不同HBV DNA檢測方法對PEG-IFNɑ-2b治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎療效判斷的影響

郭春霞， 李 嘉， 徐曾麗， 郭 潔， 翟 璐， 韓 旭

(1 天津醫科大學研究生院, 天津 300070； 2 天津市第二人民醫院 肝病1科， 天津 300192)

論著/病毒性肝炎

不同HBV DNA檢測方法對PEG-IFNɑ-2b治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎療效判斷的影響

郭春霞1，2， 李 嘉2， 徐曾麗1，2， 郭 潔2， 翟 璐2， 韓 旭2

(1 天津醫科大學研究生院, 天津 300070； 2 天津市第二人民醫院 肝病1科， 天津 300192)

目的 在PEG-IFNɑ-2b治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎(CHB)過程中，探討應用不同HBV DNA檢測方法對療效判斷的影響。方法 選取2014年9月-2016年1月天津市第二人民醫院收治的CHB患者，應用PEG-IFNɑ-2b治療24周內，HBV DNA低敏方法檢測(最低檢測下限500 IU/ml)首次陰轉，且36周內低敏檢測持續陰性的HBeAg陽性CHB患者83例。36周內采用高敏方法檢測(最低檢測下限20 IU/ml)持續陰性的患者(陰性組)33例，持續陽性的患者(陽性組)50例。對比2組在12、24和36周時HBeAg、HBsAg下降水平以及HBeAg血清學轉換率。正態分布的計量資料2組間比較采用成組t檢驗；非正態分布的計量資料2組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗，計數資料2組間比較采用χ2檢驗。結果 在HBV DNA低敏檢測陰性后的12、24和36周，陰性組HBeAg下降值均明顯優于陽性組，差異均有統計學意義[0.32(0.16～0.92) log10COI vs 0.14(0.01～0.30) log10COI,Z=-3.061,P=0.002; 0.44(0.19～1.15) log10COI vs 0.16(0.04～0.35) log10COI,Z=-3.043,P=0.002; 0.51(0.36～1.21) log10COI vs 0.24(0.10～0.46) log10COI,Z=-3.880,P<0.001]。在HBV DNA低敏檢測陰性后的12周，2組HBsAg下降水平差異無統計學意義(P=0.067)，但在24和36周陰性組HBsAg下降值均明顯高于陽性組，差異均有統計學意義[0.13(-0.02～0.33) log10IU/ml vs 0.08(-0.02～0.16) log10IU/ml,Z=-2.207,P=0.021; 0.16(0.03～0.47) log10IU/ml vs 0.03(-0.08～0.20) log10IU/ml,Z=-2.363,P=0.018]。在HBV DNA低敏檢測陰性后12周，陰性組HBeAg血清學轉換率為30.30%，陽性組為16.00%，2組比較差異無統計學意義(P=0.174)，24和36周陰性組HBeAg血清學轉換率分別為36.36%和39.39%，明顯高于陽性組的16.00%和18.00%，2組比較差異均有統計學意義(χ2= 4.507,P=0.040;χ2= 4.671,P=0.042)。結論 在PEG-IFN治療HBeAg陽性CHB的過程中，為更準確的判斷患者的抗病毒療效，HBV DNA應該采用高度敏感的方法檢測。

肝炎， 乙型， 慢性； 肝炎病毒, 乙型； 干擾素α-2b； 治療結果

HBV DNA是慢性乙型肝炎(CHB)病毒復制和傳染的最直接標志[1-2]。HBV DNA的復制可以啟動和激發機體的免疫反應，導致肝細胞損傷[3]。HBV DNA載量是評價抗病毒藥物療效的一項重要指標，既往許多研究探討CHB抗病毒治療的HBV DNA陰轉率，卻未曾分析不同檢測方法其最低檢測下限亦有所不同。根據不同的檢測下限，HBV DNA的陰轉也是相對的，因此探索不同HBV DNA檢測方法對CHB抗病毒療效判斷的影響具有重要意義。本研究回顧性分析在PEG-IFNɑ-2b治療HBeAg陽性CHB患者過程中，HBV DNA低度敏感檢測(低敏)陰轉后36周內，高度敏感(高敏)方法檢測持續陰性與持續陽性患者的抗病毒療效。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年9月-2016年1月天津市第二人民醫院收治的CHB患者，診斷標準、治療指征均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[4]。納入標準：HBeAg陽性CHB患者應用PEG-IFNɑ-2b(商品名：佩樂能，80 μg，1次/周，皮下注射)單藥抗病毒治療24周，期間HBV DNA低敏方法檢測每4周1次，在首次陰轉后36周內低敏檢測持續陰性。排除標準：既往接受過抗病毒治療；合并其他肝炎病毒重疊感染；合并酒精性肝病、藥物性肝病、自身免疫性疾病；合并惡性腫瘤、精神神經疾病、嚴重心腎疾病；妊娠或哺乳期婦女。

