血漿Ghrelin水平與2型糖尿病的關系

胡志娟 史亞男 王利軍 劉 瓊 陳 杏

(河北省人民醫院腎內科，河北 石家莊 050051)

血漿Ghrelin水平與2型糖尿病的關系

胡志娟 史亞男 王利軍 劉 瓊 陳 杏

(河北省人民醫院腎內科，河北 石家莊 050051)

目的 觀察2型糖尿病(T2DM)及2型糖尿病腎病(DN)患者血漿Ghrelin水平，探討其與糖、脂代謝、白蛋白尿及腎功能的關系。方法 檢測30例正常對照及110例T2DM患者空腹血漿Ghrelin水平及血糖、血脂、血壓、血肌酐、24 h尿白蛋白等。結果 T2DM患者的空腹血漿Ghrelin水平明顯低于正常對照組(P<0.01)。T2DM血壓正常組、血脂正常組、體質量偏低組及體質量正常組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平分別降低29%、28%、30%及35%(P<0.01)；T2DM高血壓組、高血脂組及超重組患者空腹血漿Ghrelin水平較正常對照組降低更為明顯，分別為42%、40%及38%(P<0.01)。T2DM高血壓組、高血脂組及超重組患者較T2DM血壓正常組、血脂正常及體質量偏低和正常組患者空腹血漿Ghrelin水平有所降低，但無顯著差異(P>0.05)。T2DM正常MAU組、MAU組及明顯白蛋白尿組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平分別降低30%、33%、35%(P<0.01)；T2DM白蛋白尿且血清肌酐>1.5 mg/dl未進入腎臟替代治療組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平升高19%(P<0.05)，且較其他各組均明顯升高(P<0.01)。T2DM正常MAU組與MAU組及白蛋白尿組患者，隨白蛋白尿的增多，空腹血漿Ghrelin水平均有所降低，但三者之間無顯著差異(P>0.05)。空腹血漿Ghrelin與體重指數(BMI，r=-0.309，P<0.01)、HbA1c(r=-0.264，P<0.01)、收縮壓(r=-0.535，P<0.01)、舒張壓(r=-0.604，P<0.01)呈負相關；與血清肌酐水平呈正相關(r=0.330，P<0.01)。多元逐步線性回歸結果顯示血清肌酐(β=0.326，P=0.000 9)、BMI(β=-0.265，P<0.000 1)及HbA1c(β=-0.231，P<0.000 1)共同決定空腹血漿Ghrelin。結論 T2DM患者空腹血漿Ghrelin水平明顯低于正常對照組；T2DM伴有高血壓、高血脂、超重及白蛋白尿時空腹血漿Ghrelin水平更低；腎功能異常的T2DM患者血漿Ghrelin水平明顯升高。血清肌酐、BMI及HbA1c共同決定空腹血漿Ghrelin。

2型糖尿病；糖尿病腎病；Ghrelin；尿微量白蛋白

Ghrelin是生長激素促分泌物質受體(GHS-R)的內源性配體，它是酰化的含有28個氨基酸的多肽，最早由Kojima等〔1〕從大鼠胃黏膜細胞分離、純化而得，其受體主要在下丘腦和垂體表達，也在胃腸道、甲狀腺、胰腺、心肌和腎臟等外周組織表達〔2〕。研究顯示，Ghrelin存在于許多正常的機體組織中，除了能促進生長激素(GH)的釋放、參與機體能量代謝外，還有很多其他的生物學作用，并在人類多種疾病或病理狀態中發揮重要的作用。本研究觀察了2型糖尿病(T2DM)及2型糖尿病腎病(DN)患者血漿Ghrelin水平，探討其與糖、脂代謝、白蛋白尿及腎功能的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 30例正常對照選自河北省人民醫院健康體檢者，男15例，女15例，平均年齡(56.3±2.2)歲。既往無糖尿病或其他代謝性疾病病史，無肥胖、高血壓、心腦血管病及腎病史。110例符合1999年WHO推薦的糖尿病診斷標準的T2DM患者選自河北省人民醫院，排除泌尿系感染及其他腎臟疾病，排除原發視網膜病變。通過病史、體檢、心電圖等輔助檢查排除其他并發癥。在1個月內未發生糖尿病酮癥酸中毒，近期未使用對腎臟有損害的藥物。糖尿病患者均未進入腎臟替代治療。

