乳腺癌FDG攝取與VEGF、p53表達在淋巴結轉移中的臨床意義

尹 培，劉 浩，霍紅旗，王海東，游志鑫，趙改花(.河北省邯鄲市中心醫院核醫學科，河北 邯鄲 05600；.河北醫科大學第一醫院核醫學科，河北 石家莊 0500；.河北省邯鄲市中心醫院病案科，河北 邯鄲 05600)

·論 著·

乳腺癌FDG攝取與VEGF、p53表達在淋巴結轉移中的臨床意義

尹 培1，劉 浩2，霍紅旗1，王海東1，游志鑫1，趙改花3
(1.河北省邯鄲市中心醫院核醫學科，河北 邯鄲 056001；2.河北醫科大學第一醫院核醫學科，河北 石家莊 050031；3.河北省邯鄲市中心醫院病案科，河北 邯鄲 056001)

目的探討乳腺癌脫氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)攝取與血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、p53表達在淋巴結轉移中的關系。方法選取經手術證實的乳腺癌患者92例，術前均進行正電子發射型計算機斷層顯像/CT全身檢查，并記錄所有腫瘤組織的最大標準化攝取值(maximal standard uptake value,SUVmax)。術后切除的乳腺癌組織均進行VEGF和p53表達檢測，計算不同臨床病理特征乳腺癌組織的VEGF和p53表達陽性率。分析乳腺癌FDG攝取與VEGF、p53表達在淋巴結轉移中的關系。結果有淋巴結轉移的乳腺癌組織中VEGF和p53的陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移的乳腺癌組織(P<0.05)。有淋巴結轉移的乳腺癌組織中VEGF與p53的表達有相關性(rs=0.563,P=0.000)，無淋巴結轉移的乳腺癌組織中VEGF與p53的表達有相關性(rs=0.430,P=0.000)。隨VEGF和p53陽性表達增強，乳腺癌組織攝取FDG的SUVmax逐漸增高(P<0.05)。在乳腺癌組織中，SUVmax與VEGF、p53表達呈正相關(rs=0.730，P=0.019，rs=0.610，P=0.035)。結論VEGF、p53表達與乳腺癌淋巴結轉移有關，兩者可能有協同作用，乳腺癌FDG攝取可反映淋巴結的生成及腫瘤的侵襲能力，并反映腫瘤更多的生物學特性。

乳腺腫瘤;脫氧葡萄糖;血管內皮生長因子類

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發病率逐年上升，并呈年輕化態勢增長。乳腺癌淋巴結轉移為最常見的轉移途徑，如何準確找到有轉移的淋巴結并指導其治療，避免術后并發癥尤為重要。臨床常見的影像學檢查方法有超聲、鉬靶X線和CT檢查[1-2]，這些檢查主要反映病灶的解剖學特征。正電子發射型計算機斷層顯像(positron emission computed tomography，PET)/CT全身顯像是一種分子水平上的診斷技術，其最大標準化攝取值(maximal standard uptake value,SUVmax)是常用的半定量指標，能夠反映腫瘤細胞的代謝活性，在乳腺癌的復發、轉移和療效預測等方面都具有重要意義[3-4]。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)可以促進血管內皮的生成，為腫瘤淋巴結轉移提供途徑。p53突變基因，在多數惡性腫瘤中均可檢測到，一些研究發現p53與腫瘤的侵襲能力有關。目前，VEGF和p53的研究較為廣泛和成熟，但在乳腺癌方面的研究尚少，且結果不一。本研究探討乳腺癌脫氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)的攝取與VEGF、p53表達在淋巴結轉移中的關系，以間接反映腫瘤的血管生成及侵襲狀態，旨在為臨床合理化診療提供信息依據，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年5月—2016年5月河北省邯鄲市中心醫院收治的乳腺癌患者92例，均為女性，年齡26～75歲,平均(55.65±9.88)歲，均經手術病理證實；導管癌72例，小葉癌13例，乳頭狀癌5例，黏液腺癌2例；有淋巴結轉移68例，無淋巴結轉移24例；年齡>50歲37例，≤50歲55例;腫瘤長徑范圍1.5～4.0 cm，其中≤2 cm 34例，>2 cm 58 例。

