2種青龍衣化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

閆勇杰 王麗紅

摘要 通過(guò)對(duì)南北2種青龍衣化學(xué)成分及抗菌、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛等藥理作用的研究進(jìn)展綜述，發(fā)掘其巨大的潛在藥用價(jià)值，為胡桃屬植物資源綜合開(kāi)發(fā)利用提供廣闊的前景。

關(guān)鍵詞 青龍衣；山核桃；核桃楸；化學(xué)成分；藥理作用

Research Progress on Chemical Constituents and Pharmacological Effects of Two Kinds of Juglans Green Peel

YAN Yong-jie，WANG Li-hong* （School of Pharmacy，Jiamusi University，Jiamusi，Heilongjang 154007）

Abstract This paper summarized chemical constituents and pharmacological effects（such as anti-bacterial，anti-tumor and analgesic effects and so on） of two kinds of Juglans green peel to explore its huge potential medicinal value，and provided broad prospects for the comprehensive development and utilization of walnut plant resources.

Key words Juglans green peel；Juglans cathayensis；Juglans mandshurica；Chemical constituents；Pharmacological effects

山核桃（Juglans cathayensis），又名野核桃、小核桃，主要產(chǎn)于浙江、安徽、甘肅、河北等地，生長(zhǎng)在海拔800～2 800 m的雜木林中。核桃楸（Juglans mandshurica），又名胡桃楸，分布于東北三省等地，多生于濕潤(rùn)、排水良好、土質(zhì)肥厚的山坡或溝谷兩側(cè)[1]。兩者均為胡桃科（Juglandaceae）胡桃屬（Juglans）植物。青龍衣也就是核桃楸皮，即未成熟的山核桃青皮剝制曬干而成，這2種植物的果實(shí)青皮均作為青龍衣入藥。味苦、性寒，具有清熱、解毒、止痢、明目等功效[2]，治泄瀉、痢疾、白帶、目赤等。青龍衣作為一味傳統(tǒng)中藥，其開(kāi)發(fā)利用早就被人重視。《浙江天目山藥植志》記載道：山核桃的青皮搗碎取汁可擦治皮膚癬癥，其種仁具有定喘清肺、滋潤(rùn)溫腎的功效，黃酒送服可治腰痛[3]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)其化學(xué)成分、藥理活性和臨床應(yīng)用等方面做了大量研究，表明青龍衣具有抗菌消炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤等作用，特別是抗腫瘤作用顯著，具有極其寶貴的藥用價(jià)值。經(jīng)查閱文獻(xiàn)已知國(guó)內(nèi)有的學(xué)者將這2種植物及其拉丁名混淆，筆者現(xiàn)將近年來(lái)對(duì)這2種青龍衣化學(xué)成分的研究進(jìn)展、藥理作用及應(yīng)用綜述如下。

1 化學(xué)成分

山核桃和核桃楸的青龍衣主要含有多糖類、醌類、黃酮類以及大量鞣質(zhì)等化學(xué)成分，萘醌及其衍生物已成為各地學(xué)者的研究重點(diǎn)。1973年Ohta等[4]從野核桃新鮮青皮中分離提純出5，8-二羥基-l，4萘醌，得出青龍衣中萘醌的存在。Min等[5]通過(guò)對(duì)胡桃楸未成熟青皮進(jìn)行提取研究，分離得到了4種黃酮醇、2種三羥基苯甲酰沒(méi)食子酸葡萄糖苷和3種萘基吡喃葡萄糖苷，并鑒定了它們的結(jié)構(gòu)。杜旭等[6]將山核桃嫩皮80 ℃烘干后利用馬福爐灰化得到多種無(wú)機(jī)鹽，原子吸收分光光度計(jì)測(cè)得：鉀56.8%，鈣21.4 %，鎂5.5%，鐵5.1%，鋅2.27%，鋰1.98%，銅0.25%。Lee等[7]從胡桃楸的青果皮中分離得到胃毒活性物質(zhì)，為進(jìn)一步研究其藥理活性提供了有力的依據(jù)。周靖等[8]采用氫化物法和火焰原子吸收法對(duì)核桃楸青果皮中金屬元素進(jìn)行測(cè)定，鐵、鉀、錳、鋅、鎂、銅、鈣和砷都有測(cè)得，且鉀含量最高，為41 157.96 μg/g。孫墨瓏等[9]分別用超聲提取法、索氏提取法以及常規(guī)加熱提取法提取分離出胡桃醌，并用高效液相色譜儀測(cè)定其含量，結(jié)果得出超聲提取法純化出該青皮中胡桃醌含量最多，常規(guī)提取法其次，索氏提取法較低。季宇彬等[10]對(duì)青龍衣多糖進(jìn)行提取、分離，經(jīng)純化后可得多種單糖，如葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖、半乳糖等。李秀鳳[11]運(yùn)用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)出野核桃青皮中脂肪酸的成分及含量，其中不飽和脂肪酸含有2.93%的十六烯酸、1.45%的9-十八碳烯酸、14.36%的9，12-十八碳二烯酸、3.21%的9，12，15-十八碳三烯酸。高小寧等[12]研究了山核桃青皮乙醇提取的氯仿萃取部位，鑒定得出胡桃醌、β-谷甾醇等5個(gè)化合物。

