降香黃檀炭疽病藥劑篩選及林間防效

董文統, 劉君昂*, 周國英, 張 茜,2, 何苑皞, 蘇圣淞

(1. 中南林業科技大學,森林有害生物防控湖南省重點實驗室;經濟林培育與保護省部共建教育部重點實驗室, 長沙 410004; 2. 湖南汽車工程職業學院, 株洲 412001)

降香黃檀炭疽病藥劑篩選及林間防效

董文統1, 劉君昂1*, 周國英1, 張 茜1,2, 何苑皞1, 蘇圣淞1

(1. 中南林業科技大學,森林有害生物防控湖南省重點實驗室;經濟林培育與保護省部共建教育部重點實驗室, 長沙 410004; 2. 湖南汽車工程職業學院, 株洲 412001)

為了篩選出防治降香黃檀炭疽病的環境友好型藥劑,本文測定了10種殺菌劑的室內毒力,并從中篩選出毒力較強的藥劑進行林間防效試驗。結果表明:25%丙環唑EC,60%唑醚·代森聯WG和40%氟硅唑EC對降香黃檀炭疽病菌的毒力較強,其EC50分別為0.12,0.15和1.12 mg/L。其他供試藥劑的EC50分別為:75%百菌清WP 231.42 mg/L，10%苯醚甲環唑WG 3.60 mg/L，80%醚菌酯WG 1.58 mg/L，70%甲基硫菌靈WP 4.51 mg/L，3%中生菌素WP 19.36 mg/L，80%代森錳鋅WP 79.76 mg/L，80%多菌靈WP 11.47 mg/L。考慮到氟硅唑、唑醚·代森聯價格較高,建議將這兩種藥劑使用在降香黃檀苗木炭疽病的防治上。人工林炭疽病的防治采用25%丙環唑EC、80%醚菌酯WG、70%甲基硫菌靈WP和3%中生菌素WP,每隔15 d依次施用,林間防治效果達到71.53%,明顯高于其他防治方法。因此,在人工林降香黃檀炭疽病的防治中采用這4種藥劑每隔15 d依次施用可以有效控制降香黃檀炭疽病的暴發。噴霧時間應選擇在陰天或晴天早晨露水干后8:00-10:00或者15:00-17:00。

降香黃檀; 炭疽病; 藥劑篩選; 林間防效

降香黃檀Dalbergiaodorifera,俗稱黃花梨、花梨母,屬于蝶形花科黃檀屬,全球分布約有120種,我國目前已知的有25種。是我國天然分布的兩種珍貴紅木樹種之一,為海南省的特有樹種。

降香黃檀病害主要發生于葉部,由膠孢炭疽菌ColletotrichumgloeosporioidesPenz.引起的炭疽病是其主要葉部病害,發病嚴重時可導致葉片全部脫落[1]。目前,在海南省,無論是苗圃、人工林、還是房前屋后散生的花梨,降香黃檀炭疽病發病率都很高。由于海南省目前降香黃檀市場比較混亂,沒有形成大規模的產業化,主要是一些小的公司、林場、科研所、農戶在進行育苗和栽培,所以沒有統一的、可進行推廣的防治技術,主要靠經驗進行防治。目前,海南省市面防治炭疽病主要采用的藥劑有多菌靈、代森錳鋅、波爾多液等,其防治效果的好壞很大程度上取決于生產經營者的意識。

本研究旨在從市面常見藥劑中篩選防治炭疽病的藥劑,經室內毒力和林間防效試驗找到防治降香黃檀炭疽病的有效方法。

1 材料與方法

1.1 材料

供試植物材料:采自海南省澄邁縣國營澄邁林場降香黃檀人工林葉片。

供試病原菌:從海南省澄邁縣國營澄邁林場采集降香黃檀典型炭疽病病葉,由本實驗室對其致病菌進行分離、鑒定為膠孢炭疽菌ColletotrichumgloeosporioidesDOT-20。

