鉭及多孔鉭表面改性技術在組織工程學及口腔醫學的研究進展*

董偉 劉洪臣

鉭及多孔鉭表面改性技術在組織工程學及口腔醫學的研究進展*

董偉 劉洪臣

鈦及鈦合金具有良好的機械強度和生物相容性，是骨科植入物和牙種植體的首選材料，但其較高的彈性模量對臨床應用產生一定的影響。鉭金屬具有良好的生物相容性，多孔鉭具有低彈性模量、較高的表面摩擦系數、優異的生物學特性等特點，展現了良好的應用前景。本文將對鉭及多孔鉭表面改性技術的研究進展、在組織工程學及口腔醫學中的應用幾方面作一綜述。

鉭；多孔鉭；表面改性；植入體

鉭金屬(Tantalum，Ta)，具有優異的抗腐蝕性能，并具有高熔點、大強度、耐磨損的特點，被廣泛應用于飛機、火箭等耐熱材料以及需要高強度零部件的工業領域[1]。此外，金屬鉭有良好的物理力學特性、較好的生物相容性能，成為了繼鈦金屬之后又一種新型生物材料，被廣泛應用在口腔種植體植入、股骨頭壞死治療、冠狀動脈支架植入、人工髖臼假體植入、外科手術縫合線制作等醫學相關領域[2，3]。近年來，隨著對金屬鉭研究的深入，人們發現多孔鉭具有與人體松質骨近似的蜂窩狀立體結構，具有低彈性模量和高摩擦力特性，故多孔鉭又被稱之為“鉭骨”(Tantalum bone)[4]。本文將從鉭及多孔鉭的結構力學性能、生物學特性、表面改性技術的研究進展、在口腔醫學中的應用幾方面介紹當前國內外研究現狀。

1．多孔鉭的結構力學和生物學特性

多孔鉭的制備工藝較為復雜，主要方法包括：氣相沉積法、有機泡沫浸漬法、粉末燒結法和激光快速成形法等[5]，上述方法所制備出的多孔鉭的孔隙直徑大小為300-600um[6]，與其他具有多孔結構的金屬材料相比具有較高的孔隙率(66．7%-80%)，這一特點可加速組織向孔隙內部長入，提高了多孔鉭內部的營養交換，從而使其具備了較高的組織內向性生長的潛力[7]。此外，多孔鉭具有低彈性模量、較高的表面摩擦系數、優異的力學性能等特點，其彈性模量為1．22GPa，介于松質骨(0．1-0．5GPa)和密質骨(12-18GPa)之間(見表1)[6，8]，在醫療過程中植入人體骨組織內可避免產生“應力遮蔽”效應，有利于生物學應力的正常傳導。較高的表面摩擦系數可增大骨細胞附著表面，有利于細胞的緊密貼合、生長，并具備引導成骨細胞分化成熟及發揮其成骨功能的作用[9，10]。

表1 骨組織及各種金屬彈性模量對比

2．醫用鉭及多孔鉭的表面改性在組織工程學的研究

醫用鉭及多孔鉭由于其具有良好的組織工程學性能和生物相容性，在骨替代物及牙種植等領域具備廣闊的前景。其中，植入體表面微環境至關重要，良好的表面性能增加了植入體與骨組織之間的接觸面積，提高了接觸質量，有利于植入體的早期穩定，特別是在口腔種植領域，即刻種植、即刻修復、即刻負重理念的提出需要種植體具備良好的初期穩定性以進行早期功能負載[11，12]。所以，現階段的熱點集中于研究醫用鉭及多孔鉭的表面改性技術，來加速植入體體內骨愈合以及提供更持久、穩定的骨結合。自從上世紀七十年代以來，研究已開始致力于鉭金屬及多孔鉭的表面改性以期獲得更佳的生物學特性。回顧近十年國內外發表文獻，主要的表面改性技術研究包括：表面陽極氧化法、仿生涂層、表面功能化、堿熱處理活化改性等。