1.2 方法 應用荷蘭飛利浦公司GEMINI TF64 PET/CT顯像儀。所有患者檢查前禁食6～8 h，檢查當天檢測空腹血糖，控制血糖<6.8 mmol/L，由手背靜脈注射18F-FDG(5.0 MBq/kg)，安靜休息約50 min后，上機進行PET/CT全身檢查。整個掃描過程為7～9個床位，每個床位約2 min，層厚5 mm，掃描部位為顱底至股骨頸。儀器自動利用CT數據對PET圖像進行衰減矯正，通過有序子集最大期望值迭代法對圖像進行重建和融合。勾畫感興趣區，記錄所有患者腫瘤組織的最大標準化攝取值(maximal standard uptake value,SUVmax)。

1.3 染色及評定標準 所有標本均經4%中性甲醛固定、梯度乙醇脫水、石蠟包埋、制作4 μm連續切片，采用免疫組織化學法。鼠抗人VEGF單克隆抗體、鼠抗人p53單克隆抗體及免疫組織化學試劑盒均購于北京中杉生物技術有限公司，具體操作步驟參照試劑盒說明進行。經顯微鏡觀察，染色評定標準：VEGF表達檢測以乳腺癌細胞細胞漿或包膜內出現棕黃色顆粒為陽性細胞，p53表達檢測以細胞核內出現棕黃色顆粒為陽性細胞。按每個視野中計數每100個腫瘤細胞的陽性細胞數，將每視野中≤20%陽性細胞數定為表達陰性，將每視野中>20%陽性細胞數定為表達陽性。陽性表達又按照陽性細胞數所占百分率分為弱陽性(20%～40%)、陽性(>40%～60%)和強陽性(>60%)。

1.4 統計學方法 應用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析。計量資料比較分別采用F檢驗和q檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；不同指標間相關性比較采用Spearman秩相關分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同臨床特征乳腺癌組織VEGF、p53的表達 腫瘤長徑≤2 cm的乳腺癌組織與腫瘤長徑>2 cm的乳腺癌組織VEGF和p53陽性表達率差異無統計學意義(P>0.05)。 年齡≤50歲患者的乳腺癌組織與年齡>50歲患者的乳腺癌組織VEGF和p53陽性表達率差異無統計學意義(P>0.05)。有淋巴結轉移的乳腺癌組織中VEGF和p53陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移的乳腺癌組織,差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同臨床特征乳腺癌組織VEGF、p53陽性表達率比較Table 1 The positive expression rates of VEGF and p53 in breast cancer tissue with different clinical features (例數，%)

2.2 乳腺癌組織VEGF與p53表達的關系 有淋巴結轉移的乳腺癌組織中，VEGF陰性表達14例，弱陽性表達14例，陽性表達16例，強陽性表達24例；p53陰性表達22例，p53弱陽表達10例，陽性表達14例，強陽性表達22例。VEGF與p53表達有相關性(rs=0.563,P=0.000)。無淋巴結轉移的乳腺癌組織中，VEGF陰性表達12例，弱陽性表達8例，陽性表達4例，強陽性表達0例；p53陰性表達14例，p53弱陽表達2例，陽性表達2例，強陽性表達6例。VEGF與p53表達有相關性(rs=0.430,P=0.000)。

2.3 乳腺癌組織SUVmax與VEGF、p53表達的關系 隨VEGF、p53陽性表達增強，乳腺癌組織攝取FDG的SUVmax逐漸增高，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

在乳腺癌組織中，SUVmax與VEGF表達呈正相關(rs=0.730，P=0.019),與p53表達呈正相關(rs=0.610，P=0.035)。

表2 不同VEGF、p53表達強度乳腺癌組織SUVmax比較Table 2 The relationship between the expressions of VEGF and p53 and SUVmax in breast cancer tissue ±s)

*P<0.05與陰性表達比較 #P<0.05與弱陽性表達比較

△P<0.05與陽性表達比較(q檢驗)

