60例男性無精子癥患者睪丸活檢的病理研究

王曉燕，李家麗，樊元春Δ

1.成都醫學院第一附屬醫院 病理科(成都 610500);2.益陽市婦幼保健院 病理科(益陽413000)

·論著·

60例男性無精子癥患者睪丸活檢的病理研究

王曉燕1，李家麗2，樊元春1Δ

1.成都醫學院第一附屬醫院 病理科(成都 610500);2.益陽市婦幼保健院 病理科(益陽413000)

目的 探討男性無精子癥患者睪丸活檢的病理價值和意義。方法 回顧性分析2012年1月至2017年1月，在成都醫學院第一附屬醫院泌尿外科診治的60例男性無精子癥患者的睪丸活檢組織切片，HE染色觀察病理變化；免疫組化染色觀察IgA、IgG、IgM的表達情況。結果 60例男性無精子癥患者睪丸活檢標本可分為5種類型：活檢正常型占6.67%(4/60)，生精細胞剝落和排列紊亂型占13.33%(8/60)，生精功能低下型占18.33%(11/60)，成熟障礙型占26.67%(16/60)，混合損害型占35.00%(21/60)；其中，混合損害型中唯支持細胞綜合征占6.67%(4/60)，克氏綜合征占10.00%(6/60)，嚴重生精障礙占18.33%(11/60)；睪丸活檢組織免疫組化中IgG陽性率81.7%(49/60)，IgA陽性率68.3%(41/60)，IgM陽性率61.7%(37/60)。結論 睪丸活檢能直接評價睪丸生精功能和生精功能障礙程度，對不育癥患者的治療和預后判斷有重要意義，且無精子癥患者睪丸病變與體液自身免疫紊亂有較大關聯。

男性無精子癥；睪丸活檢；病理研究

無精子癥患者在男性不育患者中占有較大比例，其病因有睪丸性、睪丸前性和睪丸后性等，其中睪丸性無精子癥病因表現復雜且多樣，如睪丸外傷、炎癥、睪丸血管病變等。臨床上睪丸組織活檢對確定是否為睪丸性原因，睪丸損傷類型與程度及病因判斷和治療均有重要意義[1]。本研究通過對60例男性無精子癥患者睪丸組織的病理學分型及免疫組化染色結果的回顧性分析，探究男性無精子癥的病因，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2012年1月至2017年1月在成都醫學院第一附屬醫院泌尿外科進行診治的男性無精子癥患者100例，納入標準：1)根據WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊》(第5版)，所有患者均禁欲5～7 d后，手淫取精液，顯微鏡下檢查3次以上證實無精子或嚴重少精子；2)患者精液中精漿果糖量正常。排除標準：隱睪等先天性睪丸發育不良者。本研究共納入60例男性無精子癥患者，年齡25～40(29.7±2.8)歲；不育時間2～12(5.7±1.5)年。

1.2 方法

所有患者均經泌尿外科醫師檢查性征和副性征等，包括外生殖器發育情況，睪丸和附睪的大小、質地，觀察喉結和陰毛分布情況。B超檢測睪丸橫徑、縱徑和前后徑。局麻下進行睪丸活檢手術，切開睪丸處皮膚約1 cm，分離后取出4×3×2 mm3睪丸組織，采用Bouin氏液進行固定，常規石蠟包埋、切片，HE染色后，中性樹膠封片，在光學顯微鏡下觀察生精小管的組織學形態；對睪丸組織病理性改變進行分類，計算每種病理分型的百分率，并進行95%可信區間比較。另對每例睪丸活檢組織行免疫組織化學SP法染色，觀察IgG、IgA、IgM蛋白的表達情況。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 無精子癥患者HE染色下病理分型及數量比較

60例睪丸活檢組織切片經2位以上高年資病理醫師診斷后，發現其分為5種類型(圖1、圖2)：正常型、生精細胞剝落和排列紊亂型、生精功能低下型、成熟障礙型、混合損害型，其中混合損害型數量最多，占35.00%(21/60)(表1)。睪丸活檢正常型：鏡下見曲細精管生精細胞數量、形態正常；生精細胞剝落和排列紊亂型：可見生精細胞排列不規則，并伴大量細胞脫落致曲細精管管腔堵塞；生精功能低下型：鏡下形態為生精小管壁內可見不同發育階段的生精細胞，比例基本正常，但總體數量減少，生精上皮變薄；成熟障礙型：生精細胞比例失常，精原細胞及精母細胞可見，精子細胞及精子少見；混合損害型：表現多樣，以嚴重生精障礙型最多見，占總數的18.33%(11/60)。其中唯支持細胞綜合征(sertoli-cell-onlysyndrome ,SCOS)表現為曲細精管內生精細胞完全缺如,生精上皮僅由支持細胞組成,支持細胞顯著增生,排列疏松、紊亂,部分曲細精管廣泛纖維化、玻璃樣變性、皺縮、塌陷甚至管腔閉鎖。克氏綜合征則無生精細胞，基底膜增厚，間質細胞過度增生，精小管內僅存支持細胞，無胚細胞存在，局灶精小管纖維化和透明樣變(表2)。

圖1 活檢正常型

病理類型例數構成比/%95%CI活檢正常型46.672.46～23.13生精細胞剝落和排列紊亂型813.333.41～21.35生精功能低下型1118.339.57～32.14成熟障礙型1626.679.63～24.28混合損害型2135.0023.57～45.35合計60100.00

