原發性腎病綜合征(PNS)患兒血清NEFA/ALB比值的變化①

張國英 李海英

(內蒙古烏蘭察布醫學高等專科學校附屬醫院兒科，烏蘭察布012000)

原發性腎病綜合征(PNS)患兒血清NEFA/ALB比值的變化①

張國英 李海英

(內蒙古烏蘭察布醫學高等專科學校附屬醫院兒科，烏蘭察布012000)

目的：觀察初發及緩解原發性腎病綜合征(PNS)患兒血清NEFA/ALB比值的變化，為臨床PNS的診斷及病情評估提供新指標。方法：對52例PNS急性期患兒、34例PNS緩解期患兒和 50例健康兒童的血清白蛋白(ALB)、游離脂肪酸(NEFA)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(Scr)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平進行定量分析，并對NEFA/ALB比值與其他生化指標進行相關性分析。結果：與正常對照組相比，急性組和緩解組患兒血清ALB、HDL-C水平均顯著降低(P< 0.05)，而急性組患兒血清NEFA/ALB、TC、TG、LDL-C、UA顯著升高(P< 0.05)；緩解組患兒僅TG、LDL-C顯著升高(P< 0.05)。與緩解組相比，急性組患兒血清ALB水平顯著降低(P< 0.05)，而血清NEFA/ALB、TC、TG、LDL-C、UA、BUN、Scr水平均顯著升高(P< 0.05)。將血清生化指標比較中差異有統計學意義的指標與NEFA/ALB比值進行相關分析，結果顯示NEFA/ALB比值與TC、TG、LDL-C、UA、BUN呈顯著正相關性(P均< 0.05)，與ALB呈顯著負相關性(P< 0.05)。多元線性逐步回歸分析結果顯示，血清NEFA/ALB比值與BUN獨立相關(β=0.045，t=1.602，P=0.003)。結論：在PNS疾病發生和發展過程中，NEFA/ALB比值升高預示患兒的腎臟功能損傷加重或腎功能降低，對其進行監測有助于臨床病情評估與判斷。

原發性腎病綜合征；游離脂肪酸；白蛋白；比值

兒童原發性腎病綜合征(Primary nephrotic syndrome，PNS)是一類嚴重影響患兒正常生長發育的免疫介導的腎小球疾病[1,2]。然而PNS的發病機制至今仍不明確，已有研究表明其可能是由于致病因素引起腎小球基底膜通透性增高導致大量尿蛋白，進而出現機體脂代謝異常、蛋白代謝異常等一系列病理生理改變[3,4]。游離脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFA)是脂肪代謝的中間產物，其主要與白蛋白(Albumin，ALB)結合存在于血液中。近年來，有研究顯示在PNS疾病早期可出現不同程度NEFA/ALB比值增高，可作為檢測腎功能受損的靈敏指標[5]。因此，為了進一步探討NEFA/ALB比值與PNS發展過程之間的關系，本研究對我院兒科2013年1月至2014年6月接診的52例PNS患兒的血清蛋白和脂質代謝水平進行了監測，旨在為臨床PNS的診斷及病情評估提供新指標。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 一般資料 選取我院2013年1月至2014年6月收治PNS患兒52例作為急性組，其中男31例、女21例，年齡3.2～10.4歲，平均年齡(6.12±3.53)歲。納入標準：PNS新發，符合中華醫學會兒科學分會腎病組2000年制定的《小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療》中關于PNS診斷標準[6]，即24 h尿蛋白> 3.5 g/d和血清ALB< 30 g/d，且在發病前3個月內未服用過激素、免疫抑制劑及降脂藥物。排除伴有肝功損害、腎功能不全、高膽固醇血癥家族史及營養代謝等疾病。選取同期我院門診隨訪的PNS恢復期(已接受常規激素治療4 ～ 6周，24 h尿蛋白≤ 3.5 g/d，血清ALB≥ 30 g/L[7])患兒34例作為緩解組，其中男24例、女10例，年齡3.1～10.7歲，平均年齡(5.94±3.47)歲。同時隨機選取我院健康體檢中心50例作為正常對照組，其中男32例、女18例，年齡3.4～10.5歲，平均年齡(6.14±3.95)歲。各組家長均對本研究知情并簽署知情同意書，該研究獲得本院倫理委員會批準。三組患兒在性別構成比、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P> 0.05)，具有可比性。

1.1.2 儀器與試劑 日立7060全自動生化儀(HITACHI公司)，Eppendorf 5417R小型臺式高速冷凍離心機(Eppendorf公司)，ALB、尿素氮(Urea nitrogen，BUN)、尿酸(Uric acid，UA)、肌酐(Serum creatinine，Scr)、總膽固醇(Total cholesterol，TC)、甘油三酯(Three acids glyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)試劑盒均由上海科華生物工程公司提供，NEFA試劑盒由日本第一化學株式會社提供。

