肺炎支原體感染后患兒血清免疫球蛋白及T淋巴細胞亞群的動態變化分析

胡蝶+劉艷杰

[摘要] 目的 探究肺炎支原體感染后患兒血清免疫球蛋白及T淋巴細胞亞群的動態變化分析情況。方法 便利選取該院2014年4月—2016年4月期間確診的肺部支原體感染患兒70例為觀察組，選取同時期于該院體檢的健康小兒45名為對照組，抽取兩組研究對象外周血以免疫散射比濁法和流式細胞術進行檢測。比較兩組在IgG、IgM、IgA血清免疫球蛋白與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ T淋巴細胞亞群的變化情況。結果 觀察組患兒血清免疫球蛋白檢測中IgG、IgM及IgA水平均低于對照組健康小兒。觀察組急性期患兒血清免疫蛋白中IgG（9.12±1.48）g/L、IgM（0.76±0.41）g/L、IgA（1.03±0.19）g/L與對照組相比差異有統計學意義（P<0.05），且觀察組急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢復期（P<0.05）。②觀察組患者各時期T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分別低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。觀察組各時期CD8+（34.27±3.48）%均高于對照組，且觀察組急性期CD3+（59.56±7.34）%、CD4+（40.38±7.23）%、CD4+/CD8+（1.14±0.53）%與恢復期比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論 小兒肺炎支原體感染后，在急性期與恢復期的血清免疫球蛋白及T淋巴細胞亞群均出現不同幅度的變化，MP與機體免疫反應存在相關，可據此做出相對應的MP診治方案。

[關鍵詞] 肺炎；支原體感染；血清免疫球蛋白；T淋巴細胞亞群；動態變化

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）04（c）-0030-03

[Abstract] Objective To study the dynamic changes of serum immune globulin and t lymphocyte subsets in children after the mycoplasma pneumoniae infection. Methods 70 cases of children with mycoplasma pneumoniae infection diagnosed in our hospital from April 2014 to April 2016 were conveniently selected as the observation group， and 45 cases of healthy children in our hospital at the same period were selected as the control group， and the peripheral blood was tested by the scattering immunoturbidimetric assay and flow cytometry， and the changes of IgG，IgM，IgA serum immune globulin and CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ T lymphocyte subsets were compared between the two groups. Results The IgG， IgM and IgA in the serum immune globulin test in the observation group were respectively （9.12±1.48）g/L， （0.76±0.41）g/L and （1.03±0.19）g/L， which were lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the IgG， IgM， IgA levels in the acute phase were slightly lower than those in the recovery phase（P<0.05）， and the CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ in the T lymphocyte subsets in various phases in the observation group were respectively lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the CD8+（34.27±3.48）% in the observation group was higher than that in the control group， and the difference in the CD3+（59.56±7.34）%，CD4+（40.38±7.23）%，CD4+/CD8+（1.14±0.53）% in the acute phase in the observation group was bigger than that in the recovery stage（P<0.05）. Conclusion The serum immune globulin and t lymphocyte subsets have different degrees of changes in the acute phase and recovery phase after the infection of mycoplasma pneumoniae in children and the MP is correlated with the organ immune reaction， and we can make the corresponding MP diagnosis and treatment plan on the basis of the above.

[Key words] Pneumonia； Mycoplasma infection； Serum immune globulin； T lymphocyte subsets； Dynamic change

小兒肺炎支原體感染（MP）是好發于5～15歲兒童的感染性疾病，病癥臨床表現為咳嗽、咳痰、咽痛等癥狀，嚴重時可引發心腦血管疾病等諸多并發癥，威脅到幼兒的身體健康[1]。當患兒肺部感染支原體引發炎癥后，患兒身體免疫機能受到波及。國內外有關研究表明肺炎支氣管感染與細胞免疫及體液免疫存在相關聯系[2]。為探究肺部支原體感染與患兒免疫的相關聯系，該研究便利選擇2014年4月—2016年4月期間收治的70例肺部支原體感染患兒血液中血清免疫球蛋白（Ig）及T淋巴細胞亞群的變化進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

