人參皂苷Rg1配伍烏頭堿對(duì)體外培養(yǎng)心衰模型心肌細(xì)胞的保護(hù)作用Δ

董艷紅，謝曉芳，李雪梅，朱雅寧，彭成#[1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，成都 61117；2.中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，成都 61117；.華潤三九（雅安）藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625099]

人參皂苷Rg1配伍烏頭堿對(duì)體外培養(yǎng)心衰模型心肌細(xì)胞的保護(hù)作用Δ

董艷紅1，2＊，謝曉芳1，2，李雪梅1，2，朱雅寧3，彭成1，2#[1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，成都 611137；2.中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，成都 611137；3.華潤三九（雅安）藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625099]

目的：考察人參皂苷Rg1配伍烏頭堿對(duì)體外培養(yǎng)心衰模型心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。方法：將新生大鼠心肌細(xì)胞分為正常對(duì)照組、模型組、陽性對(duì)照組（去乙酰毛花苷注射液，1×10－7mol/L）、人參皂苷Rg1組（1×10－8mol/L）、烏頭堿組（1×10－9mol/L）以及人參皂苷Rg1與烏頭堿不同配比的配伍組（1∶1、2∶1、1∶2，V/V）。除正常對(duì)照組外，其余各組細(xì)胞均以0.8%戊巴比妥鈉誘導(dǎo)心肌細(xì)胞心衰模型。成模后，各組細(xì)胞給予相應(yīng)藥物培養(yǎng)1 h，然后檢測(cè)細(xì)胞總?cè)姿嵯佘眨ˋTP）酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力；檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中酸性磷酸酶（ACP）、乳酸脫氫酶（LDH）活力和腦鈉肽（BNP）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）含量以及細(xì)胞中總糖原含量。結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞總ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明顯降低，Na+-K+-ATP酶活力明顯升高，培養(yǎng)液中ACP、LDH活力及BNP含量均明顯升高（P＜0.05）。與模型組比較，各給藥組細(xì)胞總ATP酶活力顯著升高，細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活力顯著降低，且以人參皂苷Rg1與烏頭堿2∶1配伍時(shí)作用最強(qiáng)；烏頭堿組和各配伍組細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活力均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；各給藥組細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、BNP活力均有降低的趨勢(shì)，細(xì)胞內(nèi)總糖原含量和培養(yǎng)液中TNF-α含量無顯著變化（P＞0.05）。結(jié)論：人參皂苷Rg1配伍烏頭堿可改善大鼠心衰模型心肌細(xì)胞ATP酶活力和膜通透性，調(diào)節(jié)細(xì)胞分泌BNP，對(duì)心衰模型心肌細(xì)胞有一定保護(hù)作用，且以人參皂苷Rg1與烏頭堿2∶1配伍時(shí)作用最強(qiáng)。

人參皂苷Rg1；烏頭堿；配伍；心衰模型；心肌細(xì)胞；細(xì)胞膜通透性；離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶

人參皂苷Rg1是中藥人參的主要有效成分之一，屬三醇類皂苷，具有廣泛藥理作用，且近年發(fā)現(xiàn)其可抑制心肌肥大，是治療心衰的潛在有效物質(zhì)[1]。烏頭堿存在于附子等烏頭類毒性中藥材中，人服用0.2 mg即可中毒，具有顯著心肌細(xì)胞毒性[2]。然而，烏頭堿在較低濃度時(shí)對(duì)正常心肌細(xì)胞和戊巴比妥納誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷均具有保護(hù)作用，且與人參皂苷Rg1配伍后作用增強(qiáng)；而在毒性濃度時(shí)與人參皂苷Rg1或Rb1配伍后可明顯降低其心肌細(xì)胞毒性，是中藥配伍增效減毒的科學(xué)體現(xiàn)，這在筆者前期研究中已得到證實(shí)[3-4]，這對(duì)揭示中成藥參附注射液治療心力衰竭的安全有效性具有重要意義。本文在前期研究基礎(chǔ)上，探討人參皂苷Rg1與烏頭堿配伍后對(duì)體外培養(yǎng)大鼠心衰模型心肌細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性、膜離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力等的影響，以進(jìn)一步明確烏頭堿與人參皂苷Rg1配伍對(duì)損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。

1 材料

1.1 儀器

AE2000倒置相差顯微鏡（廈門Motic公司）；ALLEGER X-12離心機(jī)（美國Beckman公司）；Varioskan Flash 2.4.3全波長多功能讀數(shù)儀（美國Thermo公司）。

