4例急性單核細胞白血病導致ABO血型系統抗原減弱的臨床分析

張爽，郝一文

（中國醫科大學附屬第一醫院輸血科，沈陽110001）

4例急性單核細胞白血病導致ABO血型系統抗原減弱的臨床分析

張爽，郝一文

（中國醫科大學附屬第一醫院輸血科，沈陽110001）

Analysis of Four Cases of Acute Monocytic Leukemia with ABO Blood Type Antigen Weakness and Deficiency

回顧總結4例急性單核細胞白血病患者紅細胞ABO血型抗原減弱或缺失的實驗室檢測及臨床輸血情況，為輸血前避免弱血型抗原的漏檢及錯誤定型提供檢測方法建議。結果同時提示，ABO血型抗原的暫時性減弱與疾病進展期有關。

急性單核細胞白血病；ABO血型系統；抗原減弱；抗原缺失

ABO血型基因位于人類9號染色體，ABO血型系統抗原表達由A基因、B基因、O基因3個等位基因控制［1］。正常情況下人類ABO血型抗原表達穩定，但在某些惡性血液病及腫瘤等病理情況下，A或B血型抗原可能部分缺失或表達減弱，隨著疾病的緩解，抗原表達可以恢復正常［2］。本文對在我院就診的4例急性單核細胞性白血病（acute myeloid leukemia M5，AML-M5）患者ABO血型抗原減弱或缺失的情況進行了回顧性分析。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

2013年12月至2016年10月間我院急診和住院診斷為白血病的患者11 147例，輸血前血型鑒定中發現AML-M5患者（74例）中發生ABO血型系統抗原減弱3例、缺失1例。

患者1，男，46歲，乏力氣短1個月，于2015年12月4日入院。體檢：貧血貌，周身皮膚黏膜無出血點及瘀斑，淺表淋巴結未觸及。外周血：血紅蛋白57 g/L，紅細胞1.79×1012/L，白細胞185.78×109/L，血小板4×109/L，骨髓檢查后確診為AML-M5。患者在我院檢驗科初檢血型為O型，輸血科復檢血型為A型，存在A抗原減弱的情況，輸注A型濾白懸浮紅細胞5.5 U，輸注A型濾白單采血小板6治療量，無輸血不良反應。

患者2，男，55歲，面色發紅2個月余，加重1個月，于2016年9月18日入院。體檢：無貧血貌，周身皮膚黏膜無出血點及瘀斑，淺表淋巴結未觸及。外周血：血紅蛋白177 g/L，紅細胞7.04×1012/L，白細胞0.74×109/L，血小板5×109/L，骨髓檢查后確診為AMLM5伴真性紅細胞增多。患者在我院檢驗科初檢血型為O型，輸血科復檢血型為A型，存在A抗原減弱的情況，輸注A型濾白單采血小板3治療量，無輸血不良反應。

患者3，女，48歲，腹痛伴發熱10 d，于2013年12月9日入院。體檢：貧血貌，全身皮膚黏膜無出血點及瘀斑，眼瞼結膜蒼白，淺表淋巴結未觸及，肝脾肋下未觸及。外周血：血紅蛋白48 g/L，紅細胞1.37×1012/L，白細胞82.06×109/L，血小板122×109/L，骨髓檢查后確診為AML-M5。患者在我院檢驗科初檢血型為O型，輸血科復檢血型為B型，存在B抗原減弱的情況，輸注B型濾白懸浮紅細胞6 U，輸注B型濾白單采血小板1治療量，無輸血不良反應。

患者4，女，60歲，診斷骨髓增生異常綜合征10余年，復治，于2016年3月22日入院。體檢：貧血貌，全身皮膚黏膜無出血點及瘀斑，眼瞼結膜蒼白，淺表淋巴結未觸及，肝脾肋下未觸及。外周血：血紅蛋白126 g/L，紅細胞4.09×1012/L，白細胞11.58× 109/L，血小板333×109/L。本次入院骨髓檢查確診為AML-M5。既往血型為B型，本次入院復檢血型正定型為O型，反定型為B型，吸收放散試驗證實患者紅細胞上有B抗原，直接抗人球蛋白試驗陰性，最后血型鑒定為B型，輸注B型濾白懸浮紅細胞2 U，輸注B型濾白單采血小板4治療量，無輸血不良反應。

