骨碎補的研究概況

馬洪娜++魏升華++檀龍顏

【摘 要】 骨碎補為臨床常用中藥，具有療傷止痛，補腎強骨等功效。骨碎補資源分布是影響其開發利用的關鍵因素。生藥學特性是藥材的質量評價及其與混偽品的鑒別的依據。骨碎補炮制工藝的優化能夠提高飲片的質量。提取工藝的優化能為藥材有效成分的工業化生產提供可靠的技術支持。此外，藥物代謝動力學和代謝組學的研究能為藥材的臨床應用提供良好的參考依據。文章從骨碎補在資源調查、生藥學鑒定、炮制工藝、提取工藝、藥物代謝動力學和代謝組學等方面的研究進展情況進行概述。

【關鍵詞】 骨碎補；資源；質量；臨床應用；研究概況

【中圖分類號】R282 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2017）09-0059-08

Research Progress of Rhizoma Drynariae

MA Hongna WEI Shenghua TAN Longyan*

School of Pharmaceutical Sciences， Guiyang University of Chinese Medicine， Guiyang 550025，China

Abstract：Rhizoma drynariae， a commonly used traditional Chinese medicine in clinic， which can promote the healing fracture and relieve pain， replenish the kidney and strengthen the bones. The distribution of resources is the key factor that influences its development and utilization. And the characteristics of pharmacognosy are gist for the quality evaluation of medicinal materials and that for the identification with mixed falsify. Moreover， the optimization of Rhizoma drynariae processing process can improve the quality of slices. Also， the optimization of extraction process could provide reliable technical support for the industrialization of medicinal active ingredients. In addition， pharmacokinetic and metabonomics studies can provide a good reference for the clinical application of medicinal materials. This article summarizes the latest research progress of the rhizoma drynariae in resource investigation， pharmacognosy identification， processing technology， extraction technology， pharmacokinetic and metabonomics.

Keywords：Rhizoma Drynariae；Resource；Quality；Clinical Application；Research Progress

骨碎補為蕨類植物槲蕨Drynaria fortunei （Kunze） J. sm.（槲蕨科Drynariaceae槲蕨屬Drynaria植物）的干燥根莖[1]。其味苦溫，歸肝、腎經，具有療傷止痛，補腎強骨，消風祛斑的功效[1]。臨床用于跌撲閃挫、筋骨折傷、腎虛腰痛、筋骨痿軟、耳鳴耳聾、牙齒松動等癥，外治斑禿和白癜風[1]。近年來，由于骨碎補良好的藥用價值，在資源調查、生藥學鑒定、炮制工藝、提取工藝、藥代動力學和代謝組學等方面的研究取得了明顯的成效。筆者在系統查閱和整理相關文獻資料的基礎上，對骨碎補涉及以上領域的最新研究結果進行系統的總結，并對該領域存在的問題和前景進行探討，旨在為骨碎補資源的保護、合理開發和可持續利用提供參考。

1 資源調查

骨碎補原植物喜溫暖濕潤氣候，多附生于樹干或林中巖石上。雖然分布較廣，但生長環境特殊，且生長緩慢。黃寶優等[2]采用走訪和實地調查相結合的方法，對廣西骨碎補種質資源分布和生物生態學特性進行了調查研究。發現槲蕨在人為破壞較少的環境下，植株較大，根莖較粗；反之則反，且帶孢子的成齡植株也較難采到[2]。近年來，廣西骨碎補生境遭到一定程度的破壞，而破壞的生境較難恢復[2]。鄒珊珊等[3]查閱了大量文獻資料，整理了1400份以上槲蕨及其混淆品標本資料，并到野外實地調查，分析了槲蕨的本草考證、生態環境以及在中國的野生資源分布。結果表明，盡管歷代本草對于骨碎補均有記載，但并非為同一種[3]。通過中藥材產地適宜性分析地理信息系統（TCMGIS）系統數據庫分析顯示，槲蕨在中國主要分布于長江流域以南的亞熱帶季風地區中低海拔的山區[3]。根據文獻和標本的結果顯示野生槲蕨主要分布于安徽、福建、廣東、廣西、貴州、湖北、湖南、江西、四川、重慶、云南、浙江等省[3] ，詳見表1。由于對野生資源的盲目采挖，造成野生資源破壞嚴重，所以亟待建立相應的保護措施。