參照《實用兒科學》中關于小兒肺部支原體感染判定標準[3]，便利選取于該院兒科確診收治的肺部支原體感染患兒70例為研究對象，將其作為觀察組，其中男性43例，女性27例。年齡在1～13歲，平均年齡（5.9±1.2）歲；病程1～10 d，平均病程（3.9±2.1）年；其中急性期患兒43例，恢復期患兒27例，且患兒均表現出咳嗽、咳痰、發熱等肺部炎癥癥狀，經影像學方式檢測肺部均出現不同程度的陰影，肺部可聞及中小水泡音。選取同時期于該院體檢的健康小兒45名作為對照組，其中男性31名，女性14名。年齡在1～11歲，平均年齡（6.2±1.4）歲。兩組研究對象在年齡、性別等基本資料的對比差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 納入標準與排除標準

納入標準：觀察組：確診為肺部支原體感染的患兒；年齡在1～15歲；經患兒家屬知情并同意參與。排除標準：觀察組：其他原因引起免疫系統損傷；患有心肝腎等器官性疾病；近2周有呼吸道感染；患有其他急、慢性疾病、抽血采樣前經過抗肺炎支原體感染相關治療[4]。

1.3 檢測方法

分別采集觀察組患兒與對照組小兒外周靜脈血5 mL，并將其分為兩管，一管2 mL靜脈血注入EDTA-K 2 抗凝管中，室溫保存用于T淋巴細胞亞群檢測；另一管3 mL靜脈血注入真空采血管，經離心后采集血清用于免疫球蛋白檢測。采用免疫散射比濁法對比兩組患兒血清中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平，應用SIEMENS BN2特定蛋白分析儀以及配套試劑進行檢測。

將抽取的抗凝血在 24 h內采用BD FACSCanto流式細胞儀對T淋巴細胞亞群進行檢測。加入研究對象抗凝血50 μL，加入六色熒光抗體10 μL，混勻后避光放置于室溫孵育15 min，加1 mL溶血素，避光放置15 min，1 500 r/min離心10 min，棄上清，加入200 μL PBS上機檢測，設門分析各淋巴細胞亞群。

1.4 統計方法

該研究采用SPSS 17.0統計學軟件進行分析，計量數據采用（x±s）表示，行t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 比較兩組血清免疫球蛋白水平

觀察組患兒血清免疫球蛋白檢測中IgG、IgM及IgA水平均低于對照組健康小兒。觀察組急性期患兒血清免疫蛋白中IgG、IgM、IgA與對照組相比差異有統計學意義（P<0.05），且觀察組急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢復期（P<0.05）。見表1。

2.2 比較兩組T淋巴細胞亞群變化情況

觀察組患者各時期T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分別低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。觀察組各時期CD8+均高于對照組，且觀察組急性期CD3+、CD4+、CD4+/CD8+與恢復期比較，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

肺炎支氣管感染在兒童肺炎中所占比例達到10%～40%[5]，特別是嬰幼兒，因其免疫功能較差，易受到支原體攻擊與感染。若少兒長期反復受到肺炎支原體感染，引起患兒生長發育受阻，嚴重影響患兒的身心健康發展。因肺部支原體引發炎癥，機體炎癥因子水平迅速升高，宿主細胞受到攻擊后影響整個機體免疫系統產生變化。因此，對肺炎支原體及患兒免疫系統的相關性及影響的研究是診治小兒肺炎支原體感染的關鍵。

人體免疫功能狀態主要通過體液及細胞免疫反應出來，其中血清免疫球蛋白與T淋巴細胞亞群是兩項表現敏感的判定指標。血清免疫球蛋白能夠高選擇性的與特異性抗原結合，是機體免疫系統受到抗原刺激后產生的重要保護分子，是檢測體液免疫最為常用的判定指標。在肺炎支原體感染后，病原刺激B細胞產生應對肺炎支原體感染的IgG、IgM抗體，引起宿主細胞膜抗原結構的變化或存在于MP抗體相似成分，從而使自身抗體發生病理免疫反應[6]。因IgG、IgM、IgA最能代表IG水平變化情況。IgM是最早出現的人體免疫抗體，因此，該文以血清免疫球蛋白與T淋巴細胞亞群變化進行判斷。陳欣等人[5]在有關報道提到：IgM及IgA含量在肺炎支原體感染后出現顯著的下降，而IgG通常在2周后出現變動。該研究中觀察組急性期IgG、IgM及IgA均略低于對照組血清免疫球蛋白水平（P<0.05），且觀察組急性組患兒IgG、IgM及IgA均低于恢復期（P<0.05），急性期血清免疫球蛋白值更低，表明患兒體液免疫功能的下降程度更大，合成抗體數目減少，從而加劇機體免疫紊亂，引起機體組織損傷。因肺炎支原體感染引起IgG、IgM、IgA水平變化作用于B淋巴細胞，刺激B淋巴細胞大量繁殖，導致體液免疫亢奮，加重MP免疫損傷。此外，因B淋巴細胞與T淋巴細胞存在負相關，一定程度上抑制T淋巴細胞的合成與分泌，進一步加劇機體免疫功能失調和紊亂。

