重癥手足口病患兒NSE S100β蛋白 sVCAM-1和神經肽Y的變化及臨床意義

王海軍 成怡冰 宋春蘭 崔亞杰 陳 芳 李 鵬

1)鄭州兒童醫院 鄭州 450000 2)鄭州兒童急危重癥疾病實驗室 鄭州 450000

重癥手足口病患兒NSE S100β蛋白 sVCAM-1和神經肽Y的變化及臨床意義

王海軍1)成怡冰1，2)宋春蘭1)崔亞杰1)陳 芳1)李 鵬1)

1)鄭州兒童醫院 鄭州 450000 2)鄭州兒童急危重癥疾病實驗室 鄭州 450000

目的 探討重癥手足口病患兒腦脊液及血清中S100β蛋白、神經元烯醇化酶(NSE)、可溶性血管內皮細胞載附分子(sVCAM-1)和神經肽Y(YNP-Y)水平變化及臨床意義。方法 60例重癥手足口病患兒根據診斷分為重型組(20例)和危重型組(40例)，并選取同期我院診治的無中樞神經系感染的普通型手足口患兒為對照組(30例)。電化學發光法檢測各組患兒NSE、S100β蛋白水平，ELISA檢測血清和腦脊液SVCAM-1的含量，采用放射免疫分析法測定NPY的含量。結果 與對照組相比，重癥手足口病患兒腦脊液和血清中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神經肽Y水平顯著增高(P<0.05)；與重型HFMD組相比，危重型HFMD組患兒血清和腦脊液中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神經肽Y水平明顯增高，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 重癥手足口病患兒腦脊液和血清中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神經肽Y水平的變化與病情輕重有關，可用于反映腦損害的程度，還可評估其預后，對患兒損傷程度小，值得臨床推廣。

重癥手足口病；S100β蛋白；神經元烯醇化酶；可溶性血管內皮細胞黏附分子；神經肽Y

手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)是我國兒童常見的急性傳染病，主要是由腸道病毒(EV71和CA16)感染引起。輕癥病例1周左右可自愈。部分重癥病例臨床進展迅速，特別是EV71感染病例，因神經系統受累及由此引起的腦干腦炎、神經源性肺水腫、肺出血等是本病致死或致殘的主要原因[1-3]。尋找一種快速判斷病情嚴重程度、指導評估預后且臨床簡單的檢測指標，對降低重癥患兒病死率和致殘率有重要意義。血清和腦脊液S100β蛋白、神經元烯醇化酶、可溶性血管內皮細胞黏附分子、神經肽Y水平變化是反映神經細胞損傷的生物學標志物[4-6]。本研究觀察重癥手足口病患兒腦脊液和血清NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神經肽Y的變化，探索重癥HFMD患兒早期腦損傷相關指標變化及與臨床預后的關系，現介紹如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 根據國家衛生部頒布的《手足口病診療指南(2010年版)》手足口病診斷標準[1]，收集2014-04—2015-11在我院診治的手足口病患兒90例。其中普通型30例，重癥病例60例(重型40例和危重型20例)。HFMD診斷標準：(1)重型：伴神經系統受累表現，如精神差、嗜睡、易驚、譫妄；頭痛、嘔吐；肢體抖動，肌陣攣、眼球震顫、共濟失調、眼球運動障礙；無力或急性弛緩性麻痹；驚厥；體征可見腦膜刺激征，腱反射減弱或消失。(2)危重型：危重型HMFD診斷標準：頻繁抽搐、昏迷、腦疝；呼吸困難、發紺、血性泡沫痰、肺部啰音等；休克等循環功能不全表現。(3)不伴中樞神經系感染的普通型手足口患兒為對照組(30例)。所有患兒大便標本均送鄭州市金水區疾病控制中心，進行腸道病毒PCR病原學檢測，其中EV71陽性89例。60例重癥患兒男32例，女28例，年齡6月～4歲5月，平均15.34個月。同時收集30例無中樞神經系統癥狀的輕型手足口病患兒，男16例，女14例，年齡8個月～4歲6個月，平均17.69個月。經我院倫理委員會審評通過，獲受試家屬知情同意后入組。3組患兒年齡、性別差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1．2 方法 患兒入院后24 h內空腹抽取靜脈血3 mL，用肝素抗凝，并腰椎穿刺采集腦脊液2 mL。電化學發光法檢測血清中S100β蛋白和NSE的含量(試劑盒購自德國羅氏診斷有限公司產品)，雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗法測定血清和腦脊液SVCAM-1的含量(試劑盒購自上海拜力生物科技有限公司)，采用放射免疫分析法測定NPY的含量(試劑盒購自北京科美東雅生物技術有限公司)，所有血標本采集有固定專人進行。檢驗工作均由我院檢驗科專人嚴格按照說明書進行。