鄒珊珊等[3]到大中型中藥材市場實地調查走訪多家鋪面、零售攤位及藥材加工站點，分析了骨碎補的商品產地來源、混淆品種類、產量、銷售等情。調查結果顯示，骨碎補藥材主要來源于安徽、廣西、貴州、湖北、湖南、四川、重慶、云南和甘肅，詳見表1。混偽品情況調查表明，文獻記載混偽品包括槲蕨屬8種（中華槲蕨D.sinaca Diels、團葉槲蕨D.bonii Christ、川滇槲蕨D.delavyi Christ、櫟葉槲蕨D.quercifolia （L.） J.Sm、石蓮姜槲蕨D.propinqua （Wall. ex Mett.） J. Sm. ex Bedd.、小槲蕨D.parishii （Bedd.） Bedd.、毛槲蕨D.mollis Bedd.、硬葉槲蕨D.rigidula （Sw.） Bedd.）、骨碎補科4種（圓蓋陰石蕨Humata tyermannii T. Moore、大葉骨碎補Davallia formosana Hayata、海州骨碎補H. tyermannii T. Moore、鱗軸小葉膜蓋蕨Araiostegia perdurans（H.Christ） Copel）、水龍骨科3種（崖姜蕨Phymatosorus cuspidatus （D. Don） Pic. Serm.、光亮瘤蕨Phymatosorus cuspidatus （D. Don） Pic. Serm.、光亮密網蕨Phymatodes lucida （Roxb.） Ching），而市場走訪調查發現市售混淆品主要有中華槲蕨、石蓮姜槲蕨、團葉槲蕨、大葉骨碎補、川滇槲蕨、光葉槲蕨（D.propinqua（Wall. ex Mett.） Bedd.）等6種，詳見表1。產量情況調查表明，廣西、貴州、云南和湖北4省的產量占據安國、亳州中藥材市場上骨碎補貨源約90%，但數據包含混偽品的產量，詳見表1。從銷售情況來看，多數商家認為產于湖北、貴州的為正品，故價格較高[3]。因此，盡管歷代本草記載種不同，但應按中國藥典規定使用槲蕨。市場銷售的骨碎補藥材的混偽品較多，應加強區分和市場監管以保證群眾利益。從市場供求關系分析表明開展人工育苗和栽培技術研究、建立種植基地方能保障市場供應[3]。

2 生藥學研究

張炎兵等[4]對骨碎補原植物的植株高度、葉型以及營養葉、能育葉和孢子囊群的形態特征做了詳細描述，從分類學角度為鑒定其原植物提供了明確的依據。在骨碎補藥材性狀方面，從形狀、長、寬、高、表面顏色及附屬物、藥材質地和氣味等特征方面做了詳細的觀察和研究。對根莖橫切面的鱗片、表皮、維管束和薄壁組織等的結構特性進行了顯微觀察[4]。利用薄層色譜法對骨碎補粉末特征檢驗發現，骨碎補供試品色譜中，在與柚皮苷對照品色譜相應的位置上，顯示出相同顏色的熒光斑點[4]。此外，Sun等[5]利用分子生物學手段對骨碎補葉綠體全基因組進行了測序，為骨碎補的分子生藥學研究奠定了基礎。以上研究結果從植物基源、藥材性狀、粉末特征和薄層色譜鑒別等幾個方面為骨碎補藥材的鑒定提供了基本的分析依據。

高厚明等[6]測定了10批不同產地骨碎補中柚皮苷、新北美圣草苷和E-4-O-β-D 葡萄糖酰咖啡酸等3種成分含量，建立了骨碎補藥材的高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜，標定8個共有峰，其中5個共有峰的化學成分尚待確定（圖 1）。同時，白俊鵬等[7]也利用HPLC方法測定了16批不同產地骨碎補中E-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基香豆酸、咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，5，7，3，5-四羥基二氫黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和柚皮苷等4種成分的含量，建立了相應的指紋圖譜，標定了12個共有峰，確定了6個峰，詳見圖2。骨碎補HPLC指紋圖譜方法特征性及專屬性強，可從定性和定量兩方面分析和評價骨碎補藥材的內在質量，優于常規的單一指標評價方法。