1.2 試劑與方法 ALT、AST采用VITROS 350全自動生化分析儀(美國強生公司)進行檢測，試劑由美國貝克曼庫爾特公司提供。HBV血清學標志物檢測采用ECLIA法，應用COMBAS E411免疫分析儀及試劑盒(羅氏診斷產品有限公司)。其中HBsAg為定量檢測，檢測范圍為0.05～52 000 IU/ml，≥0.05 IU/ml為陽性，HBeAg為半定量檢測，≥1 COI為陽性。血清HBV DNA低敏檢測方法：采用實時熒光定量PCR核

酸分析儀(型號：ABI7500)、DNA檢測試劑盒(磁珠法)(上海科華生物工程股份有限公司)進行檢測，最低檢測下限值為500 拷貝/ml。高敏檢測方法：采用實時熒光定量PCR核酸分析儀(型號：COBASRTaqManR48)、DNA檢測試劑盒(羅氏診斷產品有限公司)進行檢測，最低檢測下限值為20 IU/ml。

入選患者在HBV DNA低敏方法檢測陰性后的36周內，高敏方法檢測持續陰性的患者納入陰性組，持續陽性的患者納入陽性組。對比2組在12、24和36周時HBeAg、HBsAg下降水平以及HBeAg血清學轉換率。

2 結果

2.1 一般資料 共納入患者83例，其中陰性組33例，男23例，女10例，平均(31.85±8.52)歲；陽性組50例，男38例，女12例，平均(32.80±7.36)歲。2組患者在性別、年齡以及HBeAg、HBsAg、ALT、AST水平方面比較，差異均無統計學意義(P值均>0.05)(表1)。

2.2 HBeAg、HBsAg下降水平比較 在HBV DNA低敏檢測陰性后的12、24和36周，陰性組HBeAg下降值均明顯高于陽性組，差異均有統計學意義(P值分別為0.002、0.002、<0.001)。在HBV DNA低敏檢測陰性后的12周，2組患者HBsAg下降水平差異無統計學意義(P=0.067)。但在24、36周陰性組HBsAg下降值均明顯高于陽性組，差異有統計學意義(P值分別為0.021、0.018)(表2)。

表1 2組患者一般資料比較

表2 2組患者低敏檢測陰性后12、24、36周HBeAg、HBsAg下降水平比較

2.3 HBeAg血清學轉換率比較 在HBV DNA低敏檢測陰性后12周，陰性組HBeAg血清學轉換率有高于陽性組的趨勢，但差異無統計學意義(P=0.174)，24、36周陰性組HBeAg血清學轉換率明顯高于陽性組，差異均有統計學意義(P值分別為0.040、0.042)(表3)。

表3 2組患者低敏檢測陰性后12、24和36周HBeAg血清學轉換率比較[例(%)]

3 討論

CHB可發展為肝纖維化、肝硬化以及肝細胞癌[5]，目前想達到臨床治愈的目標非常困難，因此使療效獲益最大化成為CHB現階段的研究熱點[6]。HBV DNA載量對評價CHB抗病毒療效有重要意義，總結不同的HBV DNA檢測方法對CHB抗病毒療效的影響，篩選出相對精準的檢測方法，有利于更客觀地進行療效評價。

有研究[7]指出HBeAg可以抑制Toll樣受體的激活，而Toll樣受體的激活可以抑制HBV DNA的復制[8]，故HBeAg的存在可以增加HBV DNA的存留[9]。同時HBeAg也是HBV DNA前C基因區的編碼產物，HBV DNA的高復制往往提示HBeAg的高表達，HBeAg血清學轉換多被認為提示HBV DNA復制減少或病變靜止。本研究中HBV DNA在低敏檢測法陰轉后12、24和36周，高敏方法檢測陰性組HBeAg下降水平均明顯高于陽性組，且陰性組HBeAg血清學轉換率在24和36周時亦明顯高于陽性組。因此在CHB抗病毒治療過程中應該選擇高敏方法檢測HBV DNA水平，以更好地觀察抗病毒療效，優化治療方案，使療效獲益最大化。

HBsAg水平對PEG-IFN治療CHB的抗病毒療效具有預測作用[10]。CHB抗病毒治療過程通常是HBV DNA先陰轉，繼而伴隨HBeAg水平下降及血清學轉換，最后實現HBsAg的下降和消失[8-9,11]。本研究中在HBV DNA低敏檢測法陰轉后12周，陰性組的HBsAg下降水平與陽性組差異無統計學意義，考慮與HBsAg變化滯后于HBeAg有關，有待擴大樣本量進一步證明。在HBV DNA低敏檢測法陰性后的24和36周，陰性組HBsAg下降值均明顯高于陽性組，再次說明應用高敏方法檢測HBV DNA能更準確的判斷CHB患者的抗病毒療效。