2．1 表面陽極氧化表面陽極氧化技術作用方式為依靠酸性溶液(硫酸、草酸、磷酸、硅酸等)作為電解質[13，14]，在一定的電流電壓下電解氧化從而在其表面形成排列有序的納米管層(nanotube film s)結構的五氧化二鉭(Ta2o5)氧化層表面，改變其表面的生物學特性[15]。目前已有關于鉭及多孔鉭表面進行陽極氧化后的生物學性能研究。W ang Na等[16]的體外實驗研究報道，經過改性處理的金屬鉭表面五氧化二鉭納米管氧化層結構可增強牛血清白蛋白、纖連蛋白的吸附，提高兔骨髓間充質干細胞的粘附和增殖，并促進其相關成骨因子堿性磷酸酶(ALP)、I型膠原蛋白(Collagen I)、骨鈣素(Osteocalcin)的表達，促使其成骨向分化。另有學者在體外實驗發現：經過五氧化二鉭氧化層表面改性的鉭金屬表面可明顯促進人成骨細胞粘附、增殖，提高人成骨細胞堿性磷酸酶的表達、骨結節的產生、骨基質的礦化沉積[17]。

2．2 表面仿生涂層仿生涂層表面處理技術基于異相成核原理，將植入體浸入過飽和磷酸鈣溶液中，磷酸鈣在其表面成核并生成涂層。由于仿生涂層是在水溶液中接近生理條件下制備的，因此其成分和結構與天然硬組織中的礦物質更為接近[18，19]。

Elena等[20]研究發現，經過磷酸鈣仿生涂層處理的金屬鉭板在體外可促進骨髓間充質干細胞的增殖和成骨分化，F． Barrere的研究小組將帶有磷酸鈣仿生涂層的圓柱形多孔鉭植入體植入山羊背部肌肉中，12周后在植入處肌肉內出現異位成骨(ectopic bone)[21]；隨后，該研究小組將帶有磷酸鈣仿生涂層的多孔鉭植入體植入14周齡雌性山羊的股骨骨干處，術后第6、12、24周測得植入體與骨組織的接觸面積均大于無涂層植入體[22]。還有學者在鉭金屬及多孔支架上進行磷酸鈣仿生涂層改性處理，用于體內及體外試驗，與未處理的光滑表面相比，磷酸鈣仿生涂層改性處理表面生物礦化性能大幅提高，同時親水性能也大幅提高，有利于人成骨樣細胞的貼付和伸展，并在兔體內軟骨下骨缺損修復中促進引導性骨再生的形成[18]。

2．3 表面功能化表面功能化技術是指表面通過多種方式與藥物結合，形成自組裝膜，在體內植入后具備持續釋放生物活性物質的功能。

已有研究報道，在多孔鉭的植入體表面應用靜電自組裝的方式將抗癌藥物阿霉素置入由透明質酸聚合電解質、甲基化膠原蛋白和三元共聚物合成形成的共聚膜中，經過一個月的體內實驗觀察發現，阿霉素在體內植入體周圍持續釋放1個月，并可抑制軟骨肉瘤細胞系SW 1353的增殖[23]。另有學者研究運用電拋光技術加硅烷化學法將RGD多肽(cRGDfK)結合至金屬鉭表面形成功能化表面改性，實驗表明該處理表面能提供給細胞良好的生長環境，血管內皮細胞在結合cRGDfK后的鉭表面形成更高的細胞密度、更好的細胞伸展以及細胞間接觸[24]，與未功能化(無RGD多肽結合)表面相比，提高了處理表面Saos-2細胞貼附性能，Saos-2細胞的粘附數量及細胞粘附面積均增大[25]。

K ishore Udipi等[26]研究，在鉭板表面以共價結合的方式將具備抗炎特性的低分子量超氧化物歧化酶模擬物(SODm)結合至鉭板表面，并植入到雌性大鼠背部皮下組織內，組織學檢測急性期(第3天)富嗜中性粒細胞的急性滲出液與對照組比較明顯減少，炎癥慢性期(第28天)，異物多核巨細胞和纖維囊的形成也顯著降低。

2．4 堿/堿熱處理活化改性堿熱處理是指將植入體放入NaOH溶液中浸泡，之后在高溫下熱處理。堿熱處理后的植入體在體內可在表面形成仿生磷灰石，并借此與骨直接結合[27]。單純NaOH處理產生的鈉鹽凝膠不穩定，與金屬基體間的結合較弱，會影響磷灰石與金屬基體間的結合，最終影響種植體與骨之間的結合。熱處理使鈉鹽凝膠脫水成為致密穩定的無定形結構，磷灰石層與金屬基體間的結合較為緊密[28]。

