殼聚糖-磺酸甜菜堿對人肝癌HepG-2細胞的siRNA遞送實驗研究

董 偉，李大玉，惠 景，范 芳，李長福，姜 念，劉 云，朱欣婷

(1.遵義醫學院 貴州省普通高等學校特色藥物腫瘤防治重點實驗室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫學院 生物化學教研室，貴州 遵義 563099)

基礎醫學研究

殼聚糖-磺酸甜菜堿對人肝癌HepG-2細胞的siRNA遞送實驗研究

董 偉1,2，李大玉2，惠 景1,2，范 芳1,2，李長福1,2，姜 念1，劉 云1，朱欣婷1,2

(1.遵義醫學院 貴州省普通高等學校特色藥物腫瘤防治重點實驗室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫學院 生物化學教研室，貴州 遵義 563099)

目的 設計合成新型高分子材料殼聚糖-磺酸甜菜堿(CS-DMAAPS)化合物，并考察該材料與siRNA復凝后對人肝癌HepG-2細胞的轉染能力。方法 采取Michael加成法將含C=C雙鍵的磺酸甜菜堿化合物(DMAAPS)與殼聚糖(CS)偶聯接枝；利用核磁共振氫譜進行結構表征；CCK-8檢測材料的細胞相容性；熒光顯微鏡觀察siRNA的轉染效率；Real-time PCR檢測轉染siRNA后對Bcl-2 mRNA的沉默效率。結果 核磁共振氫譜數據表明：DMAAPS已成功枝接到CS上。熒光顯微鏡觀察結果顯示：質量比(m0/mt：CS-DMAAPS/siRNA)為32、16、8、4、2的復合顆粒分別轉染人肝癌HepG-2細胞24 h后，轉染率分別為33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR檢測結果顯示：質量比為4的CS-DMAAPS/siRNA復合顆粒轉染人肝癌HepG-2細胞48 h后，對人肝癌HepG-2細胞的Bcl-2基因沉默效率為26.8%。結論 殼聚糖-磺酸甜菜堿(CS-DMAAPS)化合物能實現siRNA對人肝癌HepG-2細胞的轉染，且細胞相容性良好，能實現目標基因的部分沉默。

殼聚糖；磺酸甜菜堿化合物；復合顆粒；人肝癌HepG-2細胞；siRNA

上世紀60年代，著名分子生物學家Joshua Lederberg認為分子生物學最終的應用將是直接控制人類染色體上的某些核苷酸序列[1]。因此科學家們從上世紀90年代就開始進行基因……