乳腺癌術后局部復發患者癌組織中Survivin、MMP-9的表達變化及意義

艾秀清，董曉霞，張銀華，木妮熱·木沙江(新疆醫科大學附屬腫瘤醫院，烏魯木齊 830011))

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乳腺癌術后局部復發患者癌組織中Survivin、MMP-9的表達變化及意義

艾秀清，董曉霞，張銀華，木妮熱·木沙江
(新疆醫科大學附屬腫瘤醫院，烏魯木齊 830011))

目的 觀察乳腺癌術后局部復發患者癌組織中Survivin、基質金屬蛋白酶9(MMP-9)的表達變化，并探討其意義。方法 收集乳腺癌經治療后再次復發的患者73例組織標本，采用免疫組化SP法檢測73例患者原發腫瘤組織及復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達情況，并分析Survivin、MMP-9表達變化對患者生存情況的影響。結果 原發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為72.60%(53/73)、69.86%(51/73)，復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為65.75%(48/73)、58.90%(43/73)，原發腫瘤組織與復發腫瘤組織Survivin及MMP-9表達陽性率比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。在原發性腫瘤與復發性腫瘤組織中Survivin表達均陽性31例(42.47%)、均陰性3例(4.11%)、從陽性轉變為陰性22例(30.14%)、從陰性轉變為陽性17例(23.29%)；在原發性腫瘤與復發性腫瘤組織中MMP-9表達均陽性26例(35.62%)、均陰性5例(6.86%)、從陽性轉變為陰性25例(34.25%)、從陰性轉變為陽性17例(23.29%)。復發腫瘤組織中Survivin表達陽性患者1年、3年、5年生存率分別為91.78%、89.04%、68.49%，Survivin表達陰性患者1年、3年、5年生存率分別為94.52%、90.41%、78.08%，Survivin表達陰性患者生存情況優于Survivin表達陽性患者(χ2=4.752，P<0.05)；復發腫瘤組織中MMP-9表達陽性患者1年、3年、5年生存率分別為94.52%、67.12%、52.05%，MMP-9表達陰性患者1年、3年、5年生存率分別為100.00%、89.04%、82.19%，MMP-9表達陰性患者生存情況優于MMP-9表達陽性患者(χ2=8.062，P<0.05)。結論 乳腺癌術后局部復發患者復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達與原發腫瘤組織比較,陽性可轉變為陰性，陰性可轉變為陽性;復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性與患者的生存預后差相關。

乳腺癌；局部復發；Survivin蛋白；基質金屬蛋白酶9

乳腺癌近年發病率呈逐年上升且年輕化趨勢[1]。乳腺癌的發生發展是一個多基因參與的生理過程，其中凋亡抑制基因在乳腺癌發病中起重要作用，Survivin作為一種具有特殊結構的哺乳類凋亡抑制基因，與乳腺癌的發生發展密切相關[2]。而金屬基質蛋白酶9(MMP-9)則與腫瘤的侵襲和轉移密切相關[3]。目前針對乳腺癌Survivin、MMP-9表達的研究主要集中于與患者病理特征的比較，而關于乳腺癌術后局部復發患者瘤組織中Survivin、MMP-9表達的研究鮮見報道。本研究觀察了73例乳腺癌術后局部復發患者瘤組織中Survivin、MMP-9的表達變化，并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年4月～2011年4月新疆腫瘤醫院收治的乳腺癌經治療后再次復發的患者73例作為研究對象，年齡31～78(44.37±7.84)歲。均經病理檢查確診為乳腺癌，且病理學確認為乳腺癌局部復發，患者初診時均采取了手術治療方案；排除合并第二原發癌患者及臨床資料不完整患者。原位腫瘤位于左側40例、右側33例；初診時無淋巴結轉移24例、出現淋巴結轉移49例；TNM分期為Ⅰ期22例、Ⅱ期37例、Ⅲ期12例、Ⅳ期2例。患者自愿簽署知情同意書，且標本采集符合醫院倫理學相關規定。采用門診隨訪或電話隨訪方式，從患者原發腫瘤手術時間開始計算患者的生存時間，以患者死亡作為隨訪終點，隨訪截止日期為2016年5月31日。隨訪包括乳腺B超、胸片及乳腺相關腫瘤抗原等，確定腫瘤進展情況及死亡時間。