1.2 藥品與試劑

烏頭堿、人參皂苷Rg1（成都曼斯特生物科技有限公司，批號(hào)：MUST-14072802、MUST-14041311，純度：均≥99.8%）；去乙酰毛花苷注射液（上海復(fù)興朝暉藥業(yè)有限公司，批號(hào)：AF131004，規(guī)格：0.2 mg/mL）；酸性磷酸酶（ACP）、乳酸脫氫酶（LDH）、三磷酸腺苷（ATP）酶測(cè)定試劑盒和肌/肝糖原試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20150130、20141227、20150731、20150729）；大鼠腦鈉肽（BNP）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（上海拜力生物科技有限公司，批號(hào)：均為201511）。

1.3 動(dòng)物

SD大鼠，SPF級(jí)，♀♂各半，鼠齡2～3 d，購自成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[許可證號(hào)：SCXK（川）2015-030]。

2 方法

2.1 細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力的測(cè)定結(jié)果

[5]中方法獲取新生大鼠的原代心肌細(xì)胞，按試驗(yàn)需求將細(xì)胞培養(yǎng)于不同孔板或培養(yǎng)皿中，將處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞分為正常對(duì)照組、模型組、陽性對(duì)照組（去乙酰毛花苷注射液，1.00×10－7mol/L）、人參皂苷Rg1組（1.00×10－8mol/L）、烏頭堿組（1.00×10－9mol/L）以及人參皂苷Rg1與烏頭堿體積配比分別為1∶1、2∶1、1∶2（總體積不變）的配伍組，共8組，每組6孔。按既往建立的方法，采用0.8%戊巴比妥鈉誘導(dǎo)心肌細(xì)胞心衰模型[5]。與正常對(duì)照組細(xì)胞比較，其余組細(xì)胞搏動(dòng)明顯減弱時(shí)，棄去造模液。各給藥細(xì)胞組分別加入相應(yīng)的藥液（200 μL/孔）。將細(xì)胞置于37℃培養(yǎng)箱中孵育1 h，收集細(xì)胞，破碎后按照試劑盒說明書測(cè)定細(xì)胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和總ATP（T-ATP）酶的活力。

2.2 細(xì)胞膜通透性的測(cè)定

將原代心肌細(xì)胞接種于48孔板中，當(dāng)細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期時(shí)，按“2.1”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組10孔，藥物作用1 h后棄去藥液，用磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗細(xì)胞1次，然后每孔加入70μL不含血清的DMEM高糖培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，收集培養(yǎng)液，按試劑盒說明書測(cè)定培養(yǎng)液中ACP、LDH活力。

2.3 細(xì)胞內(nèi)總糖原含量及培養(yǎng)液中BNP、TNF-α含量的測(cè)定

將處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞按“2.1”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組6孔。藥物作用1 h后收集細(xì)胞，破碎后按試劑盒說明書測(cè)定細(xì)胞內(nèi)總糖原的含量；或作用1 h后，棄去藥液，用PBS清洗細(xì)胞1次，然后每孔加入70 μL不含血清的DMEM高糖培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，收集培養(yǎng)液，采用ELISA法按照相關(guān)試劑盒說明書測(cè)定培養(yǎng)液中BNP、TNF-α含量。

3 結(jié)果

3.1 細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力的測(cè)定結(jié)果

與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活力顯著升高，Ca2+-Mg2+-ATP酶、T-ATP酶活力顯著降低（P＜0.05）。與模型組比較，各給藥組細(xì)胞T-ATP酶活力均顯著升高（P＜0.05）；烏頭堿組和3個(gè)配伍組細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活力均顯著降低（P＜0.05）；除人參皂苷Rg1組及人參皂苷Rg1與烏頭堿1∶2配伍組外，其他各給藥組細(xì)胞Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均呈升高趨勢(shì)，其中陽性對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果詳見表1。

表1 各組細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力測(cè)定結(jié)果（±s，n＝6）Tab 1 The activities of ion-related enzymes of cells in each group（±s，n＝6）

表1 各組細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力測(cè)定結(jié)果（±s，n＝6）Tab 1 The activities of ion-related enzymes of cells in each group（±s，n＝6）

注：與正常對(duì)照組比較，＊P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05Note：vs.normal control group，＊P＜0.05；vs.model group，#P＜0.05

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3.2 細(xì)胞膜通透性的測(cè)定結(jié)果

與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、LDH活力均顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，各給藥組細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活力均顯著降低（P＜0.05）；ACP活力不同程度地降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果詳見表2。