李曉紅等[8]利用索式提取法對19批（10批正品、9批偽品）骨碎補藥材中的脂溶性成分進行提取，并建立了骨碎補脂溶性成分的氣相色譜（GC）指紋圖譜。確定了10批骨碎補正品藥材的GC指紋圖譜中共有峰44個，詳見圖3，利用主成分分析法（PCA）對指紋圖譜進行統計分析表明10批正品結果聚集在一起，而另外供試的9批偽品結果分散在圖中不同區域，表明正偽品區分結果良好，且不同基源的藥材化學成分差異明顯[8]。因此，利用GC指紋圖譜鑒定骨碎補中脂溶性成分有助于準確地評價藥材的質量。

中藥材的微量元素一方面能夠補充和調節人體所缺乏的各種微量元素，另一方面能夠通過吸收、絡合等方式達到治病的效果，因此微量元素的含量也是評價骨碎補質量的一個重要指標。采用電感耦合等離子體原子發射光譜（ICP-AES）法對寧夏、四川、福建等不同產地骨碎補粉劑中微量元素進行測定，結果顯示產于寧夏的骨碎補藥材中Na、Ca、Zn、Fe的含量高于其他產地，而產于四川的骨碎補藥材中K、Mg含量高于其他產地[9]。表明骨碎補的產地可能對其微量元素含量有影響。

國家規定鉛（Pb）、鎘（Cd）、砷（As）、汞（Hg）、銅（Cu）等元素為中藥材重金屬殘留檢測方面的主要指標。王永來等[10]利用原子吸收分光光度法和原子熒光光譜法對10批不同產地的骨碎補藥材進行了上述5種重金屬元素的殘留量分析。結果顯示，銅為2.6875～8.5217mg/kg，鎘為0.2006～0.2708mg/kg，鉛為0.2504～1.0000mg/kg，汞為0.0034～0.0294mg/kg，砷為0.0066～0.0533 mg/kg，均符合藥典對重金屬標準的規定[10]。該方法的建立有助于中藥材中重金屬殘留量檢測方法的標準化，同時為中藥材的質量控制提供科學依據。

中藥材與其混偽品的鑒定有多種方法，顯微鑒定是廣泛應用的方法之一。骨碎補入藥部位為根莖，而根莖上的鱗片在蕨類植物的分類學上具有重要的意義，所以骨碎補根莖上的鱗片能夠為藥材的鑒定提供重要的依據。朱迎夏等[11]利用光學顯微鏡、掃描電子顯微鏡及石蠟切片方法觀察了骨碎補、川滇槲蕨、櫟葉槲蕨和崖姜的根狀莖鱗片的形態特征。結果顯示，骨碎補、櫟葉槲蕨和崖姜根狀莖的鱗片基在表皮凹陷處著生且分布較均勻，而川滇槲蕨根狀莖的鱗片基在表皮凸起處著生且分布較為稀疏[11]。程茂高等[12]利用石蠟切片法觀察了骨碎補和普通鳳丫蕨根狀莖的橫切面，同時采用粉末鑒定法對二種藥材根狀莖上的鱗片進行觀察，發現骨碎補根狀莖橫切面維管束10～20個，鱗片長7～12mm，寬0.8～1.5mm，邊緣著生睫毛狀鋸齒，普通鳳丫蕨根狀莖橫切面維管束2～3個，鱗片，長1～6mm，寬0.3～1.0mm，全緣。性狀觀察發現，骨碎補藥材斷面纖維性，紅棕色，維管束黃色點狀，而普通鳳丫蕨藥材斷面較平坦，灰白色，維管束白色弧形[12]。后含物觀察發現骨碎補藥材粉末中淀粉粒含量極少，而普通鳳丫蕨藥材粉末中含有大量淀粉粒[12]。這些結果表明鱗片的著生位置、稀疏程度及形態特性，橫切面及維管束特性等均可作為骨碎補及其混偽品顯微鑒別的重要參考依據。