2 結果

重癥HFMD患兒血清和腦脊液中各指標水平顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1、表2。危重型HFMD患兒血清和腦脊液NSE、S100-β、sVCAM-1和NPY水平明顯高于重型組和對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，重型組患兒血清和腦脊液中NSE、S100-β、sVCAM-1和NPY水平較對照組增高，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3、表4。

表1 2組血清各檢測指標比較±s)

表2 2組腦脊液各檢測指標比較±s)

表3 危重型和重型HFMD患兒血清各項指標比較±s)

表4 危重型和重型HFMD患兒腦脊液各項指標比較

3 討論

手足口病(HFMD)是由腸道病毒引起的兒童常見傳染病，近年發展為波及世界范圍的傳染病[7-8]。重癥病例多為新型腸道病毒71型(EV71)感染所致，EV71具有高度噬神經性，通過逆向軸漿運輸機制侵犯中樞神經系統，直接侵犯或釋放炎癥因子等引起神經細胞損傷，特別是腦干等部位為該病毒攻擊靶點[9]。多數學者認為，神經細胞損害為HFMD發病的關鍵環節，腦干腦炎引起中樞性交感神經興奮，繼發神經性肺水腫、肺出血，以及心肺功能衰竭，最終導致患兒死亡，少數經搶救存活病人遺留有中樞性低通氣障礙綜合征、肢體癱瘓等神經系統后遺癥[2-3，6，8-9]。Chang等[3]報道，手足口病并發腦干腦炎患兒的病死率為4.8%，神經系統后遺癥的發生率為14.3%。目前是我國兒童致死率及致殘率最高的急性傳染病[1-2，8]。如何早期診斷重癥手足口病合并神經損傷及損傷嚴重程度，減少病死率、降低致殘率，是臨床迫切需要解決的問題。

NSE和S100β蛋白作為神經元損傷敏感性和特異性高的生物學標記物，在多數研究中得到證實[4，10-11]。NSE主要存在于腦神經細胞核神經內分泌細胞的胞質內。正常情況下體液中的NSE含量極低，當神經細胞受損時，大量的NSE可通過受損的包膜及血腦屏障進入腦脊液和血循環中[12]。研究證實，急性腦損傷時腦脊液和血清NSE水平均顯著增加，對疾病的嚴重程度和預后評估有重要價值[12-13]。S-100β是一種神經組織蛋白，特異性地存在于中樞神經系統和周圍神經系統的神經膠質細胞中[4，14]。國外有學者認為，S-100β是迄今為止最能反映腦損傷程度的特異性蛋白，其水平越高，腦損傷程度越重，預后越差[4]。腦組織損傷后腦脊液和血清中S-100β濃度升高已經在動物實驗和臨床研究中得到證實，并作為腦損傷的早期診斷、動態監測病情、判斷預后的有用指標[4]。本研究結果顯示，重癥HFMD組患兒血清和腦脊液中S100β蛋白、NSE水平顯著高于對照組，重癥HFMD患兒中危重型HFMD患兒血清和腦脊液中S100β蛋白、NSE濃度水平較重型HFMD組明顯增高，病情越重S100β蛋白、NSE水平越高，提示血清和腦脊液中S100β蛋白、NSE可作為評估重癥HFMD患兒伴神經系統損傷的指標。

