對甲胎蛋白異質(zhì)體在診斷肝細(xì)胞癌中的價(jià)值評估

程 田，劉獻(xiàn)華，張清萍，唐振林,宋文忠

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科，四川 成都610072)

對甲胎蛋白異質(zhì)體在診斷肝細(xì)胞癌中的價(jià)值評估

程 田，劉獻(xiàn)華，張清萍，唐振林,宋文忠

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科，四川 成都610072)

目的 對甲胎蛋白異質(zhì)體在診斷肝細(xì)胞癌中的價(jià)值進(jìn)行評估。方法 選擇186例良性肝病和79例肝癌患者的血清。通過偶聯(lián)了小扁豆凝集素(LCA)的微量離心柱分離、洗脫獲得AFP-L3，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法檢測AFP和AFP-L3水平，計(jì)算AFP-L3占AFP的百分比即AFP-L3%。 結(jié)果 肝細(xì)胞癌組血清AFP、AFP-L3和AFP-L3%均高于良性肝病組(P<0.01)；兩組患者的AFP-L3與AFP水平均呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.729，P<0.01)；而AFP-L3%與AFP水平均無相關(guān)關(guān)系(r=-0.125，P>0.05)；AFP，AFP-L3和AFP-L3%的ROC曲線下面積大小分別是0.64,0.79和0.92；AFP-L3%診斷肝細(xì)胞癌靈敏度是82.3%，特異度是92.4%，YOUDEN指數(shù)為0.747，陽性預(yù)測值為85.5%，陰性預(yù)測值為92.5%。結(jié)論 甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3%)作為肝細(xì)胞癌的診斷指標(biāo)明顯優(yōu)于AFP，值得臨床推廣應(yīng)用。

甲胎蛋白異質(zhì)體；肝細(xì)胞癌；微量離心柱法

(ChinJLabDiagn,2017,21:0948)

原發(fā)性肝細(xì)胞癌是我國常見的一種惡性腫瘤，發(fā)病率排名第四位，約為28.7/10萬。甲胎蛋白(α-Fetoprotein，AFP )作為肝細(xì)胞癌的腫瘤標(biāo)志物在臨床應(yīng)用已久，但一些良性肝病如：慢性肝炎、肝硬化等，AFP水平往往也會(huì)升高，造成對肝細(xì)胞癌鑒別困難。現(xiàn)已知AFP分子存在三種糖蛋白形式：AFP-L1，AFP-L2和AFP-L3。其中AFP-L3由肝癌細(xì)胞生成，在血清中的水平隨著癌細(xì)胞增殖呈線性升高，對肝細(xì)胞癌的診斷有很高的特異性[1,2]。1999年第四屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議上建議AFP-L3作為肝細(xì)胞癌診斷標(biāo)記物應(yīng)用于臨床。本研究選擇265例良惡性肝病患者血清，應(yīng)用微量離心柱法分離AFP-L3，檢測AFP和AFP-L3水平，并對甲胎蛋白異質(zhì)體在診斷肝細(xì)胞癌中的價(jià)值進(jìn)行評估。

1 資料與方法

1.1 一般資料 全部病例來源于2012年2月至2013年6月四川省人民醫(yī)院門診和住院患者。其中肝細(xì)胞癌 79例，男性57例，女性22例，年齡38-73歲，平均47.03±5.79歲；良性肝病186例(慢性肝炎132例，肝硬化54例)，男性143例，女性43例，年齡24-60，平均45.32±4.22歲；診斷符合2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》以及中華人民共和國衛(wèi)生部編的《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集靜脈血后離心取血清，3 h內(nèi)檢測。

1.2.2 檢測方法 通過微量離心柱法獲得含AFP-L3分離液；應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析技術(shù)檢測AFP和AFP-L3，計(jì)算出血清AFP-L3水平以及占血清AFP的百分比即AFP-L3%。血清AFP和分離液中AFP-L3水平檢測儀器為美國雅培i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑為雅培配套藥盒；微量離心柱裝置由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS13.0軟件進(jìn)行。因AFP、AFP-L3和AFP-L3%為非正態(tài)分布數(shù)據(jù)，采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)；AFP-L3,AFP-L3%與AFP的相關(guān)性采用線性相關(guān)分析；ROC曲線下面積比較用Z檢驗(yàn)。以P<0.01有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝細(xì)胞癌組與良性肝病組血清AFP、AFP-L3和AFP-L3%水平的比較 見表1。肝細(xì)胞癌組血清AFP、AFP-L3和AFP-L3%均高于良性肝病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1 肝細(xì)胞癌和良性肝病血清AFP、AFP-L3和AFP-L3%的結(jié)果

注：與肝細(xì)胞癌組比較,*χ2=23.54，P<0.01；**χ2=99.84，P<0.01；***χ2=120.87，P<0.01

2.2 肝細(xì)胞癌組以及良性肝病組AFP-L3、AFP-L3%與AFP相關(guān)性分析 AFP-L3值與AFP值相關(guān)性分析見圖1。肝細(xì)胞癌組：AFP-L3值與AFP值呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.722，P<0.01)；良性肝病組：AFP-L3值與AFP值呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.729，P<0.01)。AFP-L3%與AFP值相關(guān)性分析見圖2。肝細(xì)胞癌組：AFP-L3%與AFP值無相關(guān)關(guān)系(r=-0.025，P>0.05)；良性肝病組：AFP-L3%與AFP值無相關(guān)關(guān)系(r=0.094，P>0.05)。