以上分析表明，對于骨碎補藥材及其與混偽品的鑒定可通過基源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、薄層色譜、液相色譜、氣相色譜、微量元素含量測定和重金屬含量測定等多種方法相結合的方式進行，此外，分子生物學手段能為骨碎補的基源鑒定提供更精確的數據。為骨碎補的質量控制提供充分的依據，并確保廣大患者用藥安全、穩定和有效。

3 炮制工藝

砂燙法為骨碎補炮制的主要方法，藥材經過砂炒后可以提高活性成分柚皮苷等的溶出率[13]。李靜等[13]研究了骨碎補的砂燙炮制工藝，首先對加熱溫度、加熱時間、油砂用量等單因素進行優選，再用柚皮苷、黃酮、煎出物含量和膨脹率等指標進行正交設計實驗優選。結果表明210℃、加熱燙3min、用6倍油砂為砂燙骨碎補的最佳炮制工藝。該工藝炮制出的骨碎補柚皮苷、黃酮、煎出物含量和膨脹率等指標最佳，參數量化，可操作性強，為骨碎補砂燙炮制工藝規范化提供了可靠數據。然而，趙清等[14]在研究骨碎補砂燙制品中柚皮苷含量下降的原因時，發現投藥量與柚皮苷含量成負相關，單鍋燙制藥材投藥量過大會造成炮制過火以致成品質量下降，因此在骨碎補燙制過程中投藥量不宜過大。

目前臨床上骨碎補以砂燙品入藥居多，砂燙后質地松脆、鱗片易去除、便于調劑和制劑等[15]，但砂燙法也存在諸多缺陷，如不易控制質量、操作費時費工費力、不宜大量炒制。膨化炮制法是將食品膨化技術應用于中藥炮制，通過該技術使硬質藥材在一定的溫度和壓力下均勻受熱，之后突然減壓以破壞藥材內部分子間的引力，從而使藥材質地疏松[15]。采用正交實驗法，以壓強和保溫時間為因素，并以柚皮苷的含量為指標優選炮制工藝，發現最佳膨化條件為膨化壓力2.0kg/cm2，膨化保溫時間4min[15]。以水浸出物量和柚皮苷含量為指標考察骨碎補膨化品和砂燙品發現，膨化品中水溶性物浸出量和柚皮苷含量均較高，表明膨化炮制法優于砂燙法[16]。

古人認為骨碎補鹽炙走腎，益增補腎之功[17]。耿妍等[18]比較了傳統砂燙工藝和改良砂燙工藝（先潤鹽水后燙品和先燙后潤鹽水品），發現先潤后燙品中柚皮苷含量最高。隨后，確定先用鹽水悶潤再砂燙至鼓起的炮制方法，并對其具體工藝參數進行優選[18]。單因素實驗分別考察了鹽溶液用量、鹽用量、浸泡時間和砂燙溫度等因素對評價指標柚皮苷的含量影響，之后選擇鹽用量、浸泡時間和砂燙溫度為考察因素，并以柚皮苷的含量為評價指標進行正交實驗。結果顯示，每20g藥材用30mL鹽水（含4g鹽），浸泡8h，在190℃下砂燙4min為最佳工藝[18]。蔣曉煌等[19]用食鹽代替油砂對骨碎補進行燙制，以柚皮苷、總黃酮、煎出物量、去毛、膨脹率為評價指標，選擇加熱溫度、加熱時間、食鹽用量為因素水平，采用正交設計法優選鹽燙骨碎補的炮制工藝。結果顯示，210℃、加熱燙制3min、食鹽用量為骨碎補量10倍為鹽燙骨碎補的最佳炮制工藝[19]。盡管砂燙品和先潤鹽水后燙品在水分、灰分和醇溶性浸出物等指標方面均符合藥典標準，但化學成分上存在明顯差異[20]。與砂燙品相比，先潤鹽水后燙品中1-咖啡酰葡萄糖苷和4-乙酰基-3，5-二甲氧基苯甲酸的含量略微降低，而新北美圣草苷和圣草次苷的含量明顯降低，但表沒食子兒茶素、北美圣草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、北美圣草素-7-O-[6″-（3-羥基-4-甲氧基肉桂酰）]-β-D-吡喃葡萄糖苷和柚皮苷的含量則明顯升高[20]。因此，骨碎補砂燙品和先潤鹽水后燙品在臨床功效上存在差異可能是由于炮制后化學成分的差異造成的[20]，臨床上可以根據不同疾病情況選擇相應的中藥飲片。