1.2 方法 急性組患兒在治療前清晨空腹取外周靜脈血，緩解組和正常對照組于清晨空腹采集外周靜脈血。標本采集后，離心分離血清，立即送檢或置于-80℃冰箱保存。檢測方法：①采用自動生化儀測定血ALB、BUN、UA、Scr、TC、TG、LDL-C、HDL-C水平；②采用免疫透射比濁法測定NEFA，按試劑盒操作說明書進行。各項檢測均采用標準化方法并采用低、中和高值質控品進行質控。

2 結果

2.1 血清生化指標比較 與正常對照組相比，急性組和緩解組患兒血清ALB、HDL-C水平均顯著降低(P<0.05)，而急性組患兒血清NEFA/ALB、TC、TG、LDL-C、UA顯著升高(P<0.05)；緩解組患兒僅TG、LDL-C顯著升高(P<0.05)。與緩解組相比，急性組患兒血清ALB水平顯著降低(P<0.05)，而血清NEFA/ALB、TC、TG、LDL-C、UA、BUN、Scr水平均顯著升高(P<0.05)。結果見表1。

2.2 NEFA/ALB比值與其他生化指標的相關性分析 將血清生化指標比較中差異有統計學意義的指標與NEFA/ALB比值相關分析，結果顯示NEFA/ALB比值與TC、TG、LDL-C、UA、BUN呈顯著正相關性(P均<0.05)，與ALB呈顯著負相關性(P< 0.05)，見表2。以NEFA/ALB比值為因變量，以TC、TG、LDL-C、UA、BUN、ALB為自變量，進行多元線性逐步回歸分析，結果顯示：BUN(β=0.045，t=1.602，P=0.003)獨立相關。

表1 三組患者一般臨床資料比較

Tab.1 Comparison of general clinical data of three groups

IndexAcutegroup(n=52)Remissiongroup(n=34)Normalcontrolgroup(n=50)t/Z2)P2)t/Z3)P3)t/Z4)P4)NEFA(mmol/L)0.57±0.240.60±0.260.65±0.121.8940.1081.7250.2531.6940.307Scr(μmol/L)35.46±21.8426.53±11.2035.03±7.480.3680.3972.3700.0292.2610.031TG(mmol/L)1)2.71±0.721.38±0.460.85±0.215.9420.0001.6230.0464.8450.002BUN(mmol/L)5.07±1.433.02±0.844.76±0.550.8010.2241.8620.0232.5180.029ALB(g/L)16.38±2.4538.44±5.6845.26±2.2712.1470.0004.5380.0087.8190.000TC(mmol/L)10.05±0.475.19±0.584.09±0.267.2410.0001.2060.0636.5070.000NEFA/ALB(μmol/g)26.89±5.0715.53±1.4314.49±1.165.0120.0001.1370.0874.4450.000HDL-C(mmol/L)1.82±0.451.73±0.442.28±0.693.1570.0313.3080.0180.6140.267LDL-C(mmol/L)5.61±0.822.69±0.591.35±0.184.9230.0003.8350.0321.2680.005UA(μmol/L)296.15±52.91261.29±16.23255.83±20.844.0240.0001.3190.0843.3150.004

Note：1)Log-transformed values；2)compared between acute group and normal control group；3)compared between remission group and normal control group；4)compared between remission group and acute group.

表2 NEFA/ALB與其他生化指標的Spearman相關性分析結果

Tab.2 Spearman correlation analysis NEFA/ALB and other biochemical indicators

IndexNEFA/ALBrvaluePvalueALB-0.5710.000HDL-C-0.2450.218TC0.5580.000TG0.4590.000LDL-C0.6310.000UA0.4010.008BUN0.7480.000Scr0.2810.074