3 討 論

VEGF又稱血管內皮因子,是血管生成過程中能夠促進內皮細胞有絲分裂的蛋白質，其相對分子質量為34 000 000～42 000 000，廣泛存在于人體正常組織器官中，也可分布于許多腫瘤組織中。VEGF在增強血管滲透性、誘導血管發生和生成以及內皮細胞生長、促進細胞遷移、抑制細胞凋亡等方面發揮作用。VEGF家族成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F、胎盤生長因子[5]。VEGF受體是酪氨酸激酶受體，細胞膜是其結合位點。其中VEGF-C、VEGF-D和受體VEGFR-3主要誘導特異性淋巴管生成。VEGF在多種腫瘤組織中都呈高表達，它作為最有效的促血管生長因子之一，在癌細胞的發生、發展和轉移中起著重要作用[6]。本研究結果顯示，有淋巴結轉移的乳腺癌組織的乳腺癌組織的VEGF陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移者，差異有統計學意義。因此，VEGF高表達可能與腫瘤細胞淋巴結轉移有關，可作為淋巴結轉移的重要參考指標。Yang等[7]研究顯示，VEGF-C和VEGF-D在食管癌組織中呈不同程度表達，其表達陽性率高于正常組織，并且在淋巴結轉移組的表達均顯著高于無淋巴結轉移組。另有研究表明，Survivin和VEGF-C在乳腺癌組織中高度表達，兩者呈正相關，Survivin的表達可能影響VEGF-C的侵襲能力，使其呈高表達,從而導致淋巴管的生成,造成乳腺癌淋巴轉移[8]。Zhao等[9]研究也表明，VEGF表達與淋巴結轉移有關。但Bonhin等[10]研究結論不同，結果顯示喉鱗癌VEGF表達與淋巴結轉移無相關性。以上研究結果不一，可能是由于VEGF基因的多態性[11]造成的。VEGF至少有30個單核苷酸多態位點，可能通過影響VEGF的轉錄或表達，從而影響腫瘤的發生發展和預后。不同腫瘤間甚至同一腫瘤不同部位的VEGF表達存在巨大差異，推測可能與基因多態性有關。此外，VEGF對淋巴結是否轉移的不同表達可能與種族有關。在宮頸癌患者中，淋巴結轉移組中的VEGF表達高于無淋巴結轉移組，通過種族的亞組分析，在亞洲人種中，VEGF高表達增加宮頸癌淋巴結轉移風險，而在韓國或日本人種中，VEGF高表達則不會增加淋巴結轉移的風險[12]。

p53是一種腫瘤抑制基因，相對分子質量為53 000 000，它由393個氨基酸組成，具有特異的轉錄激活作用。在所有惡性腫瘤中，50%以上會出現該基因的突變。p53基因突變后，由于其空間構象發生改變，失去了對細胞生長、凋亡和DNA修復的調控作用，由抑癌基因轉變為癌基因。本研究有淋巴結轉移者乳腺癌組織p53陽性表達率高于無淋巴結轉移者。何丹等[13]研究結果顯示，乳腺癌淋巴結轉移組中的p53蛋白陽性表達率為58.85%，無淋巴結轉移組中的p53蛋白陽性表達率為30.77%，2組間p53的陽性表達率差異有統計學意義。表明p53表達可作為乳腺癌淋巴結轉移潛能的判斷指標之一。有研究結果則不同，伊朗患乳腺癌的庫爾德婦女，其p53表達與淋巴結轉移呈負相關[14]。在三陰性乳腺癌中，p53表達呈相對高表達。這可能與雌激素受體、表皮生長因子受體2的狀態有直接關系。本研究結果顯示，有淋巴結轉移組中的p53和VEGF表達均高于非淋巴結轉移組，這說明VEGF和p53均參與促進乳腺癌淋巴管生成的過程，進而導致腫瘤侵襲轉移，且轉移后的腫瘤細胞侵襲性可能更強、惡性程度可能更高。并且VEGF表達和p53表達在淋巴結轉移前后均具有一定相關性，也提示兩者在乳腺癌的發生發展中可能具有一定的協同作用。乳腺癌侵襲轉移是多因素、多基因、多步驟共同作用的結果，因此，多項檢測技術的聯合將對疾病作出更準確的評估。

