白羽肉雞葡萄球菌分離鑒定

劉苗苗

DOI：10.3969/j.issn.2096-3637.2017.10.010

摘要：某肉雞養殖場，養殖42日齡白羽肉雞7萬只，40多只白羽肉雞出現了采食減少，關節腫大，腹瀉，個別的出現了急性死亡。為了確定引起白羽肉雞發死亡的病原菌，無菌病死肉雞的肝臟、心血、關節滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，得到1株病原菌，被鑒定為葡萄球菌。動物回歸試驗結果表明，分離到的葡萄球菌具有很強的致病性。藥敏試驗結果顯示，藥敏結果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感；對頭孢他啶、丁胺卡娜、多西環素、氨芐西林、青霉素、阿莫西林、慶大霉素7種藥物耐藥。

關鍵詞：白羽肉雞； 葡萄球菌；藥敏試驗

中圖分類號：S858.23 文獻標識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）10-0014-01

葡萄球菌是人類和動物正常菌群，廣泛的存在與空氣、飲水、飼料各種物體內，還存在與、人的體表面皮膚、黏膜、呼吸道和腸道中等，是環境中一種條件性致病菌，其中，、葡萄球菌是雞舍及雞體內外的常在菌，當外界條件改變時，如飼養過大、通風不良、轉群等不良的因素，均導致雞抵抗力下降時，引發葡萄球菌的發生。雞致病性葡萄球菌病臨床表現為急性敗血癥、關節炎、滲出性皮炎、皮膚壞死和骨膜炎等癥狀，以雛雞最易感，且具有發病率高、死亡性快的特點，一般的成年雞感染后多呈慢性病程，是危害肉雞養殖業的主要細菌性疾病之一。是由金黃色葡萄球菌引起雞的急性敗血性或慢性傳染性疾病，該病發生無明顯的季節性，一年四季均可發病。本實驗通過采集無菌病死白羽肉雞的肝臟、心血、關節滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，得到1株病原菌，被鑒定為葡萄球菌。動物回歸試驗結果表明，分離到的葡萄球菌具有很強的致病性。因此，對分離的葡萄球菌進行了藥敏試驗，分析其耐藥性，為白羽肉雞的葡萄球菌的防治提供指導意義。

1發病情況

2017年5月，某肉雞養殖場，養殖42日齡白羽肉雞7萬只，40多只白羽肉雞出現了采食減少，關節腫大，腹瀉，個別的出現了急性死亡。

2細菌的分離鑒定

無菌采集病死白羽肉雞的肝臟、心血、關節滲出液等病料組織接種于7%脫纖兔血培養基上，置37℃恒溫箱培養12h，選取7%脫纖兔血培養基單個優勢菌落再接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養上培養后。挑取純化的培養的分離菌株進行革蘭氏染色鏡檢觀察其形態學。結果顯示，在7%脫纖兔血培養基長出了光滑邊緣整齊的菌落，形成透明的溶血環；在甘露醇氯化鈉瓊脂培養基上長出了中等大小的桔黃色菌落；在普通培養基上生長出圓形、隆起金黃色菌落；革蘭氏染色鏡檢可見，呈圓形，單個短鏈和成堆的葡萄串狀排列陽性菌。

3細菌生化試驗

取純化培養的分離菌株接種于營養肉湯中，37℃震蕩箱培養12h后，調整菌液濃度為2～3個麥氏濁度后，按照說明加入陽性菌鑒定試條中，置37℃培養48h后，觀察生化特性結果。結果顯示，分離菌分解葡萄糖、半乳糖、甘露糖，且產酸不產氣；不分解阿拉伯糖、棉籽糖、菊糖和肌醇、纖維二糖、并水解淀粉；不產生H2S，靛基質試驗陰性；VP試驗和過氧化氫酶試驗陽性；與報道的葡萄球菌生化特性一致。

4動物回歸試驗

取純化培養的分離菌株接種于營養肉湯中，37℃震蕩箱培養12h后，調整菌液濃度（1×106CFU/mL）。將42日齡健康的白羽肉雞10只成2組，每組5只，第1組肌肉注射分菌株0.5mL（1×106CFU/mL）；第2組肌肉注射等量的生理鹽水。每組實驗雞攻毒12h后，記錄每組實驗雞的的發病及死亡情況，觀察期為7d，并對于死亡的實驗雞進行病原學鑒定。結果顯示，第1組試驗雞攻毒后的24～48h，均出現了發病，死亡率為100%，對死亡的試驗雞剖檢后，從肝臟中分離到葡萄球菌。第2組試驗雛雞無明顯的癥狀，證實了葡萄球菌白羽肉雞具有很強的致病性。

5藥敏試驗

取純化培養的分離菌株接種于營養肉湯中，37℃震蕩箱培養12h后，調整菌液濃度（1×106CFU/mL）。無菌的條件下均勻涂布在普通培養基上，貼上藥敏紙片，置37℃恒溫箱培養12h后，測量抑菌圈直徑，判斷標準按照美國臨床檢驗標準委員會（NCCLS）推薦的標準K-B紙片進行結果判斷。藥敏結果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感；對頭孢他啶、丁胺卡娜、多西環素、氨芐西林、青霉素、阿莫西林、慶大霉素7種藥物耐藥。

小結

本文通過采集無菌病死白羽肉雞的肝臟、心血、關節滲出液等病料組織進行病原菌分離鑒定，分離菌株被鑒定為致病性葡萄球菌。藥敏結果顯示，白羽肉雞源葡萄球菌對恩諾沙星、氧氟沙星、頭孢曲松、氟苯尼考、頭孢克肟、頭孢拉啶、大觀霉素、林可霉素8種藥物高度敏感。當白羽肉雞發生葡萄球菌，應該根據藥敏試驗，選擇敏感藥物進行治療。

參考文獻

[1]喬獻軍. 皮炎型雞葡萄球菌病的診斷[J]. 今日畜牧獸醫，2008，（10）：9-10.

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