青龍衣中的胡桃醌（Juglone，5-hydroxy-1，4-naphthoquinone）為其抑制癌癥的主要成分。劉薇等[13]研究發(fā)現(xiàn)，青龍衣三氯甲烷提取物具有一定的抗腫瘤作用。陳向明[14]對(duì)山核桃青皮做了大量研究，通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)選出最佳提取溶劑和方法是：以70%乙醇為溶劑的萃取法，乙醇與青皮的料液比為10∶1，在60 ℃水浴加熱的條件下回流提取4 h，總醌提取量可達(dá)0.84%；并得出色譜柱層析法為最佳的分離方法，以硅膠為填柱材料，按硅膠材料與浸提樣液的配比為1∶3，得醌類的回收率高達(dá)88.71%，純度可達(dá)86.08%。

目前關(guān)于青龍衣研究最多，藥用價(jià)值最高的是醌類化合物及其衍生物，如α-和β-氫化胡桃醌、胡桃醌、3，3-雙胡桃醌及3，6-雙胡桃醌等；其次是黃酮類化合物，如胡桃苷、山奈酚、槲皮素、球松素、柚皮素等[15-16]。吳德玲等[17]對(duì)山核桃外蒲殼進(jìn)行研究，從中共分離鑒定出大黃素甲醚、4，8-二羥基-1-四氫萘酮、球松素等5個(gè)化合物，其中4，8-二羥基-1-四氫萘酮和大黃素甲醚是首次從該植物青皮中分離得出。青龍衣中化學(xué)成分結(jié)構(gòu)式如圖1所示。

2 藥理作用

2.1 抗菌作用

青龍衣提取物表現(xiàn)出以劑量依賴的方式具有廣譜抗菌活性，試驗(yàn)表明因菌種不同，抑菌測(cè)試反應(yīng)也不相同。20世紀(jì)90年代初，楊志等[18]就用胡桃楸內(nèi)皮水煎劑做了相應(yīng)的抑菌試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該水煎劑對(duì)水弧桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌OX10、1485均有較強(qiáng)的抗菌作用。聞平等[19]將山核桃乙醇提取物應(yīng)用到煙曲霉菌、新生隱球菌、白色念珠菌中，并與臨床上常用的抗真菌藥物進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示，其對(duì)致病性真菌具有較強(qiáng)的抑制和殺死作用，其作用強(qiáng)度與FCZ、ICZ相當(dāng)，但不如AMB和5-FC見(jiàn)效。Oliveira等[20]研究表明，青龍衣水提物對(duì)金黃色葡萄球菌以及許多革蘭陽(yáng)性菌、陰性菌均有較強(qiáng)的抑制作用。林君陽(yáng)[21]采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了青龍衣甲醇提取物4個(gè)有機(jī)萃取相的抑菌作用，結(jié)果表明，α-谷甾醇、喬松酮、5-羥基-2-甲氧基-1，4-萘醌和喬松素等8個(gè)化合物對(duì)玉米人斑病菌、水稻稻瘟病菌孢子萌發(fā)的抑制率均在90%以上。王艷梅[22]通過(guò)用青龍衣95%乙醇提取物做抑菌試驗(yàn)，結(jié)果表明，抑菌活性成分溶解在氯仿和石油醚萃取相中。在臨床方面，千學(xué)技等[23]將山核桃嫩皮與具有抑菌、清熱、收斂作用的兒茶配伍制成復(fù)方山核桃酊，治療了困擾患者近一年的頑固性陰囊濕疹，取得了令人非常滿意的效果。