3 討論

目前，兒童PNS問題日益受到重視，由于該病遷延不愈且易復發，嚴重影響患兒的生長發育。PNS主要表現為大量蛋白尿、高脂血癥以及水腫，其中高脂血癥對腎小球細胞成分的影響的病理機制主要為增加腎小球基膜通透性致腎小球濾過率降低[8,9]。NEFA是脂肪代謝的中間產物，Kamijo等[10]學者于2002年首次發現其具有細胞有毒性。在PNS疾病中，從腎小球濾出的ALB上攜帶的NEFA又伴隨著ALB被重吸收，病理性升高的NEFA不僅對腎小管上皮細胞產生脂毒性作用，而且引起氧化應激反應可使腎小管上皮細胞功能受損，使脂肪酸的代謝去路障礙，進而促進細胞內脂類聚集，導致內皮功能的進一步紊亂，加劇腎功能受損，促進了疾病的發生與發展[11,12]。此外，高濃度NEFA還可誘導促分裂原活化蛋白激酶-細胞外信號調節激酶和核因子NF-κB等途徑的激活和表達增加，釋放大量炎癥因子，進而損傷腎小管血管[13,14]。可見，ALB運載的NEFA在PNS發病機制中發揮了重要作用。近年來，有學者提出ALB運載的NEFA可作為檢測腎功能受損的靈敏指標[15]；還有學者發現急性期PNS患者伴NEFA/ALB比值異常增高[16]。最新模仿人類微小病變腎病大鼠模型的研究中，學者Clement等[17]發現PNS大鼠血漿NEFA/ALB比值顯著升高，并且可能與PNS疾病的發生和發展過程存在密切關系。因此，PNS患者血漿NEFA/ALB比值的變化有望成為其病情評估的新指標。

本研究中，我們對PNS患兒的血清蛋白和脂質代謝水平進行了監測，結果顯示急性組患兒血清NEFA/ALB比值顯著高于緩解組和正常對照組(P< 0.05)，ALB水平顯著降低(P< 0.05)，提示PNS患兒在急性期中存在嚴重的蛋白尿，導致NEFA-ALB復合物經腎臟丟失。此外，NEFA-ALB吸收引起急性組患兒血清TC、TG、LDL-C、UA、BUN、Scr水平均顯著高于緩解組和正常對照組(P< 0.05)，提示NEFA-ALB比值的增高引起腎臟局部脂質的積聚。Spearman相關性分析結果顯示，NEFA/ALB比值與TC、TG、LDL-C、UA、BUN呈顯著正相關性(P均< 0.05)。這與NEFA-ALB比值和PNS患兒脂代謝嚴重程度相關的假設一致[18]，可能由于NEFA具有細胞有毒性，其在腎臟內累積導致嚴重的腎小管間質損傷，促進細胞內脂類聚集，最終加劇腎功能受損。此外，進一步多元線性逐步回歸分析結果顯示，NEFA/ALB比值與BUN獨立相關，提示NEFA/ALB比值與PNS患兒腎功能降低關系密切。因此，在PNS疾病發生和發展過程中，NEFA/ALB比值升高預示患兒的腎臟功能損傷加重或腎功能降低，在反映機體脂代謝異常情況方面NEFA/ALB變化比常規采用LDL-C、TG和TC指標更為敏感，對其進行監測有助于臨床病情評估與判斷。

綜上所述，在PNS疾病中NEFA/ALB比值對腎臟局部的脂毒性及其引發的相關脂代謝紊亂不容忽視，通過檢測重癥PNS患兒NEFA/ALB比值的變化不僅有助于病情的評估和治療，改善患兒的生存質量和預后，而且可為以后開展隊列研究、病因診斷和治療手段等研究提供初步的理論依據。

[1] Wang Y,Bu J,Zhang Q,etal.Expression pattern of aquaporins in patients with primary nephrotic syndrome with edema[J].Mol Med Rep,2015,12(4):5625-5632.

[2] Yokoyama H,Sugiyama H,Narita I,etal.Outcomes of primary nephrotic syndrome in elderly Japanese:retrospective analysis of the Japan Renal Biopsy Registry (J-RBR)[J].Clin Exp Nephrol,2015,19(3):496-505.

[3] Uwaezuoke SN.Steroid-sensitive nephrotic syndrome in children:triggers of relapse and evolving hypotheses on pathogenesis[J].Ital J Pediatr,2015,41(1):1-6.

[4] Dellepiane S,Ribaldone DG.Pathogenesis of nephrotic syndrome after hematopoietic stem cell transplantations[J].Minerva Med,2016,107(3):183-184.

[5] Klooster A,Hofker H S,Navis G,etal.Nonesterified fatty acids and development of graft failure in renal transplant recipients[J].Transplantation,2013,95(11):1383-1389.

[6] 中華醫學會兒科分會腎臟病學組.小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療[J].中華兒科雜志,2001,39(12):746-749.

[7] 劉棟,宋宏慶.血清脂蛋白(a)和超敏C反應蛋白對兒童原發性腎病綜合征診斷的意義探討[J].中國實驗診斷學,2016,20(1):90-91.

[8] Alegríatorres GA,Aguilarkitsu MA,Estradaloza MJ,etal.Cardiovascular risk factors in children with primary nephrotic syndrome[J].Rev Med Inst Mex Seguro Soc,2015,53(3):284-293.

