橘絡對D—半乳糖致亞急性衰老小鼠的抗氧化作用

李孟+李昭霞+李金科+舒嬋媛+孫琪+付鵬清

【摘要】目的：觀察橘絡對D-半乳糖誘導亞急性衰老小鼠模型的的抗衰老作用。方法：將昆明種小鼠隨機分成3組：衰老+生理鹽水組、衰老+低橘絡劑量組、衰老+高橘絡劑量組，通過后頸背部皮下注射D-半乳糖（D-gal）建立衰老模型，以灌胃方式加入橘絡，連續處理49天，檢測血清總抗氧化能力。結果：橘絡能明顯提高小鼠的總抗氧化能力。結論：橘絡具有能明顯改善D-半乳糖致亞急性衰老小鼠的抗氧化能力。

【關鍵詞】橘絡；總抗氧化能力；D-半乳糖；抗衰老

橘絡又名橘絲、橘筋，為蕓香科植物柑橘Citrus reticulata Blanco中的果皮與內果皮之間的維管束群。一般呈粗如線，黃白色。味甘、苦，性平。歸肝、肺、脾經。氣微香。主產四川、重慶、福建、浙江；此外，廣西、廣東、江西、湖南、湖北、云南、貴州等地亦產。橘絡的中醫藥應用最早見于《日華子本草》，后世歷代本草和《中藥大辭典》等現代中醫藥志書也均有收載。在中藥材的國家和地方藥品標準中，《中國藥典》1963年版收載橘絡，記其“通經絡，宣滯氣。用于治療經絡氣滯，痰積血癖，傷酒口渴。”《四川省中藥材標準》1987年版也收載了橘絡，記其：“化痰，通絡。用于治療痰熱咳嗽，胸脅痛，咯血等病癥。”目前，有關橘絡化學成分研究報道較少，僅有余作測定過橘絡中橙皮苷的含量，李飛等從橘絡中分離得到14個化合物，化合物結構類型為黃酮類、檸檬苦素類、甾體類等類型。因此，橘絡是否具有抗氧化甚至延緩衰老的作用，當前沒有相關的文獻報道。故本文對橘絡的抗氧化能力進行了相關的研究。

一、材料與方法

1、材料

中藥橘絡購自怡軒大藥房。動物：昆明種小鼠，體重18～22g，均為雌性小鼠，由長沙天勤技術有限公司提供。D-半乳糖試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

2、方法

（1）取小鼠21只，隨機分為3組，每組7只，置于本校生命科學樓科研中心動物房以普通飼料喂養。在室溫為25℃，相對濕度為50%的條件下飼養，自由進食飲水，適應性飼養I周后開始試驗。

（2）橘絡水煎液的制備

配置橘絡水煎液，用電子秤分別量取225.0g、25.0g的橘絡，向煎鍋內加入1500ml的蒸餾水，分別煎到1000ml，將其置于適宜的環境中保存起來，分別用EP管分裝。

（3）D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型的建立

用生理鹽水配置濃度為500mg/kg的D-半乳糖溶液，三組小鼠按照體重皮下注射D-半乳糖，給藥量為0.01g/ml，連續注射49天。第25天開始分別給予高劑量橘絡煎液、低劑量橘絡煎液和生理鹽水的灌胃，小鼠灌胃的劑量為0.02g/mL。

（4）第49天摘除小鼠眼球進行取血，離心分離血清，按照試劑盒說明測量血清中T-AOC的含量。

3、統計學分析

統計學處理采用spss10.0軟件分析，數據用“”表示，組間比較采用t檢驗，顯著性水平為P<0.05。

二、結果

從表1可見，橘絡高、低劑量組均具有增強D-半乳糖致亞急性衰老小鼠的總抗氧化能力的作用。

三、討論

衰老的自由基學說是Denham Harman在1956年提出的，認為衰老過程中的退行性變化是由于細胞正常代謝過程中產生的自由基的有害作用造成的。目前，自由基理論在機體衰老中的作用已受到人們的高度重視。所謂自由基（free radical）又稱游離基，就是具有未配對的原子、原子團、分子或離子叫自由基。自由基的化學性質活潑，有極強的氧化反應能力，可使各種生物膜的不飽和脂肪酸發生過氧化，形成過氧化脂質，這些產物具有一定毒性，能使蛋白質分子內和分子間發生交聯，發生去氫，加成，裂解等反應，從而引起DNA的雙螺旋交聯出現錯誤或無法分裂，一些酶的活性改變，影響細胞的代謝。因此機體防御體系的抗氧化能力的強弱與健康程度存在著密切聯系，若設法提高機體的抗氧化能力將有助于延緩機體衰老過程的和老年病的防治。

橘絡是我國傳統常用中藥之一，用藥歷史悠久。有理氣，止咳化痰，通絡的功效。常用于咳嗽咯血，橘絡有通絡，理氣，化痰的作用。主要用于治療經絡不暢通，長時間咳嗽引起的胸痛，痰中帶血等病癥。《日華子本草》云：“治渴及吐酒。”《本草求原》說：“通經絡，舒氣，化痰。”現代藥學專著也記載了橘絡，如《四川中藥志》記載其：“化痰通絡，治肺勞咳痰、咳血等癥”。最近的相關實驗表明，橘絡具有黃酮類等化合物。橘絡是否具有抗氧化作用進而能延緩衰老正是本實驗需要探索的，本實驗運用D-半乳糖誘導亞急性衰老小鼠模型來檢測橘絡的抗氧化能力。實驗可以看出，橘絡能明顯改善D-半乳糖誘導亞急性衰老小鼠模型的氧化能力，提示橘絡可提高機體抗氧化系統的活力甚至具有延緩衰老的作用，但其作用機理還有待于進一步的研究。

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