有研究證實，在多孔鉭合金(Ti6Ta4Sn)支架表面進行堿熱處理表面改性后，增強了模擬體液(SBF)的吸附，同時促進了Saos-2細胞的粘附[29]。

另有實驗研究表明，多孔鉭在其表面進行堿處理處理后，其上接種3T3-E1細胞，培養五天后檢測到肌動蛋白纖維和骨樣組織遍布于3T3-E1細胞內，動物實驗表明，新生骨于第4周出現在植入體和宿主骨之間；第4、12周，新生毛細血管和新骨長入多孔鉭的空隙中[30]。

3．醫用鉭及多孔坦在口腔醫學中的應用

鉭金屬已作為種植體材料被應用于缺失牙患者的修復治療中，隨著科技的發展，多孔鉭也被嘗試應用于種植體領域[31]。由于其具備杰出的機械力學性能、生物學性能、具有與骨組織相當的彈性模量、較高摩擦系數，能為種植體提供良好的骨結合和初期穩定性，被稱之為骨小梁種植體，除此之外，其具有的與骨組織相當的彈性模量(介于松質骨和密質骨之間)使得種植體在長期的口內功能負載中將牙合力分散至周圍骨質中，避免了應力集中[32，33]。有實驗表明，在牙合力負載過程中，傳統種植體可以吸收負載能量的30%, 而多孔鉭種植體可吸收50%-75%[34]，而較高的摩擦系數使其在種植體植入過程中具有良好的初期穩定性，從而提高種植牙的結合率，特別是骨質量較差的種植患者。與此同時，劉洪臣教授提出了人工種植牙給藥的理念，通過在多孔鉭人工牙中載藥的方式有望在促進種植體骨結合的基礎上，改善骨代謝疾病狀態下受損的骨愈合能力[35]。

此外，多孔鉭在頜骨缺損修復中作用的相關研究也在開展。多孔鉭的三維結構有孔隙，有利于骨髓間充質干細胞和成骨細胞在其表面附著，孔隙結構與骨組織相似，為骨組織的長入提供了良好的支架。有相關研究報道證實，多孔鉭顆粒具有良好的誘導成骨能力，其修復頜骨缺損效果優于臨床常用的Bio-oss 骨粉，實驗構建頜骨骨缺損模型，將多孔鉭顆粒和Bio-oss 骨粉分別植入比格犬右側和左側下頜骨骨缺損區內，三個月后大體標本、X 線攝片、硬組織切片檢測發現，多孔鉭顆粒組在骨形成量、骨組織成熟度上均高于對照組(Bio-oss 骨粉組)[36]。

4．總結

鉭及多孔鉭因其良好的生物相容性，在醫學的多個領域，如口腔醫學、骨外科學、心血管外科學、生物醫學工程學等具有重要的臨床價值和應用前景，其表面改性技術的應用將使得金屬鉭及多孔鉭具備更加優異的生物學性能，從而大大提高鉭及多孔鉭植入物與周圍骨界面的結合能力，從而更好的提高植入體的臨床療效。

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The research progress of tantalum and porous tantalum surfacem odification technique in tissue engineering and Stomatology

DONGWei,LIU Hong-chen(Instituteofstomatology,Chinese PLAGeneralHospital,Beijing 100853,China)

Titanium and titanium alloys have good mechanical strength and biocompatibility, which is the preferred material for implant but the higher elastic modulus has a certain impact on the clinical application. Nevertheless, tantalum metal has good biocompatibility, and porous tantalum has features of low elastic modulus, higher surface friction coefficient, excellent biological characteristics, and so on, all of w hich show a good app lication prospect. This review paper pays close attention to surface modification research progress of tantalum and porous tantalum and their application in tissue engineering and Stomatology.

tantalum; porous tantalum; surface modification; implant

R 783．1

A

1672-2973(2017)02-0113-04

2016-08-04)

國家自然科學基金(項目編號：81271180)

董偉 解放軍總醫院口腔醫學研究所博士生北京

100853

劉洪臣 通訊作者解放軍總醫院口腔醫學研究所所長

主任醫師教授北京100853