微波炮制方法是將骨碎補段置于輸出功率為750W的微波爐中，鋪疊成1cm厚，中火烘烤2min，取出，冷卻后去毛[21]。楊梓懿等[21]研究了微波法和砂燙法對骨碎補中總黃酮和水溶性浸出物含量的影響，與砂燙法相比，微波法炮制的骨碎補中總黃酮和水溶性浸出物的含量均較高，表明微波法優于砂燙法。微波法炮制有利于成分的溶出可能與微波的強穿透力有關[19]。

4 提取工藝

4.1 柚皮苷提取工藝 大孔吸附樹脂分離技術是利用大孔吸附樹脂的多孔結構和選擇性吸附功能從中藥提取液中分離精制有效成分的技術。楊蕾等[22]通過靜態、動態吸附和解吸相結合的方法，以柚皮苷的吸附率、解吸率為評價指標綜合評定樹脂型號，并通過考察上柱藥材量、上樣流速、洗脫乙醇濃度和洗脫溶劑用量等確定純化工藝條件。結果表明，HPD-100型大孔吸附樹脂為最佳型號樹脂，藥材-大孔吸附樹脂為1：1的質量比上樣，上樣流速為3BV/h，以8倍柱體積水洗，之后以14倍柱體積50%乙醇洗脫為最佳提取工藝條件。方婧等[23]研究了柚皮苷微波協助提取法，并與藥典提取方法進行比較。微波提取條件為時間5min，提取溫度120℃，提取溶劑50%甲醇，與藥典法提取柚皮苷方法相比具有提取率高、簡便快速、結果準確等優點。以上結果表明大孔吸附樹脂法和微波提取法均為柚皮苷提取的有效方法。

4.2 總黃酮提取工藝 黃艷萍等[24]利用正交實驗法，研究了浸泡時間、溶劑量、提取次數和超聲時間對骨碎補總黃酮提取率的影響，確定了骨碎補總黃酮超聲提取法的最佳條件為加60倍量的水，浸泡4h，超聲提取4次，每次20min。超聲提取法提取骨碎補總黃酮的量明顯高于傳統的乙醇回流法，且超聲提取法具有操作簡單、省時、提取效率高等優點，表明其在中藥提取方面有著良好的前景。

張全香等[25]利用靜態吸附方法對5種不同樹脂純化骨碎補總黃酮的富集效果進行比較，并對分離純化總黃酮的工藝進行了優化。結果表明，在室溫及pH值4.0條件下，骨碎補總黃酮分離純化的最佳樹脂為HPD-BJQH，50%乙醇溶液為最佳解吸液，10mL/min為最佳流量。岳春華等[26]利用頂空氣相色譜法測定了3批骨碎補總黃酮中大孔樹脂殘留物苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯及正庚烷的含量，結果表明，3批樣品中均未檢出以上6種大孔樹脂殘留物。因此，采用頂空進樣氣相色譜法測定大孔樹脂殘留物能夠取得良好的效果，而且方法易于操作，分離度高，重現性好，結果準確[26]。

近年來，中藥提取工藝采用多種方法進行研究分析，試驗結果在一定程度上能反映固定因素水平下的最佳工藝，但某一因素水平發生變化后將無法快速確定對提取結果的影響，提取動力學模型能夠很好地解決該問題。張晉等[27]以骨碎補中的總黃酮為測定指標，研究了水煎煮過程中的提取動力學機制，并擬合出提取動力學方程。利用該動力學模型能較好地驗證試驗結果，且標準偏差均控制在工業可接受范圍內。因此，該模型的建立對于水煎煮法提取骨碎補中總黃酮的生產工藝及骨碎補配方顆粒的生產工藝研究具有一定指導意義，隨著模型的不斷完善將最終達到指導科研與實際工業生產的作用。