1.2 血型血清學檢查

1.2.1 試劑：試管法ABO血型正定型試驗所用單克隆抗A、抗B試劑為北京金豪制藥股份有限公司產品；試管法ABO血型反定型試驗所用ABO試劑紅細胞為上海血液生物醫藥有限責任公司產品；直接抗人球蛋白試驗所用抗IgG+C3d、抗IgG、抗C3d為上海血液生物醫藥有限責任公司產品；不規則抗體篩檢試驗所用抗體篩選紅細胞為上海血液生物醫藥有限責任公司產品；微柱凝膠法ABO血型鑒定試驗所用DG Gel ABO-CDE卡及不規則抗體篩檢試驗所用DG Gel Coombs卡均為西班牙Grifols公司產品；吸收放散試驗所用二磷酸氯喹放散液為長春博德生物制品有限公司產品。

1.2.2 方法：ABO血型鑒定、不規則抗體篩查、直接抗人球蛋白試驗、吸收放散試驗均按標準操作規程和試劑說明書進行操作。

2 結果

2.1 ABO/RhD血型鑒定

2.1.1 微柱凝膠法檢測：患者1及患者3紅細胞ABO血型正定型與抗A標準血清出現微弱凝集，患者2及患者4正定型未與抗血清出現凝集。試驗結果出現了ABO血型正反定型不相符的情況。見表1。

2.1.2 鹽水介質試管法檢測：利用試管鹽水介質，增加抗AB、抗H、A2細胞以鑒別弱抗原及亞型，結果顯示，4例患者的紅細胞與抗AB、A2細胞都沒有出現凝集反應，與抗H沒有出現強凝集。結合患者的臨床診斷及試驗結果，排除了患者是ABO血型亞型的情況。見表2。

表1 微柱凝膠法ABO血型鑒定結果

表2 室溫試管法ABO血型鑒定結果

2.1.3 增加抗原量的試管鹽水介質4℃孵育法檢測：正定型各試管中患者3%～5%紅細胞懸液與標準抗血清的比例由常規的1∶2增加至1∶1，正、反定型實驗管4℃孵育15 min，結果顯示，增加紅細胞數量及低溫孵育，4例患者與抗A或抗B出現弱凝集。4℃是ABO血型鑒定抗原抗體反應的最適反應溫度，因此采用本方法檢測4例患者ABO血型正定型試驗與鹽水介質試管法檢測方法相比較，出現了凝集強度增強。見表3。

2.2 吸收放散試驗

結果顯示，患者1和患者2既能吸收抗A也能放散抗A，證實患者紅細胞上有A抗原；患者3和患者4既能吸收抗B也能放散抗B，證實患者紅細胞上有B抗原。

表3 試管4℃孵育法ABO血型鑒定結果

2.3 不規則抗體篩檢試驗

4例患者試驗結果均為陰性，證實患者血清未篩檢出不規則抗體。

2.4 直接抗人球蛋白試驗

4例患者多特異性（IgG及C3d）及單特異性（IgG或C3d）直抗試驗結果均為陰性，證實患者紅細胞未被不完全抗體致敏。

2.5 患者恢復期微柱凝膠法血型鑒定

患者3未進行恢復期微柱凝膠法血型鑒定。其余3例患者在恢復期，其紅細胞與相應抗血清出現3+～4+正常強度的凝集，3例恢復期進行回訪患者的紅細胞表面ABO血型系統抗原表達增強。見表4。

表4 患者恢復期微柱凝膠法血型鑒定結果

3 討論

目前急性單核細胞白血病致血型抗原減弱或缺失的確切機制尚未明確，主要可分為抗原生成抑制、病毒致癌基因干擾、糖基轉移酶紊亂3種學說［3］。抗原生成抑制學說認為：白血病患者尤其是急性期時，白細胞呈現病理性增生，而紅細胞生成減少、成熟度降低、形態異常，使紅細胞血型抗原的生成受到抑制。病毒致癌基因干擾學說認為：c-abl基因與ABO血型基因都位于9號染色體上的q34位點。c-abl基因可以干擾ABO血型基因位點，使紅細胞表面血型抗原的表達減弱［4］。而糖基轉移酶紊亂學說認為：急性白血病會引起糖基轉移酶（H-轉移酶）缺乏或合成受抑制，使血型物質產生過程發生障礙［5］。本文4例患者在急性單核細胞白血病急性期都出現了血型抗原減弱或缺失的情況，根據隨訪結果，3例患者在疾病緩解期血型抗原的表達逐漸恢復，1例未進行血型復檢。不論是哪種機制造成的血型抗原減弱或消失，這種改變是暫時的，并非血型遺傳學上的改變。當通過治療疾病狀態得到緩解，減弱或消失的血型抗原會逐漸恢復正常，而當疾病再次加重時，患者又可能出現血型抗原減弱或缺失的現象。