表2 各組細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、LDH活力測(cè)定結(jié)果（± s，n＝10）Tab 2 The activities of ACP and LDH in cell culture liquid of each group（±s，n＝10）

表2 各組細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、LDH活力測(cè)定結(jié)果（± s，n＝10）Tab 2 The activities of ACP and LDH in cell culture liquid of each group（±s，n＝10）

注：與正常對(duì)照組比較，＊P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05Note：vs.normal control group，＊P＜0.05；vs.model group，#P＜0.05

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3.3 細(xì)胞內(nèi)總糖原含量與培養(yǎng)液中BNP、TNF-α含量測(cè)定結(jié)果

與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞培養(yǎng)液中BNP含量顯著升高（P＜0.05）；TNF-α含量有升高趨勢(shì)，細(xì)胞內(nèi)總糖原含量呈下降趨勢(shì)，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組比較，各給藥組細(xì)胞培養(yǎng)液中BNP含量均有減少的趨勢(shì)，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；各給藥組細(xì)胞內(nèi)總糖原含量和培養(yǎng)液中TNF-α含量均無升高或降低趨勢(shì)，結(jié)果詳見表3。

表3 各組細(xì)胞內(nèi)總糖原含量和培養(yǎng)液中BNP、TNF-α含量測(cè)定結(jié)果（±s，n＝6）Tab 3 The contents of total glycogen of cells and BNP，TNF-α in cell culture fluid in each group（±s，n＝6）

表3 各組細(xì)胞內(nèi)總糖原含量和培養(yǎng)液中BNP、TNF-α含量測(cè)定結(jié)果（±s，n＝6）Tab 3 The contents of total glycogen of cells and BNP，TNF-α in cell culture fluid in each group（±s，n＝6）

注：與正常對(duì)照組比較，＊P＜0.05Note：vs.normal control group，＊P＜0.05

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4 討論

配伍是中藥治療疾病的主要運(yùn)用形式，主要目的在于減毒增效。配伍增效在現(xiàn)代藥理學(xué)研究中應(yīng)用廣泛，如丹參聯(lián)合葛根對(duì)糖尿病眼病模型大鼠具有協(xié)同增效作用[6]。中醫(yī)藥藥性理論認(rèn)為，中藥的毒性和藥效均屬中藥藥性，在正確利用時(shí)藥物的毒性也可轉(zhuǎn)為藥效。烏頭堿是公認(rèn)的毒性物質(zhì)，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、生殖細(xì)胞、消化細(xì)胞等均有顯著毒性[7]。然而近年來烏頭堿的藥效作用被逐漸認(rèn)識(shí)和重視，如溫善珊等[8]研究發(fā)現(xiàn)烏頭堿在5～100 μmol/L時(shí)對(duì)雙氧水（H2O2）誘導(dǎo)的原代培養(yǎng)大鼠乳鼠心肌細(xì)胞損傷有保護(hù)作用，且呈明顯量-時(shí)-效正相關(guān)。此外，烏頭堿還有抗心律失常、鎮(zhèn)痛、抗炎、調(diào)節(jié)血壓等多種藥理作用[9]。而本研究團(tuán)隊(duì)前期研究也發(fā)現(xiàn)，烏頭堿在3×10－3mol/L及以上濃度時(shí)對(duì)原代培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞具有顯著毒性，可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)離子紊亂、膜上離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)酶活力異常、細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，3× 10－3mol/L時(shí)甚至使細(xì)胞成碎片[10]；但在1×10－9mol/L時(shí)對(duì)原代培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用，可提高細(xì)胞活力、調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)紊亂的離子水平[3]，且在不同濃度下與人參皂苷Rg1配伍可達(dá)到增效減毒的作用。由此可見，烏頭堿不只是導(dǎo)致心臟毒性的毒性物質(zhì)，在低濃度時(shí)也是一種保護(hù)心肌、具有強(qiáng)心活性的物質(zhì)，其特點(diǎn)也符合中藥藥性理論對(duì)藥物毒性和藥效的認(rèn)識(shí)。本研究是在前期研究基礎(chǔ)上的進(jìn)一步試驗(yàn)，具有良好的基礎(chǔ)。