2.2 抗腫瘤作用

青龍衣在民間用于抑制及治療各種癌癥已經(jīng)取得不錯(cuò)的效果。青龍衣中多種組分均表現(xiàn)出抗腫瘤的藥效作用，許多單體成分也表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗腫瘤增殖作用。從作用機(jī)理的角度看，青龍衣抗腫瘤增殖作用總是與抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、毒性作用等相聯(lián)系，而主要得益于其中的胡桃醌（5-羥基-1，4-萘醌）等成分，胡桃醌已經(jīng)成為抗腫瘤作用研究的熱點(diǎn)。許紹惠等[24-25]通過(guò)研究核桃揪青皮的有效成分，并從其中提取分離出胡桃醌及衍生物胡桃醌二聚體的3種結(jié)晶化合物，鑒定出結(jié)構(gòu)且與國(guó)際學(xué)者的報(bào)道一致。抑瘤率也稱抗癌率，是衡量一種藥物抗腫瘤作用的重要指標(biāo)之一，是篩選抗腫瘤藥物的主要依據(jù)。吳德玲等[26]從野核桃外蒲殼中分離純化出5 個(gè)單體化合物，并針對(duì)肝癌HepG2 細(xì)胞采用MTT法進(jìn)行了活性試驗(yàn)，結(jié)果表明，4，8-二羥基-1-四氫萘酮、喬松酮、大黃酚3個(gè)化合物對(duì)肝癌HepG2 細(xì)胞均有很強(qiáng)的抑制和殺傷作用，最高抑制率分別為67%、70%和69%。姜秀梅等[27]將青龍衣乙醇提取物和人乳腺癌細(xì)胞體外共同培養(yǎng)，當(dāng)藥物濃度為400 μg/mL時(shí)，抑癌率達(dá)38.4%；600 μg/mL 時(shí)，達(dá) 47.9%，試驗(yàn)表明青龍衣乙醇提取物對(duì)乳腺癌細(xì)胞有一定抑制作用。王少東等[28]用胡桃楸青果皮水提浸膏對(duì)體外肉瘤S180細(xì)胞和小鼠肝癌進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示，癌細(xì)胞的核酸代謝受到抑制，從而被殺死，其作用效果與藥物濃度和作用時(shí)間呈正相關(guān)性，是一種有前途的抗腫瘤藥物。宋華等[29]通過(guò)體外試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，核桃楸葉的乙酸乙酯提取液能抑制乳腺癌細(xì)胞（MCF7/ADR）、肺癌細(xì)胞（NCIH460）、慢性髓原白血病細(xì)胞（K562）這3種癌細(xì)胞的增殖，藥物濃度為0.5 mg/L時(shí)這3種癌細(xì)胞100%死亡，因而確定0.5 mg/L濃度為這3種細(xì)胞的最大致死劑量。

李巖等[30]利用胡桃醌對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)抑制作用及對(duì)細(xì)胞周期的影響作為研究機(jī)制，并以血清藥理學(xué)原理為基礎(chǔ)進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胡桃醌對(duì)A549的增殖具有明顯抑制作用，能將這種癌細(xì)胞復(fù)制阻滯在S期，誘導(dǎo)其凋亡。李生正等[31]應(yīng)用BSLB法[32]對(duì)青龍衣乙酸乙酯提取物進(jìn)行了相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)其提取物L(fēng)C50值為79.102 3，具有較明顯的抗癌活性。

在我國(guó)東三省地區(qū)，民間就有流傳把核桃楸青果皮當(dāng)茶飲用來(lái)治療腫瘤或是減緩癌癥帶來(lái)的疼痛。青龍衣的抗腫瘤作用在臨床上亦有許多應(yīng)用。李中原等[33]在河北省食管賁門癌高發(fā)區(qū)——涉縣，共用核桃楸樹(shù)皮對(duì)120例食管賁門癌患者進(jìn)行治療，綜合有效治療率高達(dá)53%。高奎濱在二十多年對(duì)656例臨床癌癥患者用青核桃和刺五加配伍使用的治療得出，對(duì)肺癌、胃癌、食管癌等6種癌癥有效治療率為30.46%，且無(wú)其他抗癌藥的毒副作用[34]。