1.2 瘤組織中Survivin、MMP-9表達檢測 采用免疫組化SP法檢測患者原發腫瘤組織及復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達。腫瘤組織經石蠟包埋后常規連續切片，將切片經10%中性二甲苯脫蠟固定后常規脫水處理，經浸蠟、鋪片、脫蠟后使用HE染色，然后加入Survivin或MMP-9單克隆抗體。采用DAB顯色，使用PBS代替一抗作為陰性對照，使用已知的Survivin、MMP-9表達陽性的乳腺癌組織切片作為陽性對照。結果由我院病理科兩名經驗豐富的醫師進行獨立評估，隨機選取5個視野，每個視野內計數100個細胞，采用雙評分半定量分析法[4]，根據陽性細胞所占百分比及顯色深淺進行雙評分。Survivin、MMP-9免疫組化陽性產物定位于細胞質，呈棕黃褐色顆粒狀。

1.3 統計學方法 采用SPSS22.0統計軟件。計量資料比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，Kaplan-Meier生存曲線進行生存分析，采用Log-rank檢驗患者生存率。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9的表達變化 原發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為72.60%(53/73)、69.86%(51/73)，復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為65.75%(48/73)、58.90%(43/73)。原發腫瘤組織與復發腫瘤組織中Survivin及MMP-9表達陽性率比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。Survivin表達從原發性腫瘤組織陽性轉變為復發性腫瘤組織陰性22例(30.14%)，從原發性腫瘤組織陰性轉變為復發性腫瘤組織陽性17例(30.14%)；MMP-9表達從原發性腫瘤組織陽性轉變為復發性腫瘤組織陰性25例(34.25%)，從原發性腫瘤組織陰性轉變為復發性腫瘤組織陽性17例(23.29%)。

2.2 復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達對患者生存的影響 復發腫瘤組織中Survivin表達陽性患者1年、3年、5年生存率分別為91.78%、89.04%、68.49%，Survivin表達陰性患者1年、3年、5年生存率分別為94.52%、90.41%、78.08%，Survivin表達陰性患者生存情況顯著優于Survivin表達陽性患者(χ2=4.752，P<0.05)；復發腫瘤組織中MMP-9表達陽性患者1年、3年、5年生存率分別為94.52%、67.12%、52.05%，MMP-9表達陰性患者1年、3年、5年生存率分別為100.00%、89.04%、82.19%，MMP-9表達陰性患者生存情況顯著優于MMP-9表達陽性患者(χ2=8.062，P<0.05)。

3 討論

乳腺癌的發生發展是一個多基因參與、多步驟、多階段的復雜病理過程，在此過程中，細胞凋亡起負調控作用，若細胞凋亡基因表達受到抑制，將導致細胞躲過程序性死亡而發生異常增殖，最終引起腫瘤發生[5,6]。Survivin作為目前發現最強的一種凋亡抑制因子，其不僅抑制細胞凋亡，同時亦參與到對細胞周期調控及新生血管形成過程中[7,8]。研究[9，10]顯示，Survivin高表達能有效抑制細胞多途徑p53、Casepase、Fas等誘導細胞凋亡，同時在調節細胞有絲分裂過程中發揮重要作用，如胞質的分裂、卵裂溝形成及微管的聚合，在腫瘤細胞中，過度的Survivin表達可促進腫瘤細胞跳過細胞周期G2/M期檢查點，從而導致腫瘤細胞發生異常有絲分裂，促進腫瘤細胞增殖，從而使腫瘤細胞逃避凋亡。此外，有學者研究顯示，Survivin與腫瘤血管的形成有密切聯系，Survivin異常增高可促進VEGF所誘導的血管內皮細胞增殖及毛細血管網形成，豐富的血供可促進腫瘤細胞生長和轉移[11]。腫瘤細胞在發生侵襲及轉移過程中，必須破壞細胞外基質(ECM)，而在參與破壞ECM的酶類中基質金屬蛋白酶類(MMPs)起主要作用，其中MMP-9與腫瘤的侵襲及轉移最為密切[12]。MMP-9高表達能導致腫瘤細胞破壞ECM能力增強，從而促使患者發生早期淋巴結轉移，因此MMP-9可作為乳腺癌惡性程度及預后判斷的一個重要指標[13]。