供試培養基:PDA培養基。

供試藥劑:75%乙醇、10%苯醚甲環唑水分散粒劑(山東青島翰生生物科技有限公司)、80%代森錳鋅可濕性粉劑(天津施普樂農藥技術發展有限公司)、80%多菌靈可濕性粉劑(天津施普樂農藥有限公司)、75%百菌清可濕性粉劑(威海韓孚生化藥業有限公司)、70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(青島奧迪斯生物科技有限公司)、25%丙環唑乳油(山東億嘉農化集團)、80%醚菌酯水分散粒劑(陜西湯普森生物科技有限公司)、40%氟硅唑乳油(美國志信公司廣州代表處)、60%唑醚·代森聯水分散粒劑(德國巴斯夫有限公司)、3%中生菌素可濕性粉劑(福建凱立生物制品有限公司)。

儀器設備:小型噴霧機、尼康照相機。

1.2 方法

1.2.1 室內毒力測定

1.2.1.1 供試藥劑的抑菌作用

以DOT-20為供試菌株,采用菌絲生長速率法[2]測定10種供試藥劑(表1)的抑菌作用。首先將供試的10種藥劑按所需濃度配制成100 mL的母液,再按梯度稀釋法,用無菌水稀釋成系列濃度梯度。每種藥劑設置5個不同的濃度梯度,以無菌水作為對照。

用無菌移液槍吸取1 mL的不同濃度藥液加入到49 mL PDA培養基中,以1 mL蒸餾水代替供試藥劑作為對照。每種藥劑的1個濃度為1個處理,每處理倒3個平板。在已培養5 d的DOT-20菌落邊緣打取6 mm的菌絲塊,分別接種到含藥平板的中央。于28℃的普通光照培養箱中進行培養,5 d后采用十字交叉法[3]測量菌落直徑。計算不同濃度藥劑對菌絲生長的相對抑菌率(%)、毒力回歸方程、相關系數(r)和EC50,然后進行比較[4]。

表1 10種供試藥劑的濃度梯度

1.2.1.2 數據分析

采用SPSS進行方差分析,用LSD法比較各藥劑結果的差異顯著性(α=0.05)[5]。計算不同濃度下藥劑的抑菌率,將抑菌率轉換為幾率值y,以藥劑濃度的對數值為橫坐標x,用SPSS軟件求得毒力回歸方程,EC50及相關系數。

1.2.2 林間防效測定

目前,海南省市面上防治炭疽病的藥劑包括多菌靈、波爾多液、代森錳鋅等,但防治效果不太理想,不能有效遏制炭疽病的發生。所以進行林間防效試驗,進行藥劑篩選及防治方法的研究是有必要的。

1.2.2.1 試驗地點

澄邁林場(19°11′N,111°1′E)位于海南省澄邁縣內。試驗地位于澄邁林場場部所在地古嶺工區,距離澄邁縣城8 km左右,毗鄰加潭水庫,水源充足。林場的地形為低丘陵、臺地。境內的大小嶺共138個。屬于熱帶季風氣候,年降水量1 707 mm,年均溫23.6℃。海拔高度40～120 m。極端高溫38.9℃,極端低溫為2.8℃[6]。土壤種類有鐵質磚紅壤、砂壤土和磚紅壤。試驗地為林場內10 hm2降香黃檀人工林,砂壤土,林下植被包括含羞草MimosapudicaL.、闊葉豐花草BorrerialatifoliaAubl.、假馬鞭草Stachytarphetajamaicensis(L.) Vahl.、飛機草EupatoriumodoratumL.、地毯草Axonopuscompressus(Sw.) Beauv. 等。