戊巴比妥鈉為選擇性中樞系統(tǒng)抑制藥，大劑量可抑制電壓依賴性心肌細(xì)胞膜Na+通道及K+通道，通過抑制心肌動(dòng)作電位而達(dá)到心力衰竭的效果[11]。而離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)ATP酶在心肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)上分布多，與心肌細(xì)胞功能有緊密關(guān)系[12]。前期研究發(fā)現(xiàn)，烏頭堿致毒時(shí)會(huì)引起心肌細(xì)胞內(nèi)Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活力降低。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致心力衰竭的原因主要與細(xì)胞內(nèi)、外的Na+、K+、Ca2+、Mg2+等離子的濃度有關(guān)，這些離子的轉(zhuǎn)運(yùn)又離不開ATP酶的活性[13]。

本研究果顯示，經(jīng)0.8%戊巴比妥鈉作用后，損傷的心肌細(xì)胞的細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活力升高，Ca2+-Mg2+-ATP酶、T-ATP酶活力下降。給藥后，烏頭堿及人參皂苷Rg1都能顯著降低細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活力，升高Ca2+-Mg2+-ATP酶、T-ATP酶活力；當(dāng)人參皂苷Rg1與烏頭堿配伍比例在1∶1時(shí)升高Ca2+-Mg2+-ATP酶活力和降低Na+-K+-ATP酶活力的作用最為明顯，且對(duì)Na+-K+-ATP酶的作用比兩藥單用效果更好；配伍比例在2∶1時(shí)對(duì)升高T-ATP酶活力的作用最為明顯，且比兩藥單獨(dú)使用效果更好，這也與前期研究結(jié)果（使模型細(xì)胞中Na+水平升高和K+水平降低）的作用一致[3]。心肌細(xì)胞損傷后細(xì)胞內(nèi)的ACP、LDH大量漏出，心肌細(xì)胞膜性結(jié)構(gòu)受損。本研究結(jié)果顯示，造模后心肌細(xì)胞ACP、LDH大量漏出，細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、LDH活力顯著增加，提示細(xì)胞膜通透性增加；受損細(xì)胞經(jīng)人參皂苷Rg1、烏頭堿或兩者配伍作用后其細(xì)胞培養(yǎng)液中ACP、LDH活力均有效降低。人參皂苷Rg1作用較烏頭堿優(yōu)，而人參皂苷Rg1與烏頭堿2∶1配伍時(shí)作用最佳，表明其對(duì)細(xì)胞膜的改善作用最明顯。

綜上所述，人參皂苷Rg1與烏頭堿配伍后對(duì)戊巴比妥鈉所致體外培養(yǎng)大鼠心衰模型心肌細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用，可明顯改善細(xì)胞膜上離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)ATP酶的活力，改善細(xì)胞膜的通透性，并在一定程度上調(diào)節(jié)細(xì)胞分泌BNP的功能；與人參皂苷Rg1、烏頭堿單用比較，二者以2∶1配伍時(shí)對(duì)細(xì)胞ATP酶活力的調(diào)節(jié)作用增強(qiáng)。本研究對(duì)科學(xué)闡釋人參與附子配伍（如參附注射液）治療心力衰竭具有重要意義，對(duì)有毒物質(zhì)烏頭堿的開發(fā)應(yīng)用具有一定的參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] Tang F，Lu M，Yu L，et al.Inhibition of TNF-α medicated NF-κB activation by Ginsenoside Rg1contributes the attenuation of cardiac hypertrophy induced by abdominal aorta coarctation[J].Cardiovasc Pharmacol，2016，doi：10.1097/FJC.0000000000000410.

[2] 彭成.中藥毒理學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2014：49-82.

[3] 費(fèi)巧玲，張雪，董艷紅，等.烏頭堿配伍人參皂苷Rg1對(duì)心肌細(xì)胞毒效濃度研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2015，26（11）：2610-2613.

[4] 張雪，趙炳祥，宋玉琴，等.烏頭堿配伍人參皂苷Rb1對(duì)原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞能量代謝的影響[J].世界科學(xué)技術(shù)：中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2015，17（9）：1785-1789.

[5] 徐菲飛，彭成，王茁伉，等.參附注射液對(duì)戊巴比妥鈉致心衰模型心肌細(xì)胞ATP酶和相關(guān)離子的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（7）：196-199.

[6] 唐洪梅，柴玉娜，涂星，等.丹參聯(lián)合葛根對(duì)糖尿病眼病模型大鼠的協(xié)同作用[J].中國藥房，2014，25（11）：977-980.

[7] 彭成.有毒中藥附子、川烏、草烏的安全性評(píng)價(jià)與應(yīng)用[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2014：139.