圖1 AFP-L3值與AFP值的相關(guān)性分析

圖2 AFP-L3%與AFP值的相關(guān)性分析

2.3 AFP、AFP-L3和AFP-L3%ROC曲線以及相關(guān)參數(shù) 見表2，圖3。ROC曲線下面積(AUC)比較：AFP-L3%遠(yuǎn)高于AFP和AFP-L3，該差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；敏感度和特異度比較：AFP-L3%最高；AFP最低；Youden’s index(正確診斷指數(shù))比較:AFP-L3%最高；AFP最低。陽性預(yù)測值比較：AFP-L3%最高；AFP最低；陰性預(yù)測值比較：AFP-L3%最高；AFP最低。

3 討論

甲胎蛋白(AFP)作為肝細(xì)胞癌的診斷及療效觀察指標(biāo)已被醫(yī)學(xué)界廣泛認(rèn)可。一般來說，血清中AFP長期保持高水平以及AFP升高程度的明顯增加，則診斷為肝細(xì)胞癌的可能性也隨之增大。而臨床上很多的良性肝病如：慢性肝炎和肝硬化患者血清AFP也會(huì)不同程度升高，與部分肝細(xì)胞癌血清AFP水平重疊[3]。因此，僅依靠AFP的升高不能鑒別良惡性肝病。研究發(fā)現(xiàn)，AFP含有不同糖鏈，可分為3型：AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3。其中AFP-L3主要來源于肝癌細(xì)胞，與肝癌細(xì)胞巖藻糖化有關(guān)[4]，較客觀地反映肝細(xì)胞惡變狀況，可作為鑒別良惡性肝病，預(yù)警肝癌以及觀察療效的潛在指標(biāo)[5，6]。

表2 AFP、AFP-L3和AFP-L3%ROC曲線參數(shù)的比較

*：AFP,AFP-L3和AFP-L3%兩兩比較，P值均<0.01；

圖3 AFP、AFP-L3和AFP-L3%的ROC曲線

我們采用了微量離心柱法[7]對AFP-L3進(jìn)行分離，然后檢測AFP-L3水平。本研究顯示肝細(xì)胞癌患者血清AFP，AFP-L3和AFP-L3%明顯高于良性肝病患者。肝細(xì)胞癌患者血清AFP水平的明顯升高，說明高水平AFP對肝細(xì)胞癌的診斷中仍有幫助。AFP-L3的升高與肝癌細(xì)胞生成較多AFP-L3分子有關(guān)，體現(xiàn)了良惡性細(xì)胞的異質(zhì)性。從圖1A可以看出，血清AFP-L3值和AFP值正相關(guān)， 即當(dāng)患者血清AFP升高時(shí)，AFP-L3水平也相應(yīng)升高，該趨勢也存在于良性肝病組,限制了AFP-L3水平對肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值[8]；從圖1B可以看出，AFP-L3%與AFP無相關(guān)關(guān)系，AFP-L3%的升高不依賴于AFP的升高，只與肝病良惡性有關(guān)；即肝細(xì)胞癌患者血清AFP水平低中度升高時(shí)，AFP-L3%就可能明顯升高，能提前預(yù)警肝癌的發(fā)生[5，9]。

通過ROC曲線圖我們發(fā)現(xiàn)，AFP-L3%的AUC為0.92，遠(yuǎn)高于AFP和AFP-L3，對肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值很高[10]。以本研究結(jié)果的CUT OFF值作為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)，AFP-L3%對HCC診斷的靈敏度和特異度均優(yōu)于AFP[11]；Youden’s指數(shù)比較中，AFP-L3%的最大，說明其篩查的效果最好；AFP-L3%的陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值高于AFP，說明其診斷試驗(yàn)的收益高于AFP。

綜上所述，甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3%)作為肝細(xì)胞癌的診斷指標(biāo)明顯優(yōu)于AFP，值得臨床推廣應(yīng)用。

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The value of detecting α-Fetoprotein variants with a micro-spin column method in differential diagnosis of hepatocellular carcinoma and benign liver diseases

CHENGTian，LIUXian-hua，ZHANGQing-ping，etal.

(DepartmentofNuclearMedicine,SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople'sHospital,Chengdu610072,China)

Objective To evaluate the diagnostic value of detecting α-Fetoprotein variants for discriminating hepatocellular carcinoma and benign liver diseases.Methods α-Fetoprotein variants from 265 patients with liver diseases (hepatocellular carcinoma 79; benign liver diseases 186) were isolated with micro-spin column equipped lens culinaris agglutinin (LCA).The levels of AFP and AFP-L3 were then detected by ARCHITECT i2000 System,and the proportions of AFP-L3 (AFP-L3%) were calculated.Results AFP,AFP-L3 and AFP-L3% in patients with hepatocellular carcinoma was significantly higher than that in patients with benign liver diseases (P<0.01).No significant relationship beween AFP-L3% and AFP (r=-0.125，P>0.05);The area under curve (AUC) of AFP，AFP-L3 and AFP-L3% were respectively 0.64,0.79 and 0.92.The sensitivity of AFP-L3% in HCC diagnosis was 82.3% and the specificity was 92.4%；YOUDEN index of AFP-L3%was 0.747，positive predictive value was 85.5%，negative predictive value was 92.5%.Conclusion AFP-L3 (AFP-L3%) is of clinical significance for discriminating hepatocellular carcinoma and benign liver diseases.

α-Fetoprotein variants;hepatocellular carcinoma;micro-spin column method

1007-4287(2017)06-0948-03

R735.7；R730.45

A

程田(1973-)，男，主管技師，醫(yī)學(xué)碩士，從事腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)和研究工作。

2016-09-13)