T淋巴細胞是在骨髓中多能干細胞在誘導下發展成為具有免疫活性的T細胞。T淋巴細胞按照表型分類為亞型與亞群。其中CD3+細胞標志為最具代表性的成熟T淋巴細胞。CD4+標志為輔助型T淋巴細胞，能優化T淋巴細胞與B淋巴細胞的防御免疫應答反應。CD8+標志為具有表面毒性T細胞，通過釋放穿孔素、絲氨酸酯酶以及淋巴毒素殺傷靶細胞，達到誘導細胞凋亡的作用。CD4+/CD8+ 表示為機體細胞免疫功能相對情況，是評估機體免疫能力的重要指標。比值異常變化越大表明機體免疫功能的紊亂。

該研究結果中，觀察組各時期T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平值均低于對照組（P<0.05），肺炎支原體感染的患兒機體內T淋巴細胞與正常小兒比較應答反應更弱，細胞活性功能下降。觀察組各時期CD8+水平高于對照組（P<0.05），觀察組急性期CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+波動幅度大于觀察組恢復期。肺炎支原體感染進入血液循環后刺激血液中T淋巴細胞亞群，可見T淋巴細胞亞群變化幅度越大，對機體組織及免疫功能的損傷越大，與李政錦相關研究中提到的T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD8+失調比例嚴重性與肺炎支原體感染呈正相關的結論基本一致[7-8]。

綜上所述，肺炎支原體感染后引起IgG、IgM及IgA降低與CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平的變化，表明機體血清免疫球蛋白與T淋巴細胞活性受到抑制，患者免疫功能下降。可見肺炎支原體感染與機體免疫調節紊亂有關聯。因此，通過檢測機體免疫細胞及免疫系統可輔助診斷肺炎支氣管感染。

[參考文獻]

[1] 楊清廣，鐘勇勛. 小兒肺炎支原體感染后免疫功能的變化規律及其臨床意義[J].臨床和實驗醫學雜志，2014，14（24）：2021-2023.

[2] 蘇曉霽，卓佳佳，許自成，等.嬰幼兒支原體感染與免疫功能的變化[J]. 國際檢驗醫學雜志，2014（24）：3327-3328，3331.

[3] 樓蘭芳，李小兵，張蘭青. 小兒肺炎支原體感染后血清免疫球蛋白、紅細胞免疫及外周血T淋巴細胞亞群的變化情況分析[J]. 中國婦幼保健，2015，30（3）：385-387.

[4] 牛波，池躍朋，帥金鳳，等.兒童難治性肺炎支原體肺炎免疫機制探討[J]. 中國醫藥導報，2016，13（6）：107-110.

[5] 陳欣，趙濤，郭建光，等.難治性肺炎支原體肺炎的肺外表現及免疫狀態的臨床分析[J].臨床肺科雜志，2015（12）：2186-2190.

[6] 楊香紅，李艷莉，羅春玉. 肺炎支原體肺炎患兒免疫功能的變化及其與病情程度和疾病分期的關系[J].實用臨床醫藥雜志，2016，20（7）：113-116.

[7] 李政錦，周文，彭昌，等.小兒肺炎支原體感染后免疫功能變化的研究[J].中華醫院感染學雜志，2012，22（15）：3221-3223.

[8] Zhou Z，li F，Chen X，et al.Mycoplasma pneumonia combined with pulmonary infarction in a child[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（1）：1482-1486.

（收稿日期：2017-01-24）