表2 混合損害型分布情況比較

圖2 活檢異常型

2.2 睪丸活檢組織免疫組化染色結果比較

睪丸活檢組織免疫組化中IgG、IgA和IgM蛋白均表達于細胞質中，陽性表達率分別為81.7%(49/60)、68.3%(41/60)和61.7%(37/60)，組間比較采用2檢驗，IgG、IgA和IgM陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)(表3)。

表3 睪丸活檢組織免疫組化染色結果比較[n(%)]

圖3 免疫組化結果

3 討論

無精子癥在臨床上可分成梗阻性和非梗阻性兩大類型，梗阻性是由于輸精管道缺如或輸精管阻塞導致精子不能通過輸精管排出；而非梗阻性則是由于生精細胞分化或生精細胞變形等引起生精障礙，如雙側隱睪、精索靜脈曲張等。

睪丸活檢不僅能對生精功能有相對準確的評價，且對不育病因的判斷及不育癥的治療具有重要價值。本研究60例男性無精子癥患者睪丸活檢病理結果顯示，4例患者活檢正常，推測其不育癥原因是精道精囊后前病變阻塞造成的結果。在不育癥病理分型上，以睪丸混合損害型最高，占35.00%，與前期關于無精子癥睪丸活檢病理研究[2-3]報道結論類似，其在病理表現為生精上皮細胞變薄，生精細胞數目嚴重減少，局灶曲細精管或間質細胞纖維化及玻璃樣變性。目前，此類無精子癥患者在治療上仍無有效方法，且療效較差，但有助于臨床診斷，可在治療方面做有力參考依據。生精細胞剝落和排列紊亂型是由于生精細胞脫落造成輸精管梗阻的類型，故針對病因治療或可恢復生育能力[4]；生精功能低下型和成熟障礙型患者能夠通過激素治療或者輔助生殖技術使其配偶受孕[5]，目前針對此類無精子癥患者采用卵泡漿內單精子注射技術，將不成熟生精細胞作為配子可以使卵子受精并發育成胚胎[6-7]。因此，無精子患者睪丸活檢病理組織學評估對臨床指導不育癥治療有重要價值。

研究[8-10]發現，無精子癥患者血清抗精子自身抗體大多為陽性，可見自身免疫性因素與睪丸病變所致的無精子癥關系密切。本研究免疫組化染色結果顯示，IgG、IgA和IgM陽性率分別為81.7%、68.3%和61.7%，推測無精子癥病因有以下兩種可能：1)由于機體產生自身抗體及其免疫復合物造成曲細精管基底膜沉積，造成血-生精屏障破壞，曲細精管管壁增厚，伴纖維化，造成其內環境改變，生精細胞因營養不足而變性[11]；2)抗體及其復合物在睪丸間質血管壁上沉積，造成血管壁損傷，導致血管壁增厚及纖維化，進而導致微循環障礙，加重曲細精管生精細胞和支持細胞缺氧變性，生精細胞壞死脫落[12-13]。

綜上所述，睪丸組織活檢切片可有效評價患者生精功能及其障礙程度，對不育癥患者的治療和預后判斷有重要意義。免疫組化染色結果分析顯示，無精子癥患者睪丸病變多由體液自身免疫紊亂導致，通過改善患者免疫功能狀態，拮抗抗原抗體復合物沉積，改善睪丸組織內環境及采用各種輔助生殖技術或可達到助孕目的[14-15]。在睪丸組織取材方面，切開睪丸白

膜后避免因止血而過度擠壓組織，大小以4×3×2 mm3為宜，避免切取組織過大影響睪丸功能[16]。

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The Pathological Study on the Testicular Biopsy of 60 Azoospermia Patients

Wang Xiaoyan1,Li Jiali2,Fan Yuanchun1△.

1.Department of Pathology,The First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College,Chengdu 610500,China; 2.Department of Pathology,The Maternal and Child Health Care Hospital of Yiyang City,Yiyang 413000,China

Objective To investigate the pathological value and significance of testicular biopsy in azoospermia patients.Methods The histological sections of testicular biopsy of the 60 azoospermia patients treated from January of 2012 to January of 2017 in The First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College were analyzed retrospectively.The HE staining was used to observe the pathological changes and the immunohistochemical staining was adopted to detect the expressions of IgA,IgG and IgM.Results The testicular biopsy specimens of the 60 cases could be divided into five types including the type of normal specimens (6.67%),the type of spermatogenic cell spalling and disorganizing (13.33%),the type of spermatogenic dysfunction (18.33%),the type of dysmaturity (26.67%),and the type of mixed damage (35.00%).In the type of mixed damage,the sertoli cell-only syndrome accounted for 6.67%,the klinefelter syndrome accounted for 10%,and the severe spermatogenic dysfunction accounted for 18.33%.The results of the immunohistochemical staining showed that the positive rates of IgG,IgA and IgM were 81.7%,68.3% and 61.7% respectively.Conclusion The Testicular biopsy can be used directly to evaluate the testicular spermatogenesis and the degree of spermatogenic dysfunction,which is of importance for the treatment and prognosis of infertile patients.In addition,the testicular lesions of azoospermia patients are correlated closely with their humoral autoimmune disorder.

Azoospermia; Testicular biopsy; Pathological study

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20170502.1628.006.html

10.3969/j.issn.1674-2257.2017.03.019

R698.2

A

△通信作者：樊元春，E-mail:1521124905@qq.com