急性單核細胞白血病患者輸血前ABO血型鑒定正反型不符時，應首先考慮是否有疾病本身所致ABO血型中的A/B抗原減弱。由于ABO血型抗原是通過與IgM血型抗體的凝集實驗來檢出，所以4℃低溫孵育有助于增強凝集反應，有助于弱抗原的檢出。另外，適當增加弱抗原的量，如本文中將攜帶弱抗原的紅細胞懸液與抗血清的比例由原來的1∶2增加至1∶1，并于4℃進行孵育會使凝集反應進一步增強。但要注意的是，低溫孵育需要增加O細胞或自身細胞對照，因為人體血清中可能會存在天然冷抗體，低溫下會與各種ABO血型紅細胞發生凝集反應而導致實驗管出現假陽性。因此，低溫檢測弱抗原，檢測管需強于對照管至少1個等級的凝集強度才認為是凝集陽性。對于包括弱抗原在內的一些疑難血型的鑒定，必要時還可以采用吸收放散試驗、唾液型物質檢測、意外抗體的檢測、分子生物學檢測等試驗方法來進行血型的確認［6］。另外，在血型血清學實驗中，由于血型抗原減弱與ABO亞型的反應結果有時類似，很難區分，所以需要注意反定型中是否有亞型的意外抗體出現、與同型紅細胞比較，患者紅細胞是否與抗H、抗AB等有增強的凝集反應。必要時進行家族遺傳學調查、ABO血型基因檢測等加以鑒別及確認。本文4例患者反定型中均未發現意外抗體，與抗H、抗AB也未見較同型紅細胞增強的凝集反應，考慮患者是白血病急性期，排除ABO亞型。

本文4例患者在疾病進展的急性期ABO血型抗原減弱，通過治療后，在恢復期其減弱的抗原強度又恢復至正常。此外，國內已有文獻［7-8］報道，在治療過程中追蹤觀察，減弱的ABO血型抗原逐漸增強。由此可見，ABO血型抗原強度也可以作為疾病進展情況的一個參考依據。此外，臨床資料的調查也很必要，根據不同疾病的特點、急性期、緩解期以及臨床治療來調整實驗的反應條件，有利于更快、更加準確地進行分析及確認血型。在緊急情況下，如果ABO血型鑒定困難，可以選擇輸注O型洗滌紅細胞，但當血型確定后，應選擇ABO同型血液制品進行輸注［9］。

［1］陳江，逯心敏，郭渝，等.羊水ABH血型物質測定與ABO血型基因分型［J］.重慶醫學，2014，43（11）：1302-1303.DOI：10.3969/j. issn.1671-8348.2014.11.008.

［2］侯瑞琴，楊洪燕，苗天紅，等.422例ABO正反定型不符的原因分析及處理對策［J］.中國輸血雜志，2016，29（5）：509-511.DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2016.05.020.

［3］王金慧，陳麟鳳.急性髓系白血病致A抗原減弱1例［J］.標記免疫分析與臨床，2015，22（11）：1191-1192.DOI：10.11748/bjmy. issn.1006-1703.2015.11.033.

［4］葉星晨，張帆，顧玉微，等.ABO血型基因分型在白血病患兒疑難血型鑒定中的應用［J］.檢驗醫學，2015，30（10）：993-997.DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.10.007.

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［7］李志強，陳衛賓，徐文皓，等.急性白血病分型與紅細胞ABO血型抗原強度相關性分析［J］.臨床薈萃，1999，14（19）：893-894. DOI：10.3969/j.issn.1004-583X.1999.19.032.

［8］閆石，孫福軍，王薇，等.白血病患者抗原減弱1例［J］.中國輸血雜志，2001，14（1）：34.DOI：10.3969/j.issn.1004-549X.2001.01. 023.

［9］李志強.重視部分惡性血液病血型血清學檢查異常特征［J］.中國輸血雜志，2008，21（12）：912-913.DOI：10.13303/j.cjbt.issn. 1004-549x.2008.12.040.

（編輯 陳姜）

R457.1

A

0258-4646（2017）06-0569-03

10.12007/j.issn.0258-4646.2017.06.021

張爽（1988-），女，技師，本科.

郝一文，E-mail：hyw82666@163.com

2016-12-20

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