1.2.2.2 試驗設計

根據室內毒力測定結果,從10種藥劑中篩選出4種藥劑進行林間防治試驗。試驗于2013年6月-10月在澄邁林場降香黃檀示范林進行。2014年及2015年6月-10月進行驗證試驗。試驗共施藥4次,每次施藥間隔15 d,依次為第1天、第16天、第31天和第46天。施藥時,用在太陽底下曝曬2 d的自來水將藥劑配制成所需濃度。選擇陰天或晴天早晨露水干了以后(8:00-10:00)或者下午溫度稍微低點的時候(15:00-17:00)用噴霧機噴霧,使藥劑在葉片上形成均勻的霧滴[8]。如遇大雨天氣則推遲1～2 d用藥。

施藥方式包括單一藥劑連續施用和不同藥劑輪換施用。單一藥劑連續施用方式是指同種藥劑每15 d用藥1次,連續施用4次；不同藥劑輪換施用方式是指每15 d施藥1次,連續施用4次,每次使用4種藥劑中的1種。以噴施清水為對照,共計29種施藥方式[7]。每種施藥方式處理5排樹(50株),重復3次。每次施藥前1 d調查植株發病率及病情指數。單一藥劑連續施藥方式于第1次藥后5、10、15 d各調查1次,以后每次藥后14 d調查1次,評價4種藥劑的防治效果及藥效持續時間；不同藥劑輪換施藥方式于每次施藥后14 d調查,評價不同輪換組合的防治效果。調查時以當年新生葉片為標準,毎株樹分東南西北4個方向調查,每個方向用紅繩固定一根枝條,調查該枝條上50～60片葉[9],分別記載總葉片數和發病葉片數,計算發病率、病情指數和防治效果[10]。

病情指數=

防治效果(%)=

2 結果與分析

2.1 室內毒力測定

采用SPSS分析10種藥劑對DOT-20菌絲生長的抑制作用,結果表明,不同藥劑濃度處理間抑菌率對應的幾率值存在極顯著差異(P<0.001),說明分析結果具有生物統計學意義。10種殺菌劑對炭疽病菌的抑制效果差別很大(表2),各藥劑對炭疽病菌的EC50從大到小依次為百菌清>代森錳鋅>中生菌素>多菌靈>甲基硫菌靈>苯醚甲環唑>醚菌酯>氟硅唑>唑醚·代森聯>丙環唑。抑菌效果較好的殺菌劑為氟硅唑、唑醚·代森聯和丙環唑。效果最差的為百菌清和代森錳鋅。考慮到氟硅唑和唑醚·代森聯價格昂貴,建議在降香黃檀苗木炭疽病的防治中選用。苯醚甲環唑和丙環唑同屬于環唑類藥劑,甲基硫菌靈和多菌靈也屬于同一大類藥劑,兩者擇優進行下一輪連續單一和輪換用藥兩種方式研究。因此選擇80%醚菌酯WG、70%甲基硫菌靈WP、3%中生菌素WP、25%丙環唑EC進行林間防效試驗。

2.2 林間防效測定

根據室內毒力測定選出的4種藥劑在林間對降香黃檀炭疽病均有一定的防效(表3)。第1次施藥后5 d,25%丙環唑EC 2 200倍液和80%醚菌酯WG 5 000倍液的防治效果最好,分別達到70.92%和64.70%；70%甲基硫菌靈WP 1 500倍液效果次之,防效為56.52%；效果最差的為3%中生菌素WP 900倍液,防效為51.07%。第1次施藥后10 d,各藥劑的防治效果都有所降低,此時,25%丙環唑EC 2 200倍液和80%醚菌酯WG 5 000倍液的防治效果依然最好,分別達到67.64%和57.57%。第1次施藥后15 d,4種藥劑的防治效果依次為20%丙環唑EC>80%醚菌酯WG>70%甲基硫菌靈WP>3%中生菌素WP,各藥劑的防效大幅度降低,均低于50%,而降香黃檀炭疽病的發病率都達到70%。為了防止病害再次大面積發生,需要重新施藥。