5 藥物代謝動力學研究

近年來，傳統中藥的臨床應用功效和安全越來越受到關注，藥物代謝動力學研究能夠為藥材的臨床應用提供良好的參考。Li等[28]利用超高效液相色譜串聯質譜（UPLC-MS/MS）技術對大鼠口服骨碎補提取物后血液中柚皮苷及其代謝物柚苷元的藥物代謝動力學進行了研究。結果表明，小鼠口服骨碎補提取物后，血液中柚皮苷和柚苷元的藥峰濃度分別是（2.56±0.77）×103ng/mL和（222±45）ng/mL，藥峰時間分別為（0.67±0.20）h和（8.0±1.3）h，血藥濃度-時間曲線下面積從0h到最后一個可檢測濃度分別計算為（3.23±0.54）×103ng/mL·h-1和（1.57±0.37）×103ng/mL·h-1，血藥濃度-時間曲線下面積從0 h到∞可計算為 （3.29±0.54）×103ng/mL·h-1和（1.79±0.43）×103ng/mL·h-1，柚皮苷消除半衰期為（4.1±0.8）h，且在8h時還可以看到1個小峰。該方法具有快速、靈敏、專一性強等特性，所獲得的柚皮苷及柚苷元的藥物代謝動力學參數可為骨碎補的臨床應用提供參考。謝雁鳴等[29]通過反相高效液相色譜法測定了大鼠血清和組織中柚皮苷的含量。將18只大鼠分成3個劑量組，按骨碎補總黃酮0.3、0.6、1.2g/kg的劑量灌胃，在用藥后30～480min內每隔30分鐘取眼底動脈或股動脈血清測定柚皮苷含量。柚皮苷于30min開始吸收，90min達到高峰，灌胃后4h血藥濃度明顯下降，灌胃后8h仍有一定血藥濃度，表明骨碎補柚皮苷吸收較緩，在血中保持時間較長，消失較慢。組織中柚皮苷含量的測定結果顯示以胃、腸為最高，但下降迅速；其次肝、肺、腎較高，肌肉、脂肪也有一定分布，腦組織含量甚低。這些結果表明，反相高效液相色譜法具有簡便、靈敏、快速，不受樣品基質中雜質干擾等特性，適用于大鼠血清和組織中柚皮苷的測定。

群體藥代動力學可根據患者個體差異制定個體化給藥劑量，將經典的藥代動力學基本原理與統計學模型相結合，定量描述患者生理、病理、合并用藥等多種個體差異對藥物代謝的影響，分析藥物代謝動力學特性中存在的變異性，考察患者群體中藥物濃度的決定因素[30]。Wang等[31-32]觀察了強骨膠囊（骨碎補總黃酮）中柚皮苷在中國女性原發性骨質疏松癥患者中群體藥代動力學特征。觀察的女性患者年齡40～80歲，共98名，居住于北京東直門等5個社區。血液樣本在患者口服強骨膠囊（250mg含75mg柚皮苷）后0.5、1、2、3、4、6、8、10、 12和24h收集。利用高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS）測定血液樣本中的柚皮苷含量，采用非線性混合效應模型軟件對群體藥代動力學數據進行分析。選取藥物清除率（C1 ）、中央分布容積（v）、吸收速率常數（ka1）、外周分布容積（vii）和室間清除率（clii）作為參數，并通過基礎模型、協變量模型和最終模型進行評估。腎陽虛、肝腎陰虛、年齡、身高、血尿素氮、血清肌酐、丙氨酸轉氨酶、天冬氨酸轉氨酶、高脂血癥等作為協變量。通過正向和逆向模型化建立模型。最終模型通過內部驗證、外部驗證和可視化預測等進行評估。結果顯示最終模型C1、腎陽虛對C1的影響、v、ka1、clii和vii的群體參數分別為37.6μg/L、0.427L、123 L/h、0.12/h、0.3056和1.446，高脂血癥和腎陽虛是重要的協變量。結果表明群體藥代動力學模型可以有效地表征一劑口服強骨膠囊在中國原發性骨質疏松癥患者中的藥代動力學特征。

