蒙藥枸杞子-7與P4503A和GSH-Px活性相關性研究△

白梅榮 伊麗娜 韓曉靜 王亮亮 廉榮梅

(內蒙古民族大學 內蒙古 通遼 028000)

蒙藥枸杞子-7味散處方來源于《觀者之喜》，蒙藥名為朝努音·哈日木格-7，異名為七味龐巴列散(《中國醫學百科全書·蒙醫學》)、龐巴列-7(《方劑學》)。該處方由枸杞子、沙棘、木香等7味藥組成。本方性溫，臨床常用于治療婦女血瘀癥[1-3]。本實驗研究枸杞子-7與小鼠肝臟Ⅰ相代謝酶P4503A和Ⅱ相代謝酶谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性的相關性研究，了解枸杞子-7體內代謝過程，為臨床合理用藥提供科學依據。

1 實驗材料

1.1 儀器設備:酶標儀、離心機、P4503A試劑盒、GSH-Px試劑盒、移液槍、AUW120D電子天平(沈陽龍騰電子有限公司)。

1.2 實驗動物:40只昆明種小鼠，雄性，體重20±2g，許可證號碼：SCXK(吉)-2011-0004，由長春市億斯實驗動物技術有限責任公司提供。

2 實驗方法

2.1 動物處理方法:取小鼠40只，雄性，隨機分成正常對照組，枸杞子-7高、中、低劑量組，每組10只，灌胃給藥，1天灌胃1次，連續灌胃10天，末次給藥10min后，取各組小鼠肝組織，放入冷生理鹽水中洗去浮血，濾紙吸干后稱取0.5g，按1:9加入冷生理鹽水，冷浴勻漿，勻漿液以3000r/min離心10min,得組織上清液，冰箱低溫保存，待測P4503A與GSH-PX酶活性[4-6]。

2.2 P4503A和GSH-Px活性測定方法：從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；樣本孔加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37度恒溫箱溫育60min，棄去液體，吸水紙上拍桿，每孔加滿洗滌液，靜置1min,甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗版5次。

每孔加入底物A、B各50μL，37度避光孵育15min。

每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果見表。

3 實驗結果

與正常對照組相比，枸杞子-7高、中、低3個劑量均明顯降低GSH-Px活性(P<0.05)；與正常對照組相比，枸杞子-7中劑量組明顯升高肝組織P4503A活性(P<0.05),結果見表1。

表1 蒙藥枸杞子-7與P4503A和GSH-Px活性的相關研究

注：與正常對照組比較※P<0.05

4 結論

實驗結果提示，蒙藥枸杞子-7可能既是GSH-Px抑制劑，又是P4503A誘導劑。枸杞子-7體內代謝與P4503A有關。

5 討論

細胞色素P450是一種高鐵血紅素的蛋白，廣泛分布于肝臟、小腸等器官,是體內最重要的Ⅰ相藥物代謝酶。現代研究表明[1-2],P4503A占肝臟及腸道中P450酶系總含量的50%以上，參與90%以上口服藥物的催化代謝，因此了解藥物對P4503A酶活性的影響,將對藥物的臨床合理用藥有著十分深遠的指導意義。

GSH-Px幾乎存在于所有組織和細胞中，但主要存在于肝臟、結腸和生殖腺中的Ⅱ相代謝酶之一。主要清除脂類氫過氧化物、清除H2O2、減輕有機氫過氧化物對機體的損傷、參與前列腺素合成的調節等作用。檢測GSH-Px活性是衡量機體抗氧化力的重要指標。因此，通過藥物與該酶的相關性研究，可評價其藥物是否存在抗氧化能力。

本實驗結果顯示，①枸杞子-7 明顯下調肝組織中GSH-Px活性。可見，枸杞子-7具有明顯的抗氧化作用。②枸杞子-7可明顯上調肝組織P4503A活性。提示，枸杞子-7體內代謝與P4503A有關，而枸杞子-7通過誘導P4503A活性可加速本身代謝，降低體內藥物含量。因此，臨床口服應用枸杞子-7時適當加大劑量才能保證其臨床有效劑量，發揮其較好療效。

[1]巴根那.蒙醫方劑學[M].呼和浩特：內蒙古人民出版社，2007,112.

[2]布和巴特爾，奧·烏力吉.傳統蒙藥與方劑[M].赤峰：內蒙古科學技術出版社，303.

[3]內蒙古自治區衛生廳編著.內蒙古蒙藥材標準[S].赤峰:內蒙古科技出版社,1987.

[4] 李平,程建峰.地塞米松、苯巴比妥鈉和利多卡因對昆明種小鼠肝P450 3A酶的影響[J]. 第四軍醫大學學報，2001，26-28.

[5] 佘集凱,薩仁高娃,霍萬學,等. 地錦草提取物對小鼠肝組織GSH- PX和CAT活性的影響[J].內蒙古民族大學學報(自然科學版),2005,191-139.

[6] 王傳鵬. 芹菜素對雄性小鼠肝臟 SOD、GSH-Px、CAT活力影響[J].中國實用醫藥,2013,21-22.