三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床評價

摘要：目的：探討三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床價值。方法：隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產保健孕婦800例，梅毒反應素選擇TRUST（甲苯胺紅不加熱試驗）檢驗，梅毒螺體抗體選擇ELISA（酶聯免疫吸附試驗）、TPPA（梅毒螺旋體顆粒凝集試驗）與膠體金法（金免疫層析試驗）檢驗。即TPPA檢驗均呈現陽性指標時，方可確診為潛伏妊娠梅毒。結果：本次實驗800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽性檢出率為3.12%。3種檢驗方法結果對比中，可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種，假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法；ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預測值更是在98%以上，且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現象。結論：ELISA檢驗作為潛伏妊娠梅毒檢測常見方法，輔助TRUST檢驗和膠體金法工作的開展，可提升陽性檢出率，為后續母嬰傳播預防及阻斷提供可靠性數據支持。

關鍵詞：血清檢查；潛伏妊娠梅毒；陽性率

梅毒作為性傳播病癥，主要因梅毒螺旋體感染導致的全身性病變，性接觸、妊娠均屬于該病傳播的主要方式。特別在女性妊娠期間，梅毒感染將會引起早產和胎兒水腫、流產與死產、宮內生長局限等問題，而在新生兒中后遺癥也尤為嚴重，即先天梅毒兒[1]。因此，加強孕婦產前檢查于治療，是預防胎傳梅毒的關鍵手段。鑒于此，隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產保健孕婦800例為研究對象，探討三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床價值。現總結如下：

1 資料與方法

1.1 研究資料

隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產保健孕婦800例，年齡區間在20-39歲，年齡中位數為（29.5±9.5）歲。800例孕婦中，均無任何梅毒癥狀及體征；采用空腹肘靜脈采血的方式，以5ml血液樣本為基準，對樣本血清予以分離處理。潛伏妊娠梅毒診斷標準：孕婦或配偶存在梅毒感染史、婚外性行為；本人存在流產和早產、死產與分娩梅毒兒等現象；血清學檢查呈現陽性；無任何梅毒癥狀或體征。先天梅毒兒診斷標準：新生兒、母親血清梅毒檢查中，均呈現陽性；新生兒存在以下2種及其以上表現，斑疹和股端掌趾蛻皮、斑丘疹和黏膜損害、肝脾腫大與病理性黃疸、水腫、貧血及呼吸困難、腹脹、低體重等。

1.2 儀器與試劑

儀器：酶標儀、洗板機（均由北京普朗公司生產）和核酸擴增熒光檢測儀（羅氏lightcycler2.0）；試劑：TP-ELISA試劑盒（生產企業：英科新創（廈門）科技有限公司）、TRUST試劑盒（生產企業：上海榮盛有限公司）、GICA試劑盒（生產企業：艾康（杭州）生物有限公司）、TPPA試劑盒（生產企業：日本富士瑞必歐株式會社）、室內質控血清（生產企業：科華公司）。

1.3 檢測

對800例孕婦血清予以檢驗，即TRUST檢驗、ELISA檢驗、TPPA檢驗、膠體金法4種血清試驗。下文主要針對TRUST檢驗、ELISA檢驗及膠體金法步驟予以分析。

1.3.1TPPA檢驗

將血清置于U型培養板處予以稀釋，以1：80、1：40、1：20、1：10的比例，形成四種稀釋液；再經致敏和未致敏明膠顆粒的添加，置于實驗室內；且于120min后，對實驗結果予以判定[2]。

1.3.2ELISA檢驗

通過碳酸鹽包被緩沖液的使用，對血清抗體予以稀釋，經待測血清向包被反應孔的添加，輔助酶標抗體，將孵育時間控制在30-60min、孵育溫度控制在37℃；再經四甲基聯苯胺底物液的顯色處理，在硫酸終止反應的前提下，反應孔顏色較深，則證明待測血清陽性越強，反之則為陰性[3]。

1.3.3膠體金法

選擇去離子水對氯金酸實施溶解，以此將其濃度控制在0.2g/L，經煮沸操作后，向溶液內滴加1/25比例的檸檬酸三鈉，將溶液濃度控制在10g/L時，持續煮沸7分鐘后，完成15納米的膠體金制備工作；結合免疫層析測試條的運用，因該測試條由吸水濾紙、吸水纖維及硝酸纖維素構成，可在金標記物、待測血清混合的基礎上，呈現2條紅色色帶，則為血清陽性；1條則為血清陰性；0條則為試劑失效[4]。