表2 10種藥劑的室內毒力回歸方程

表3 2013年4種藥劑對降香黃檀炭疽病的防治效果

第2次施藥后14 d,不論是單一藥劑連續施用還是不同藥劑輪換施藥方式其防治效果都有所提升,其中以25%丙環唑EC+80%醚菌酯WG+70%甲基硫菌靈WP+3%中生菌素WP (B+M+J+Z)組合輪換用藥的防治效果最好,為54.31%,高于其他所有的施藥方式,而連續兩次施用25%丙環唑EC的防治效果為49.98%,80%醚菌酯WG的防效為47.00%,70%甲基硫菌靈WP的防效為41.46%,防效最差的為連續兩次施用3%中生菌素WP,其防治效果僅為29.78%(表4)。

第3次施藥后14 d,除了連續施用3%中生菌素WP的防效有所降低外,其他連續施用同種藥劑的防治效果都有所提升,但提升幅度明顯低于第2次藥后防治效果提升的幅度。第3次施藥后防治效果最好的依然為B+M+J+Z組合輪換施藥方式,防效達64.68%。而單一藥劑連續施藥方式中,25%丙環唑EC的防治效果為50.67%,80%醚菌酯WG的防治效果為48.03%,70%甲基硫菌靈WP的防治效果為42.49%,3%中生菌素WP的防治效果僅為28.65%,比第2次藥后的防效還低(表4),說明此時病原菌已經開始對同一類藥劑產生了抗藥性。

第4次施藥后14 d,單一藥劑連續施用方式的防治效果均急劇下降,低于第1次藥后的防治效果,其中25%丙環唑EC的防治效果為36.36%,80%醚菌酯WG的防治效果為33.31%,70%甲基硫菌靈WP的防治效果為31.22%,3%中生菌素WP的防治效果為22.70%。但以B+M+J+Z組合輪換用藥的防治效果達到71.53%(表4),高于25%丙環唑EC第1次用藥后5 d的防治效果(70.92%)。

由表4可知,不同藥劑輪換用藥方式下降香黃檀炭疽病的發病率明顯要低于單一藥劑連續施用方式下的發病率。連續4次施用25%丙環唑EC,藥后14 d降香黃檀炭疽病的發病率依次為72.56%、61.22%、60.34%、73.15%；施用80%醚菌酯WG,藥后14 d植株的發病率依次為76.47%、64.25%、63.05%、78.24%。施用70%甲基硫菌靈WP,藥后14 d植株的發病率依次為77.63%、65.56%、65.12%、80.54%。施用3%中生菌素WP,藥后14 d降香黃檀炭疽病的發病率依次為80.16%、68.27%、69.13%、83.27%。可以看出隨著用藥次數增多,第4次施藥后植株的發病率明顯升高,說明病原菌的抗藥性增強,藥劑已經不能很好地控制降香黃檀炭疽病了。而采用以B+M+J+Z組合進行輪換用藥,藥后14 d的發病率依次為73.15%、50.25%、44.12%、33.14%。其防治效果明顯優于單一藥劑連續施藥方式和其他輪換施藥組合,為防治降香黃檀炭疽病的最優組合。

3 結論與討論

10種殺菌劑對降香黃檀炭疽病菌的室內毒力測定結果表明,不同殺菌劑對炭疽病菌毒力大小順序分別為:丙環唑>唑醚·代森聯>氟硅唑>醚菌酯>苯醚甲環唑>甲基硫菌靈>多菌靈>中生菌素>代森錳鋅>百菌清。其中唑醚·代森聯和氟硅唑價格昂貴,建議用于降香黃檀苗木炭疽病的防治。苯醚甲環唑和丙環唑同屬于唑類藥劑,甲基硫菌靈在植物體內轉化成多菌靈,屬于同一類型的殺菌劑。所以選擇醚菌酯、甲基硫菌靈、丙環唑、中生菌素4種類型的殺菌劑用于降香黃檀人工林炭疽病的防治。29種施藥方式對降香黃檀炭疽病的防治效果表現為依次施用丙環唑、醚菌酯、甲基硫菌靈、中生菌素(B+M+J+Z)(71.53%)>單一施用丙環唑(36.36%)>單一施用醚菌酯(33.31%)>單一施用甲基硫菌靈(31.22%)>單一施用中生菌素(22.70%)。單一藥劑連續施用方式在第3次用藥后其防治效果基本都開始降低,第4次用藥后發病率都比第1次施藥后還要高,這主要是由于這些藥劑作用位點單一,并具有高度的選擇專化性,在連續高劑量藥劑的施用下,會使抗藥性問題日益嚴重。而每隔15 d依次施用25%丙環唑EC、80%醚菌酯WG、70%甲基硫菌靈WP、3%中生菌素WP,防治效果依次為44.48%、54.31%、64.68%、71.53%,防治效果明顯高于其他的方式,能有效防治降香黃檀炭疽病。