[8] 溫善珊，萬海同，張宇燕，等.烏頭堿對(duì)心衰細(xì)胞強(qiáng)心作用的量-時(shí)-效關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)急癥，2012，21（4）：562-564.

[9] 楊武斌，王平.烏頭堿藥理作用及毒性研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2014，25（2）：427-429.

[10] 謝曉芳.附子心臟毒性作用研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

[11] 沈放，楊黎江，路斌，等.海風(fēng)藤提取物對(duì)Na+-K+-ATP酶活力的影響[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2008，19（8）：1959-1961.

[12] Zhan G，Ana S，Zhiyong Z，et al.Loss of ATP-sensitive potassium channel surface expression in heart failure underlies dysregulation of action potential duration and myocardial vulnerability to injury[J].PLoS One，2016，doi：10.1371/journal.pone.0151337.

[13] 金哲雄.何首烏對(duì)缺氧培養(yǎng)心肌細(xì)胞保護(hù)作用的研究[D].延吉：延邊大學(xué)，2005.

Protective Effect of Compatibilities of Ginsenosides Rg1and Aconitine on Myocardial Cells of in vitro Cultured Heart Failure Model

DONG Yanhong1，2，XIE Xiaofang1，2，LI Xuemei1，2，ZHU Yaning3，PENG Cheng1，2（1.College of Pharmacy，Chengdu University of TCM，Chengdu 611137，China；2.State Key Lab Breeding Base of Systematic Research Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST，Chengdu 611137，China；3.Huarun Sanjiu（Ya'an）Pharmaceutical Co.，Ltd.，Sichuan Ya'an 625099，China）

OBJECTIVE：To investigate the protective effect of the compatibilities of ginsenosides Rg1and aconitine on myocardial cell ofin vitrocultured heart failure model.METHODS：The myocardial cells of neonate rat were grouped into normal control group，model group，positive control group（Deslanoside injection，1×10－7mol/L），ginsenosides Rg1group（1×10－8mol/L），aconitine group（1×10－9mol/L）or their compatibilities groups（1∶1，2∶1，1∶2，V/V）.Except for normal control group，other groups were given 0.8%pentobarbital sodium to induce heart failure model of myocardial cells.After modeling，each group was given relevant medicine for 1 h，and then the activities of T-ATPase，Ca2+-Mg2+-ATPase，Na+-K+-ATPase in cells were all detected.The activities of acyl carrier protein（ACP）and lactate dehydrogenase（LDH），and the contents of brain natriuretic party（BNP），TNF-α and total glycogen were measured in cell culture fluid.RESULTS：Compared with normal control group，T-ATPase and Ca2+-Mg2+-ATPase activities were decreased significantly in model group；meanwhile，Na+-K+-ATPase activity was increased significantly，and ACP，LDH activities and BNP content in cell culture fluid were increased significantly（P＜0.05）.Compared with model group，the activities of T-ATPase in treatment groups were increased significantly，while the activity of LDH in cell culture fluid was decreased significantly；when the volume ratio of ginsenoside Rg1to aconitine was 2∶1，protective effect was the strongest；the activities of Na+-K+-ATPase in aconitine group and compatibility groups were all decreased significantly，with statistical significance（P＜0.05）.The activities of ACP and BNP in cell culture fluid were all decreased in treatment groups，but the content of total glycogen in cells and the TNF-α content of in cell culture fluid had no change（P＞0.05）.CONCLUSIONS：Compatibility of ginsenosides Rg1and aconitine can improve ATPase activities and membranous permeability，regulate BNP secretion and protect myocardial cell of heart failure model，especially the compatibility of ginsenosides Rg1to aconitine of 2∶1 ratio.

Ginsenosides Rg1；Aconitine；Compatibility；Heart failure model；Myocardial cell；Membranous permeability；Ion-related ATPase

R285.5

A

1001-0408（2017）04-0472-04

2016-08-07

2016-11-14）

（編輯：林靜）

國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（No.81630101）；國家科技支撐計(jì)劃課題（No.2011BAI13B05）；“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)（No.2013ZX09201018）；四川省2013年重點(diǎn)科技自籌項(xiàng)目（No. 2013JYZ010，2013SZ0114）；四川省博士后科研項(xiàng)目

＊碩士研究生。研究方向：中藥藥理與毒理學(xué)。電話：028-61800018。E-mail：dongyanhongchengdu@126.com

#通信作者：教授，博士。研究方向：中藥藥理與毒理學(xué)。E-mail：pengchengchengdu@126.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.04.11