1.4 評價指標

當TPPA檢驗均呈現陽性指標時，方可確診為潛伏妊娠梅毒。其中，陽性檢出率=（陽性檢出例數-假陽性檢出例數）/確診未潛伏妊娠梅毒例數×100.00%；假陽性率=假陽性檢出例數/800×100.00%。

1.5 統計學方法

通過SPSS 20.0統計學軟件的選擇，組間數據采用卡方、t值檢驗。P<0.05時，證明數據對比存在統計學意義。

2 結果

2.1 潛伏妊娠梅毒陽性檢出率

將TPPA檢驗結果同時呈現陽性指標作為潛伏妊娠梅毒檢驗標準，于本次實驗800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽性檢出率為3.12%。

2.2 ELISA、TRUST及膠體金法結果對比

3種檢驗方法結果對比中，可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種，假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法。

2.3 ELISA、TRUST及膠體金法效能對比

ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預測值更是在98%以上，且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現象。

3 討論

梅毒主要經梅毒螺旋體慢性或系統性病變引起的性傳播疾病，分為Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、Ⅲ期梅毒和潛伏梅毒、先天梅毒等，按照《中華人民共和國傳染病防治法》相關標準，梅毒屬于乙類防治病種。同時，梅毒典型癥狀主要為：Ⅰ期梅毒：硬下疳且呈現無痛性、紅色硬結，多發外生殖器；Ⅱ期梅毒：以梅毒疹為主要體征，且存在全身癥狀，硬下疳可自行消退；Ⅲ期梅毒：皮膚黏膜損傷和近關節結節、腦血管梅毒、梅毒性腦膜炎及主動脈瓣閉鎖障礙等[5]。

妊娠梅毒多以潛伏狀態為主，且在孕婦內毒螺旋體、費梅毒螺旋體檢查中，血清樣本呈現假陽性，雖患者無任何梅毒癥狀，但卻呈現陽性指標，加大妊娠潛伏梅毒診斷難度。故醫學領域急需超靈敏陽性血清檢驗技術，以便更快、更準做好妊娠潛伏梅毒診斷工作。而在此過程中，常見血清試驗包含TRUST檢驗、ELISA檢驗、TPPA檢驗、膠體金法等方法，以TPPA檢驗的方式，其結果更具準確性和權威性價值；其余3種方法則是以高靈敏度、經濟、便捷的特點，在妊娠潛伏梅毒診斷中得以常見[6]。

同時，若要從根本上避免先天梅毒兒，則應在孕期加強梅毒篩查工作。據國外研究結果表明，孕28周、分娩晚期梅毒復查工作，能夠在精準診斷潛伏妊娠梅毒的同時，將先天梅毒兒控制在最低標準。結合本文研究結果顯示，800例孕婦中，潛伏妊娠梅毒患者共存在25例，陽性檢出率為3.12%。3種檢驗方法結果對比中，可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種，假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法；ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%，陰性預測值更是在98%以上，且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現象。

總之，ELISA檢驗作為潛伏妊娠梅毒檢測常見方法，輔助TRUST檢驗和膠體金法工作的開展，可提升陽性檢出率，為后續母嬰傳播預防及阻斷提供可靠性數據支持。

參考文獻：

[1]符琴，王咸菊，王桂，等.妊娠合并梅毒的高危因素分析[J].熱帶醫學雜志，2016，16（7）：933-936.

[2]黃必然，周姝，楊遠超，等.潛伏梅毒孕婦及其新生兒特異性IgM抗體檢測分析[J].中國熱帶醫學，2014，14（8）：962-964.

[3]吳奇，王麗，季靈婷，等.上海閘北地區妊娠梅毒分子流行病學特征分析[J].檢驗醫學，2016，31（06）：486-490.

[4]笪蘇蓉，陳官芝，董娜，等.梅毒患者外周血特異性轉錄因子FOXP3 mRNA的表達[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2015，14（02）：84-88.

[5]賴其偉.潛伏梅毒患者的血清降鈣素原檢測分析[J].醫學檢驗與臨床，2016，27（1）：22-24.

[6]謝春雷.潛伏梅毒發病率上升趨勢原因分析[J].中國衛生產業，2016，13（26）：59-61.