丙環唑為唑類殺菌劑,醚菌酯屬于甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,甲基硫菌靈屬于硫代氨基甲酸酯類殺菌劑,中生菌素屬于抗生素類殺菌劑,4種藥劑能以不同的作用方式來抑制炭疽病菌的生長和繁殖,目前針對降香黃檀炭疽病的藥劑篩選研究較少,這些藥劑應用范圍也很窄,該研究將這4種殺菌劑依次輪換使用取得了較好的防治效果,應加以推廣。此外,還可以考慮用同類型的其他殺菌劑來替換,如可用三唑酮、三唑醇等替換丙環唑,多菌靈等替換甲基硫菌靈,嘧菌酯、嘧菌胺等替換醚菌酯。另外,考慮到藥劑復配的增效性,也可開展室內復配毒力試驗,以找到更好的防治藥劑及方法。

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(責任編輯：楊明麗)

The screening and field efficacy of effective fungicides againstanthracnose ofDalbergiaodorifera

Dong Wentong1, Liu Jun’ang1, Zhou Guoying1, Zhang Qian1,2, He Yuanhao1, Su Shengsong1

(1.Hunan Provincial Key Laboratory for Control of Forest Diseases and Pests;Key Laboratory of Cultivation andProtection for Non-wood Forest Trees of Ministry of Education, Central South University of Forestry and Technology,Changsha 410004, China; 2. Hunan Automotive Engineering Vocational College, Zhuzhou 412001, China)

In order to screen pesticides against anthracnose ofDalbergiaodorifera, the indoor toxicity and the field control efficacy of ten fungicides were investigated. 25% propiconazole EC, 60% pyraclostrobin·metiram WG and 40% flusilazole EC showed the strong virulence against anthracnose ofD.odoriferawith EC50values of 0.12, 0.15 and 1.12 mg/L, respectively. The EC50of 25% chlorothalonil EC was 231.42 mg/L, 10% difenoconazole WG was 3.60 mg/L, 80% kresoxim-methyl WG was 1.58 mg/L, 70% thiophanate-methyl WP was 4.51 mg/L, 3% zhongshengmycin WP was 19.36 mg/L, 80% mancozeb WP was 79.76 mg/L, 80% carbendazim WP was 11.47 mg/L. Of all the tested pesticides, 40% flusilazole EC and 60% pyraclostrobin·metiram were recommended to control seedling anthracnose ofD.odoriferabecause of their higher price. The 25% propiconazole EC, 80% kresoxim-methyl WG, 70% thiophanate-methyl and 3% zhongshengmycin WP were recommended for prevention and control of anthracnose on plantation ofD.odorifera. When these four pesticides were applied in turn every 15 days,the control effect reached 71.53%, which was significantly higher than that of other control methods. It should be sprayed between 8:00-10:00 am on cloudy or sunny day, or between 15:00-17:00.

Dalbergiaodorifera; anthracnose; pesticide screening; field efficacy

2016-06-23

2016-08-15

國家林業公益性行業科研專項(201304402)

S 763.7

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2017.03.039

* 通信作者 E-mail：kjc9620@163.com