腦脊髓炎癥狀，即傳統(tǒng)的捷申病，發(fā)病率可達(dá)50%，死亡率達(dá)70～90%。病初出現(xiàn)發(fā)熱，體溫達(dá)41℃，厭食，精神不振，隨后出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、跟球震顫、抽搐和角弓反張、昏迷等癥狀。麻痹是疾病晚期的癥狀，此時(shí)，如果有聲音或觸摸等刺激，角弓反張和抽搐癥狀更加嚴(yán)重。出現(xiàn)癥狀后3～4d通常死亡。如果食欲恢復(fù)，動(dòng)物可耐過(guò)，但可出現(xiàn)肌肉萎縮或癱瘓等。發(fā)生麻痹后，皮膚反射降低或消失。有的文獻(xiàn)報(bào)道，可觀察到豬眼瞼水腫、視物不清等。

由毒力較低的血清1型毒株和其他血清型毒株引起的“泰法病”，又稱為溫和性地方流行性麻痹，發(fā)病率和死亡率低。癥狀輕微，病初體溫也升高，逐漸發(fā)展為運(yùn)動(dòng)失調(diào)和背部軟弱，幾天內(nèi)消失。很少發(fā)生完全麻痹。

由腸道病毒屬病毒感染導(dǎo)致的其他臨床癥狀還有妊娠中期的繁殖障礙，即所謂的SMEDI和不育。此外，還可引起腹瀉、肺炎、心包炎、心肌炎以及表皮損傷等。但是其與腦脊髓炎病例的相關(guān)性尚未清楚。

腦脊髓炎病例的特征性病變不明顯。病豬腦膜水腫，腦膜和腦血管充血，心肌和骨骼肌萎縮，腸絨毛膜不萎縮，其他組織無(wú)可見(jiàn)肉眼變化。組織學(xué)變化主要是典型的非化膿性腦脊髓灰質(zhì)變化。：主要部位是脊髓的腹側(cè)柱、小腦灰質(zhì)和腦干。神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，或增生聚集，有明顯的噬神經(jīng)現(xiàn)象，小血管周?chē)辛馨图?xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)細(xì)胞漿內(nèi)有嗜酸性包涵體。

4 診斷要點(diǎn)

4.1 一般性診斷

本病發(fā)生于2～6月齡豬，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，聲音和觸摸刺激后，癥狀加劇，死亡率較高等，可作為流行病學(xué)初步診斷依據(jù)。

4.2 病原學(xué)診斷

（1）病原分離鑒定

應(yīng)采集剛出現(xiàn)神經(jīng)癥狀小豬的脊髓、腦干和小腦或流產(chǎn)胎兒的肺臟。木乃伊胎中往往不含有活的病毒，因而不能用于病毒分離。哺乳仔豬由于母源抗體的保護(hù)，從腸道中很少分離出病毒。樣品需冷藏或放人50%甘油生理鹽水中，送往實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

將含毒組織勻漿處理后接種敏感細(xì)胞（如PK-15細(xì)胞），如病料中含有病毒，接種后3～4d出現(xiàn)病變，再進(jìn)一步連續(xù)盲傳3代，使病毒穩(wěn)定。免疫熒光試驗(yàn)、免疫過(guò)氧化物酶試驗(yàn)和中和試驗(yàn)，可以確認(rèn)病毒。最后，用仔豬接種來(lái)測(cè)定毒株的致病性。

（2）免疫熒光技術(shù)

采用病毒感染后12～16h（細(xì)胞病變產(chǎn)生之前）的細(xì)胞玻片，PBS洗滌后，室溫干燥，用冷丙酮固定，依次用抗PTV的多抗或單抗、異硫氰酸熒光素標(biāo)記的二抗進(jìn)行染色。單抗的效果較好，因?yàn)槎嗫谷旧^易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

（3）血清中和試驗(yàn)

進(jìn)行病毒分離株的血清型確定。將病毒液作10倍連續(xù)稀釋，與不同的標(biāo)準(zhǔn)血清混合后在4℃或37℃下孵育1h，接種單層細(xì)胞，37℃繼續(xù)培養(yǎng)。72h后，觀察判定。與陰性對(duì)照血清組相比，如果某一種標(biāo)準(zhǔn)血清能使病毒致細(xì)胞病變的毒價(jià)下降103，那么，就可以判定分離的病毒為該血清型的PTV。

（4）免疫組化試驗(yàn)

對(duì)石蠟包埋的組織切片，采用此方法進(jìn)行檢測(cè)。過(guò)程較為復(fù)雜，不同批次之間結(jié)果不太一致。所以本法不太常用。

（5）RT-PCR

一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)使用RT-PCR來(lái)檢測(cè)PTV，巢式PCR能夠進(jìn)一步區(qū)分PTV和PEV。

4.3 血清學(xué)診斷

采集急性期和康復(fù)期的血清進(jìn)行ELISA和中和試驗(yàn)，血清效價(jià)增加4倍以上，才能具有診斷意義。

5 防治措施

5.1 預(yù)防

綜合防控措施：加強(qiáng)檢疫，避免引人感染后帶毒的豬。對(duì)發(fā)病豬隔離，移至光線陰暗、安靜的地方。用敏感的消毒劑對(duì)環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。豬場(chǎng)糞便堆積發(fā)酵可殺滅其中的病毒。控制鳥(niǎo)類、加強(qiáng)滅鼠等有助于本病的預(yù)防。

免疫預(yù)防：中歐和馬達(dá)加斯加在發(fā)生PTV-1引起的捷申病時(shí)，曾使用滅活疫苗和培養(yǎng)致弱的活疫苗，對(duì)健康易感犬進(jìn)行免疫預(yù)防，但目前在這些地區(qū)已經(jīng)不再使用疫苗。

通過(guò)將后備母豬在配種前1個(gè)月與不同來(lái)源的豬混養(yǎng)而實(shí)現(xiàn)自然感染，產(chǎn)生的抗體可以保護(hù)仔豬。

5.2 治療

目前尚無(wú)有效的治療措施與抗病毒藥物。據(jù)報(bào)道，聯(lián)合使用長(zhǎng)效磺胺、地塞米松、清熱解毒的中藥制劑以及黃芩多糖等藥物，有一定的療效。

5.3 診療注意事項(xiàng)

本病應(yīng)與表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的其他疾病相區(qū)分，如豬鏈球菌病、日本乙型腦炎、李氏桿菌病、豬偽狂犬病、血凝性腦脊髓炎和食鹽中毒等相區(qū)分。

[1] 劉振豐，張希鳳.豬傳染性腦脊髓炎的診斷報(bào)告[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，1994，（1）：29-30.