本研究結果表明HBV DNA低敏方法檢測陰性并不代表血清HBV DNA真正陰轉。對于治療后高敏方法檢測HBV DNA仍為陽性的患者應及早更換治療方案，可聯合核苷和核苷酸類藥物使HBV DNA實現真正的陰轉或相對而言更準確的陰性，從而達到更快地降低HBeAg水平甚至血清學轉換，對已實現HBeAg血清學轉換且HBsAg低水平的患者有望實現CHB的臨床治愈。

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引證本文：GUO CX, LI J, XU ZL, et al. Impact of HBV DNA detection methods on evaluating the clinical effect of PEG-IFNɑ-2b in treatment of HBeAg-positive chronic hepatitis B: a comparative analysis[J]. J Clin Hepatol, 2017, 33(4): 664-667. (in Chinese) 郭春霞, 李嘉, 徐曾麗, 等. 不同HBV DNA檢測方法對PEG-IFNɑ-2b治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎療效判斷的影響[J]. 臨床肝膽病雜志, 2017, 33(4): 664-667.

(本文編輯：朱 晶)

Impact of HBV DNA detection methods on evaluating the clinical effect of PEG-IFNɑ-2b in treatment of HBeAg-positive chronic hepatitis B: a comparative analysis

GUOChunxia,LIJia,XUZengli,etal.

(GradualSchoolofTianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China)

Objective To investigate the impact of different HBV DNA detection methods on evaluating the clinical effect of PEG-IFNɑ-2b in the treatment of HBeAg-positive chronic hepatitis B (CHB). Methods A total of 83 CHB patients who were admitted to Tianjin Second People′s Hospital from September 2014 to January 2016 and treated with PEG-IFNɑ-2b for less than 24 weeks with clearance for the first time detected by HBV DNA low-sensitivity method (the lower limit of detection was 500 IU/ml) and negative results within 36 weeks obtained by low-sensitivity detection. Among these patients, 33 patients with negative results within 36 weeks obtained by high-sensitivity detection (the lower limit of detection was 20 IU/ml) were enrolled in negative group, and 50 with positive results were enrolled in positive group. The reductions in HBeAg and HBsAg and HBeAg seroconversion rate at 12, 24, and 36 weeks were compared between the two groups. The independent-samplesttest was used for comparison of normally distributed continuous data between groups, the Mann-WhitneyUrank sum test was used for comparison of non-normally distributed continuous data between groups, and the chi-square test was used for comparison of categorical data between groups. Results At 12, 24, and 36 weeks after negative results were obtained by HBV DNA low-sensitivity detection, the negative group had a significant reduction in HBeAg than the positive group [12 weeks: 0.32 (0.16-0.92) log10COI vs 0.14 (0.01-0.30) log10COI,Z=-3.061,P=0.002; 24 weeks: 0.44 (0.19-1.15) log10COI vs 0.16 (0.04-0.35) log10COI,Z=-3.043,P=0.002; 36 weeks: 0.51 (0.36-1.21) log10COI vs 0.24 (0.10-0.46) log10COI,Z=-3.880,P<0.001]. At 12 weeks after negative results were obtained by HBV DNA low-sensitivity detection, there was no significant difference in the reduction in HBsAg (P=0.067), while at 24 and 36 weeks, the negative group had a significant reduction in HBsAg than the positive group [24 weeks: 0.13 (-0.02-0.33) log10IU/ml vs 0.08 (-0.02-0.16) log10IU/ml,Z=-2.207,P=0.021; 36 weeks: 0.16 (0.03-0.47) log10IU/ml vs 0.03 (-0.08-0.20) log10IU/ml,Z=-2.363,P=0.018]. At 12 weeks after negative results were obtained by HBV DNA low-sensitivity detection, there was no significant difference in the HBeAg seroconversion rate between the negative group and the positive group (30.30% vs 16.00%,P=0.174), while at 24 and 36 weeks, there were significant differences between the two groups (36.36% vs 16.00% and 39.39% vs 18.00%,χ2=4.507 and 4.671,P=0.040 and 0.042). Conclusion In the treatment of HBeAg-positive CHB using PEG-IFN, high-sensitivity detection methods should be used to accurately evaluate the effect of antiviral therapy.

hepatitis B, chronic； hepatitis B virus；interferon alfa-2b； treatment outcome

10.3969/j.issn.1001-5256.2017.04.013

2016-11-10；

2016-11-26。

天津市衛生局科技基金重點攻關項目(13KG126)

郭春霞(1988-)，女，主要從事肝病的診治研究。

李嘉，電子信箱：18622663700@163.com。

R512.62

A

1001-5256(2017)04-0664-04