家畜口蹄疫的免疫抗體檢測方法

李玉香

DOI：10.3969/j.issn.2096-3637.2017.10.057

摘要：口蹄疫主要是由口蹄疫病毒所引起的，是一種急性的、高度接觸性的傳染病，對畜牧業發展能夠產生嚴重的危害。因此，如何做好免疫抗體檢測，進而有效預防牛羊口蹄疫發生尤為關鍵。近年來，經過不斷地研究與探索，疫苗注射對于牛羊口蹄疫防治具有良好的效果。

關鍵詞：口蹄疫；檢測；方法

中圖分類號：S858 文獻標識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）10-0065-01

近年來，基于牛羊口蹄疫的嚴重危害，我國已經將其列入強制免疫的范圍，因此，能否及時做好免疫抗體的效價檢測不僅僅是關系到能夠做好免疫質量評價的關鍵，同時也是關系到能否為牛羊口蹄疫免疫提供科學依據的關鍵。但是，在實際工作中，由于所采用的抗體檢測方法不同，往往會導致檢測的結果呈現出一定的差異性，因此科學選擇抗體檢測方法尤為重要。正向間接血凝實驗和液相阻斷可以說是2種常用的抗體檢測方法。為此，通過平行對比檢測試驗的方法對2種檢測手段進行分析。

1 材料與方法

1.1 被檢測血清

檢測血清采用隨機抽取的方法，主要來源就是已經成功注射牛羊o型-亞洲I型口蹄疫雙價滅活疫苗的牛血液樣品與羊血液樣品，建議在21d左右的時間進行血樣提取，在完成血清的分離后，將待檢血清置于4℃左右的冰箱保存。

1.2 關于診斷試劑

所選用診斷試劑為同一生產批號的口蹄疫O型正向血凝抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液以及O型口蹄疫液相阻斷ELISA檢測試劑盒。

1.3 關于檢測方法及結果的判定

正向間接血凝試驗一定要嚴格按照說明進行操作，如果抗體的效價高于1：32的話，即可視抗體為合格；同樣，O型口蹄疫液相阻斷也要嚴格按照說明進行操作，在結果的判定方面我們通常是將病毒抗原對照的平均OD值的一半為臨界值，也就是參考值，如果被檢血清的OD值高出臨界值，那么為陰性孔，如果低于臨界值，就為陽性孔，需要注意的是，陽性孔的最高稀釋度就是血清的抗體效價，如果高于1：64的話，我們可以認為抗體合格。

2 結果

通過正向間接血凝檢測，發現抽取的牛羊樣本中，口蹄疫的免疫合格率分別為81.9%和83.67%，也就是說在所抽取的105頭牛和98只羊中，分別有86頭和82只羊的抗體檢測是合格的。

3 結果分析

從檢測的實際結果來看，無論是正向間接血凝檢測，還是液體阻斷檢測，結果是基本相符合的，也就是說對于同一批血清的檢測抗體效價來說，具有顯著的對應關系、任何一種檢測方法敏感性和特異性低相對顯著，試驗結果科學、可靠。

需要注意的是，從檢測的結果來看，正向間接血凝檢測的合格率要稍高于液相阻斷檢測的合格率，這可能與前者在結果的判斷方面需要肉眼判定有一定的關系，結果具有一定的主觀性。 正向間接血凝試驗的優勢在于操作簡單，儀器少，價格低，但是結果的判定具有主觀性，也就是說和實驗員的素養有著一定的關系。換句話說，對于同樣的血清，不同的實驗員進行檢測，所獲取的結果可能存在某種程度的差異。再一個就是這種檢測方法對于所抽取血樣的要求也相對要高；而液相阻斷檢測無論是在靈敏度，還是在特異性等方面，都更有優勢，而且不受實驗人員主觀影響，但是所需要的儀器設備更加煩瑣、專業、對人員的操作水平要求高，試劑的價格也相對較高。

基于牛羊口蹄疫的重大危害，每一次關于重大動物一定防控的檢驗中，不僅僅要投入大量的人力、物力以及財力、但是由于檢測方法、檢測水平以及檢測試劑等相關因素的影響，檢測結果往往存在著一定的差異，也給進一步做好免疫工作帶來了不少困難。為此，筆者建議，一定要立足實際，根據檢驗樣品的實際情況，選用合適的檢測方法。如果是省里或者更高層級的機構，檢驗樣本的數量不大的話，建議用液相阻斷法進行檢驗，如果樣本數量大，又是基層的話，建議選擇正向間接血凝試驗檢測法。

4 結語

從上文的論述中，我們不難看出，人們已經普遍意識到牛羊口蹄疫的巨大危害，并且開始重視做疫苗免疫注射工作，希望能夠有效預防口蹄疫，進而盡量降低因此可能帶來的經濟損失。但是，疫苗注射的實際效果如何，是否真正能夠發揮預期的防治效果，就必須要通過免疫抗體的檢測情況來判定，如果檢測情況達標，那么可以說明是有效的，是可以繼續應用的，對于牛羊口蹄疫是能夠真正起到良好的防治效果的；如果檢測不理想，能夠排除實驗操作失誤等因素影響的話，就要考慮所選擇疫苗是否科學，是否合理，及時做出調整，保證疫病的實際防治效果。

免疫抗體的檢測方法有很多，但沒有一種方法是真正完美的，因此，在實際選擇的時候，要立足當地的實際水平，主要是樣本的數量、儀器設備以及資金、技術水平等相關因素，做出合適的選擇，保證結果的準確性，從而為今后更好做好牛羊口蹄疫免疫工作提供切實、有力的依據和參考。