PET/CT顯像是一種無創性分子影像技術，能根據功能及生物學特征來定性分析病變[15]。有研究顯示，PET/CT評估乳腺癌治療后淋巴結轉移的患者中，有轉移的淋巴結的SUVmax均值為8.3±3.6，良性淋巴結的SUVmax均值為4.6±1.9，2組間差異有統計學意義[16]。另有研究也表明，癌組織攝取FDG的SUVmax與淋巴結轉移有關，SUVmax越高，患者發生轉移的可能性越大，且SUVmax與VEGF表達呈正相關[17]。18F-FDGPET/CT顯像標準化攝取值對乳腺癌的預后也有一定臨床價值，有研究表明腫瘤的SUVmax越小，患者的生存期相對越長，反之，生存期則相對較短[18]。本研究中無論有無淋巴結轉移，乳腺癌組織的VEGF表達與p53表達均具有相關性，說明兩者在乳腺癌的發生發展中，可能起到一定的協同作用；SUVmax與VEGF、p53陽性表達強度呈正相關，隨著表達強度增加，SUVmax升高，提示PET/CT顯像SUVmax有可能反映腫瘤的血管生成狀態，并有可能預測侵襲程度的高低，從而為臨床提供更多的腫瘤生物學特性信息。

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(本文編輯：趙麗潔)

The clinical significance of FDG uptake and the expression of VEGF and p53 in breast cancer with lymph node metastasis

YIN Pei1, LIU Hao2， HUO Hong-qi1, WANG Hai-dong1, YOU Zhi-xin1, ZHAO Gai-hua3
(1.DepartmentofNuclearMedicine,theCenterHospitalofHandanCity,HebeiProvince，Handan056001,China； 2.DepartmentofNuclearMedicine，theFirstHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050031，China； 3.DepartmentofMedicalRecord，theCenterHospitalofHandanCity,HebeiProvince，Handan056001,China)

Objective To evaluate the relationship between the uptake of fluorodeoxyglucose(FDG) and the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF) as well as p53 in breast cancer with lymph node metastasis. Methods The selected 92 cases with breast cancer had been performed positron emission computed tomography before operation,and recorded the maximal standard uptake value. The expression of VEGF or p53 of breast cancer tissue were tested after operation, and the positive expression rates of VEGF or p53were calculated. The relationship were analyzed between the uptake of FDG and the expression of VEGF and p53 in breast cancer with lymph node metastasis. Results The positive expression rates of p53 and VEGF with lymph node metastasis were obviously higher than that without lymph node metastasis in breast cancer(P<0.05). The expression of VEGF was correlated with the expression of p53 in breast cancer tissue with lymph node metastasis(rs=0.563,P=0.000). The expression of VEGF was correlated with the expression of p53 in breast cancer tissue with no lymph node metastasis(rs=0.430,P=0.000). When the positive expression of VEGF or p53 became stronger, the SUVmax values was increased gradually(P<0.05). The SUVmax value showed positive correlation with the expression of VEGF or p53 in breast cancer tissue(rs=0.730,P=0.019,rs=0.610,P=0.035). Conclusion The expressions of VEGF and p53 are associated with lymph node metastasis of breast cancer, and the SUVmax values are related to the expressions intensity of VEGF and p53. Maybe there is a synergistic effect between VEGF and p53. And the uptake of FDG maybe reflect the ability of lymph node metastasis and tumor invasion. It provides the basis for further clinical guidance for rational treatment.

breast neoplasms; deoxyglucose; vascular endothelial growth factors

2016-12-15；

2017-01-14

河北省醫學科學研究重點課題(ZD20140118)

尹培(1981-)，女，河北石家莊人，河北省邯鄲市中心醫院主治醫師，醫學碩士，從事核醫學研究。

R737.9

A

1007-3205(2017)04-0438-05

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.04.016