本研究結果顯示，原發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為72.60%、69.86%，復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性率分別為65.75%、58.90%，原發腫瘤組織與復發腫瘤組織中Survivin及MMP-9表達陽性率比較差異均無統計學意義；而在上述患者中，其中一部分患者復發腫瘤組織中表達情況較原發腫瘤組織中發生了改變，在原發性腫瘤與復發性腫瘤組織中Survivin表達均陽性31例(42.47%)、均陰性3例(4.11%)、從陽性轉變為陰性22例(30.14%)、從陰性轉變為陽性17例(23.29%)；在原發性腫瘤與復發性腫瘤組織中MMP-9表達均陽性26例(35.62%)、均陰性5例(6.86%)、從陽性轉變為陰性25例(34.25%)、從陰性轉變為陽性17例(23.29%)。表明復發腫瘤組織與原發腫瘤組織Survivin、MMP-9表達并不是一成不變的。此外，本研究對比分析復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達情況對患者生存的影響，結果顯示，Survivin及MMP-9表達陰性患者生存情況優于Survivin表達陽性患者，差異有統計學意義。此與臨床研究結果相似，可能是由于Survivin、MMP-9表達能從一定程度上反映患者腫瘤病情，從而與患者的生存預后密切相關。

綜上所述，乳腺癌術后局部復發患者其復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達與原發腫瘤組織比較,陽性可轉變為陰性，陰性可轉變為陽性；復發腫瘤組織中Survivin、MMP-9表達陽性與患者的生存預后差相關。

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Expression and significance of survivin and MMP-9 in patients with local recurrence of breast cancer after operation

AIXiuqing,DONGXiaoxia,ZHANGYinhua,MunireMushajiang

(CancerHosptialofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China)

Objective To observe the expression changes of survivin and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) in the cancer tissues of patients with local recurrence of breast cancer after surgery and to explore its significance. Methods Seventy-three cases of tissue specimens from patients with breast cancer recurrence after treatment were collected, and the expression of survivin and MMP-9 in the primary tumor tissues and recurrent tumor tissues were detected by immunohistochemical SP method. Furthermore, we analyzed the effects of survivin and MMP-9 expression changes on the survival condition of patients.Whether the changes of Survivin and MMP-9 expression can effect on survival was also analyzed. Results The positive expression rates of survivin and MMP-9 were 72.60% (53/73) and 69.86% (51/73), respectively in the primary tumor tissues, versus 65.75% (48/73) and 58.90% (43/73) in the recurrent tumor tissues. There was no statistically significant difference in the positive expression rates between them (bothP>0.05). In the primary and recurrent tumor tissues, survivin expression was both positive in 31 cases (42.47%), both negative in 3 cases (4.11%), 22 cases (30.14%) changed from positive to negative, and 17 cases (23.29%) changed from negative to positive. In the primary and recurrent tumor tissues, MMP-9 expression was both positive in 26 cases (35.62%), both negative in 5 cases (6.86%), 25 cases (34.25%) changed from positive to negative, and 17 cases (23.29%) changed from negative to positive. The one-, three-, and five-year survival rates were 91.78%, 89.04%, and 68.49%, respectively, in patients with survivin positive recurrent tumor tissues, versus 94.52%, 90.41%, and 78.08% in in patients with survivin negative recurrent tumor tissues.The survival condition of patients with survivin negative recurrent tumor tissues was better than that of patients with survivin positive (χ2=4.752,P<0.05). The one-, three-, and five-year survival rates were 94.52%, 67.12%, and 52.05%, respectively, in patients with MMP-9 positive recurrent tumor tissues, versus 100%, 89.04%, and 82.19% in patients with MMP-9 negative recurrent tumor tissues. The survival condition of patients with MMP-9 negative recurrent tumor tissues was better than that of patients with MMP-9 positive (χ2=8.062,P<0.05).Conclusions The expression of survivin and MMP-9 in primary and local recurrent tissues of patients with breast cancer can be transformed between positive and negative. The positive expression of survivin and MMP-9 in tumor tissues of recurrence could be correlated with the poor prognosis.

breast carcinoma; local recurrence; survivin protein; matrix metalloproteinase 9

新疆維吾爾自治區自然科學基金聯合基金資助項目(2016D01C346)。

艾秀清(1975-)，女，副主任醫師，主要研究方向為乳腺癌放射治療。E-mail：maojiayue11@163．com

木妮熱.木沙江(1962-)，女，主任醫師，博士生導師，主要研究方向為乳腺癌放射治療。E-mail：muni6@163．com

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.25.006

R737.9

A

1002-266X(2017)25-0020-03

2017-02-10)