2.3 鎮(zhèn)痛作用

關(guān)于青龍衣的鎮(zhèn)痛消炎作用，無(wú)機(jī)鹽（鉀鹽）可能是鎮(zhèn)痛活性之一，但鉀同時(shí)卻是一種致痛物質(zhì)，因此成為許多學(xué)者研究的焦點(diǎn)。杜旭等[35]通過(guò)原子吸收分光光度法對(duì)青龍衣中鎮(zhèn)痛活性成分進(jìn)行了分析測(cè)定，得出鉀鹽是其鎮(zhèn)痛活性成分，能提高小鼠基礎(chǔ)痛閾，減少扭體次數(shù)及熱板反應(yīng)，其作用機(jī)制與提高動(dòng)物低鈣高鉀條件下痛閾有關(guān)。又有學(xué)者對(duì)青龍衣提取分離、純化得出鉀鹽是青龍衣中主要鎮(zhèn)痛成分[36]。此外，Erdemoglu等[37]通過(guò)p-苯醌誘導(dǎo)小鼠腹部疼痛，用以青龍衣的乙醇和水提取物灌胃后根據(jù)小鼠腹部抗傷害感受不同的收縮程度得出具有鎮(zhèn)痛和抗炎活性。宛蕾等[38]通過(guò)醋酸、熱板傳導(dǎo)致小鼠疼痛后用胡桃青皮乙醇提取液灌胃，得出該青皮對(duì)化學(xué)刺激及熱傳導(dǎo)引起的小鼠疼痛有顯著的鎮(zhèn)痛效果，且隨劑量的增加，鎮(zhèn)痛效果逐漸增強(qiáng)。

2.4 其他作用

有文獻(xiàn)記載青龍衣水煎劑治療Ⅱ型糖尿病有良好的效果[39]。王宏虬等[40]通過(guò)研究胡桃楸青皮的不同提取物對(duì)馬鈴薯害蟲(chóng)的殺傷作用，表明其對(duì)蚜蟲(chóng)的觸殺效果好于對(duì)瓢蟲(chóng)的觸殺效果。何志平[41]研究發(fā)現(xiàn)，不同青龍衣提取物清除自由基能力由弱到強(qiáng)依次為80%乙醇提取物、水提取物、乙酸乙酯提取物，得出青龍衣具有良好的抗氧化功能。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，山核桃和核桃楸是我國(guó)分布最廣泛的樹(shù)種之一，青龍衣資源豐富，隨著對(duì)青龍衣的研究不斷加深，提取分離的方法不斷得到改進(jìn)，提取效率也有所提高。進(jìn)一步對(duì)青龍衣抗腫瘤成分的作用機(jī)理進(jìn)行研究，提取其活性成分，大力開(kāi)發(fā)出一種青龍衣藥物，為癌癥病人的治療尋找一種新的途徑，使青龍衣在臨床上得到更多的應(yīng)用，有一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和實(shí)際意義。這必將為胡桃屬植物的開(kāi)發(fā)提供更加廣闊的前景，實(shí)現(xiàn)青龍衣的綜合利用。

[29] 宋華，包永明，張紅梅，等.核桃楸葉提取液對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用[J].大連輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，20（2）：109-111.

[30] 李巖，趙劍璞，王燕妮，等.胡桃醌含藥血清體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究[J].北京理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，33（5）：545-550.

[31] 李生正，王云彩，蔣東風(fēng)，等.BSLB法篩選青龍衣與核桃枝抗腫瘤作用有效部位[ J] .西北藥學(xué)雜志，2006，15（3）：114.

[32] MEYER B N，F(xiàn)ERRIGNI N R，PUTNAM J E，et al.Brineshrimp：A convenient general bioassay for active plant constituents[J].Planta Med，1982，45（5）：31-34.

[33] 李中原，高奎濱.“青龍衣”治療食管賁門癌120例臨床觀察[J].中醫(yī)藥信息，1988（3）：31.

[34] 張洪娟，桑樹(shù)榮.高奎濱用青龍衣制劑治療腫瘤用藥經(jīng)驗(yàn)[J].黑龍江中醫(yī)藥，2000，3（2）：62.

[35] 杜旭，李玉文，倪雁，等.中藥青核桃鎮(zhèn)痛作用研究與展望[J].中國(guó)中藥雜志，2000，25（1）：7-10.

[36] 杜旭，王明晶.中藥青龍衣鎮(zhèn)痛作用機(jī)理的研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，1997（3）：155-156.

[37] ERDEMOGLU N，KPELI E，YESILADA E.Anti-inflammatory and antinociceptive activity assessment of plants used as remedy in Turkish folk medicine[J].Journal of ethnopharmacology，2003，89（1）：123-129.

[38] 宛蕾，陳秀芬，杜江.胡桃青皮抗炎及鎮(zhèn)痛作用的研究[J].中藥藥理與臨床，1999，15（2）：29-30.

[39] 梁慧峰.核桃楸的化學(xué)成分及利用研究進(jìn)展[J].北方園藝，2010（16）：219 -221.

[40] 王宏虬，廖福俊，李彪，等.核桃青皮提取物對(duì)馬鈴薯蚜蟲(chóng)與瓢蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（7）： 112-114.

[41] 何志平.浙江山核桃抗氧化與蛋白質(zhì)特性研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2011.