[9] Liang Y,Chen Y,Chen Y,etal.Role of the glucocorticoid receptor in the recurrence of primary nephrotic syndrome[J].Exp Ther Med,2015,10(4):1556-1562.

[10] Kamijo A,Kimura K,Sugaya T,etal.Urinary free fatty acids bound to albumin aggravate tubulointerstitial damage[J].Kidney Int,2002,62(5):1628-1637.

[11] Kamijo A,Kimura K,Sugaya T,etal.Urinary fatty acid-binding protein as a new clinical marker of the progression of chronic renal disease[J].J Lab Clin Med,2004,143(1):23-30.

[12] Dhindsa S,Ghanim H,Dandona P.Nonesterified fatty acids,albumin,and platelet aggregation[J].Diabetes,2015,64(3):703-705.

[13] Song Y,Li X,Yu L,etal.Non-esterified fatty acids activate the ROS-p38-p53/Nrf2 signaling pathway to induce bovine hepatocyte apoptosis in vitro[J].Apoptosis,2014,19(6):984-997.

[14] Li X,Li X,Chen H,etal.Non-esterified fatty acids activate the AMP-activated protein kinase signaling pathway to regulate lipid metabolism in bovine hepatocytes[J].Cell Biochem Biophys,2013,67(3):1157-1169.

[15] Pavievi ID,Jovanovi VB,Taki MM,etal.Quantification of total content of non-esterified fatty acids bound to human serum albumin[J].J Pharmadceut Biomed,2016,129(10):43-49.

[16] Giedd KN,Bergmann SR.Fatty acid imaging of the heart[J].Curr Cardiol Rep,2011,13(2):121-131.

[17] Clement LC,Macé C,Avilacasado C,etal.Circulating angiopoietin-like 4 links proteinuria with hypertriglyceridemia in nephrotic syndrome[J].Nat Med,2014,20(1):37-46.

[18] 吳 亞,郄會卿,魏宏蓮,等.游離脂肪酸在慢性原發性腎小球腎炎的初步研究[J].西部醫學,2009,21(9):1486-1487.

[收稿2016-07-06 修回2016-08-11]

(編輯 張曉舟)

Study on changes of ratio of serum NEFA/ALB in children with primary nephrotic syndrome

ZHANGGuo-Ying，LIHai-Ying.

DepartmentofPediatrics,AffiliatedHospitalofWulanchabuMedicalCollege,Wulanchabu012000,China

Objective:To study on the changes of the ratio of serum NEFA/ALB in children with primary nephrotic syndrome,and to provide new indicators for the diagnosis and severity assessment of clinical PNS.Methods: The levels of serum albumin(ALB),free fatty acid (NEFA),urea nitrogen(BUN),uric acid(UA),creatinine(Scr),total cholesterol(TC),triglyceride(TG),low density lipoprotein cholesterol(LDL-C),high density lipoprotein cholesterol(HDL-C) were quantitatively measured in 52 patients with PNS in acute stage (acute stage group) and 34 patients with PNS in complete remission (remission stage group) and 50 healthy children(control group).The lipid/lipoprotein and renal function parameters were also analyzed.Results: Compared with controls group,the levels of serum ALB,HDL-C in acute group and remission group decreased significantly (P< 0.05),but the levels of serum NEFA/ALB,TC,TG,LDL-C,UA,BUN,Scr in acute group increased significantly (P< 0.05),the levels of serum TG,LDL-C in acute group increased significantly (P< 0.05).Compared with remission group,the levels of serum ALB in acute group decreased significantly (P< 0.05),but the levels of serum NEFA/ALB,TC,TG,LDL-C,UA,BUN,Scr increased significantly (P< 0.05).In PNS children,the ratio of NEFA to ALB was positively correlated with the levels of TC,TG,LDL-C,UA,BUN (P< 0.05),while negatively correlated with ALB(P< 0.05).Multiple linear regression analysis showed that the ratio of NEFA to ALB had an independent association with BUN levels (β=0.045，t=1.602，P=0.003).Conclusion: In the development process of PNS disease,serum ratio of NEFA to ALB increased indicates impaired kidney function or reduced kidney function,and it can help doctor assess and judge the clinical condition.

Primary nephrotic syndrome;Non-esterified fatty acids;Albumin;Ratio

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.03.026

張國英(1976年-)，女，講師，主治醫師，主要從事兒科學方面的研究。

及指導教師：李海英(1973年-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事內科學方面的研究，E-mail：jiaoyirv@163.com。

R692.3 R446.1

A

1000-484X(2017)03-0437-04