可溶性血管細胞間黏附分子(sVCAM-1)是介導炎癥細胞黏附、遷移的重要因子[6，15]。病毒性腦炎時，由于病毒侵入機體及腦組織，激活T淋巴細胞，活化的細胞及炎癥因子的刺激，誘導內皮細胞ICAM-1的釋放，從而導致血sVCAM-1增高[6，15]。本研究結果表明，重癥手足口病患兒腦脊液和血清sVCAM-1顯著高于對照組，增高水平與HFMD病情危重程度明顯相關，與報道基本一致[6]。提示腦脊液和血清sVCAM-1水平變化可作為評估HFMD患兒神經損傷及病情嚴重程度的指標之一。

NPY屬胰多肽家族成員，廣泛存在于哺乳動物中樞和外周神經系統，是體內含量最豐富的神經肽之一[16]。近年來，不斷有報道指出，在腦炎、缺血缺氧性腦病、腦出血、癲癇等腦損傷疾病研究中均發現NPY水平的增高[16-18]。趙莉等[19]發現，NPY在腦炎早期就明顯增高，且NPY總體水平與顱腦損傷程度密切相關。本研究結果顯示，手足口病患兒腦脊液和血清NPY顯著高于對照組，隨著病情加重，NPY水平明顯增高。體內NPY增高是多方面共同作用的結果，病毒性腦炎急性期機體處于應激狀態，交感神經-兒茶酚胺系統異常激活，導致NPY水平增高；同時，病毒感染侵犯中樞神經系統，直接或間接激活機體免疫反應，多種生物活性分子釋放，對即系產生免疫性損傷、血管炎性變化、激活血小板釋放NPY等；此外，腦水腫、顱高壓等顱內結構變化，使體內應激性激素水平增高，進一步加重NPY水平增高[15，17-19]。

綜上所述，重癥手足口病患兒腦脊液及血清中S100β蛋白、NSE、sVCAM-1以及NPY變化與病情輕重相關，對判斷病情有重要的臨床價值。

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(收稿201-01-19)

Clinical significance of the levels of Sl00B protein，NSE，sVCAM-l and NPY in children with severe hand-foot-and-mouth disease

Wang Haijun*，Cheng Yibing，Song Chunlan，Cui Yajie，Chen Fang，Li Peng

*Children’s Hospital of Zhengzhou，Zhengzhou 450000，China

Objective To observe clinical significance of the levels of s100β protein，neuron specific enzyme (NSE)，soluble vascular endothelial cell (sVCAM-1) and neuropeptide Y (YNP-Y) in serum and cerebrospinal fluid (CSF) in children with severe hand-foot-and-mouth disease (HFMD)．Methods Sixty patients with severe HFMD were enrolled in this study and were divided into severe group (20 cases) and critical group (40 cases) according to the diagnosis criteria．At the same time thirty ordinary HFMD patients without central nervous system infection were selected as the control group．The levels of NSE and S100β protein in each group were detected by the electrochemical luminescence，the concentration of SVCAM-1 was detected by ELISA and the level of NPY was determined by the radioimmunoassay．All results were statistically analyzed by using V16．0 SPSS software．Results Compared with those in the control group，the levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in both serum and CSF were significantly elevated in severe and critical groups．Furthermore，the critical HFMD group had the higher levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in serum and CSF than the severe HFMD group．All the differences were statistically significant (P<0.05)．Conclusion The levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in children with severe hand-foot-and-mouth disease may be related to the severe condition of disease and may evaluate the prognosis，which should be popularized in clinic．

Severe hand-foot-and-mouth disease；S100β protein；Neuron specific enzyme；Soluble vascular endothelial cell adhesion molecule；Neuropeptide Y

R512.5

A

1673-5110(2017)10-0029-04