6 代謝組學研究

代謝組學是對生物體內所有代謝物進行定量分析，并尋找代謝物與生理病理變化的相對關系的研究技術，這符合傳統中藥的完整性和系統性的特征[33]。該技術能為解決中藥療效、中藥治療疾病的分子機制、中藥質量控制及新藥開發等提供良好的支持。Lu等[33]利用代謝組學技術研究了氫化可的松誘導的大鼠腎陽虛證及骨碎補提取物對該疾病的療效。采用UPLC/MS技術對大鼠尿液的代謝譜進行檢測，并用PCA法對代謝譜差異進行分析。與對照組相比，模型組大鼠的苯丙氨酸和苯乙酰甘氨酸（腸道細菌消化苯丙氨酸的代謝物）表達量上調，苯丙氨酸的上調能夠抑制飲食的消化，且在模型組中也發現大鼠食欲下降的情況。模型組大鼠的N2-琥珀酰-L-鳥氨酸（腸道細菌對精氨酸消化的代謝產物）和L-脯氨酸表達量也上調，N2-琥珀酰-L-鳥氨酸和L-脯氨酸均參與精氨酸代謝途徑，表明腎陽虛證影響了氨基酸代謝。與對照組相比，模型組大鼠的肌氨酸酐和檸檬酸表達量下調，二者主要參與能量代謝，表明腎陽虛證與能量代謝的機能障礙有關，且在模型組中也發現大鼠肢體溫度下降的現象。苯酰胺基醋酸鹽是腸道細菌對苯丙氨酸的代謝產物，能夠通過干擾羥基化作用來保護腎組織，該化合物的表達量下降可能是腎陽虛證中腎損傷的表現[27]。苯乙酰甘氨酸、N2-琥珀酰-L-鳥氨酸和苯酰胺基醋酸鹽均為腸道細菌的代謝產物，所以腎陽虛證能夠干擾腸菌群。與模型組相比，骨碎補提取物治療組中肌氨酸酐和檸檬酸表達量上調，所以骨碎補能夠增強能量代謝及線粒體的功能[33]。與模型組相比，治療組中苯丙氨酸、苯乙酰甘氨酸、N2-琥珀酰-L-鳥氨酸和L-脯氨酸表達量下調，而苯酰胺基醋酸鹽表達量上調[33]。以上結果表明腎陽虛證能夠干擾氨基酸代謝、能量代謝和腸道菌群的穩態，而骨碎補提取物對由氫化可的松誘導的腎陽虛證有顯著的療效。同時表明代謝組學是研究中藥療效機制的有力工具[33]。Liu等[34]也利用代謝組學技術研究了骨碎補提取物的抗骨質疏松癥效應及作用機制，利用UPLC-MS/MS技術獲得對照組、模型組和治療組血漿的代謝譜，并利用PCA法和偏最小二乘判別分析（PLS-DA）法對數據分析。結果表明，與對照組相比，模型組中溶血磷脂膽堿、色氨酸和苯丙氨酸的表達量明顯上調，而治療組中這3類化合物的表達量與對照中相近。因此，骨碎補提取物對骨質疏松癥具有明顯的療效，且對骨質疏松癥的治療可能是通過干預抗氧化劑-氧化平衡、色氨酸和苯丙氨酸代謝途徑進行。

7 小結

骨碎補作為常用中藥，在民間有著廣泛的藥用經驗和歷史。對其化學成分和藥理作用機制已經有廣泛的研究，但在其他方面的研究仍存在諸多不足。如：生藥學鑒定方面還缺乏完善的標準；單一炮制和提取工藝不能滿足多方面的需要等。筆者認為今后應從以下幾方面開展工作：對種質資源進行深入調查，同時探索骨碎補仿野生栽培技術和其他人工繁殖技術，為藥材的保護和可持續利用提供保障；完善藥材質量標準，為藥材的鑒別、分級和商品化規格等提供依據；優化炮制和提取加工技術，指導科研和工業化生產；利用代謝組學和藥物代謝動力學等現代技術研究藥材的藥效和治療的分子機制，為臨床用藥安全提供有效的參考。相信隨著研究的不斷深入，作為常用中藥的骨碎補在未來的疾病治療中將會有更好的應用前景。

參考文獻

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（收稿日期：2017-03-08 編輯：梁志慶）