1.2 觀察項目及方法 測量血壓、身高、體重，并計算體重指數(BMI)，將T2DM患者按照1997年WHO肥胖的診斷標準分為體質量偏低組(BMI<18.5 kg/m2)，正常組(18.5 kg/m2≤BMI<24.9 kg/m2)及超重組(BMI>25 kg/m2)；甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、血清肌酐(Scr)的測定在Beckman全自動生化分析儀上完成；空腹血漿葡萄糖(FPG)的測定采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法，上海生物制品研究所提供試劑；24 h尿微量白蛋白(MAU)測定采用酶聯免疫吸附法(ELISA)，上海生物制品研究所提供試劑，根據24 h MAU將T2DM患者分為4組：1組，正常MAU組(MAU<30 mg/d)；2組，MAU組(MAU 30～300 mg/d)；3組，明顯白蛋白尿組(MAU>300 mg/d)；4組，MAU>300 mg/d且血清肌酐>1.5 mg/dl未進入腎臟替代治療者；糖化血紅蛋白(HbA1c)的測定采用高效液性色譜法，在ADAMS HA-8160全自動糖化血紅蛋白分析儀上完成；血漿Ghrelin測定用放射免疫法(RIA)，由美國Phoenix Pharm提供藥盒統一測定，批內變異<5%。取受試者靜脈血，空腹靜脈血均為禁食12 h后清晨8：00采血，EDTA及抑肽酶抗凝，分離血漿-70℃凍存。

1.3 統計學方法 采用SPSS14.0統計軟件進行t檢驗，χ2檢驗。多組間差異比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗；兩因素相關性分析采用直線相關分析；應用多元逐步回歸模型預測一個因變量和多個自變量之間的依存關系。

2 結 果

2.1 正常對照組和T2DM組觀察指標比較 T2DM組BMI、收縮壓、舒張壓、TC、TG、FPG、HbA1c、Scr、24 h MAU水平均明顯高于正常對照組(P<0.01)；T2DM組空腹血漿Ghrelin水平明顯低于正常對照組(P<0.01)。見表1。

表1 正常對照組和T2DM組基線數據的比較±s)

2.2 T2DM高血壓組及血壓正常組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較 將T2DM患者按照有無高血壓分為血壓正常組及高血壓組。與正常對照組比較，T2DM血壓正常組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低29%(P<0.01)；T2DM高血壓組患者空腹血漿Ghrelin水平降低更為明顯，為42%(P<0.01)。T2DM高血壓組患者較T2DM血壓正常組患者空腹血漿Ghrelin水平有所降低，但無顯著差異(P>0.05)。見表2。

表2 T2DM高血壓組及血壓正常組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較

與正常對照組比較:1)P<0.01；與T2DM血壓正常組比較:2)P<0.01

2.3 T2DM高血脂組及血脂正常組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較 將T2DM患者按照有無高脂血癥(TC>5.2 mmol/L，TG>1.7 mmol/L)分為血脂正常組及高血脂組。與正常對照組比較，T2DM血脂正常組患者空腹血漿Ghrelin水平降低28%(P<0.01)；T2DM高血脂組患者空腹血漿Ghrelin水平降低更為明顯，為40%(P<0.01)。T2DM高血脂組患者較T2DM血脂正常組患者空腹血漿Ghrelin水平有所降低，但無顯著差異(P>0.05)。見表3。

表3 T2DM高血脂組及血脂正常組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較

與正常對照組比較:1)P<0.01；與T2DM血脂正常組比較：2)P<0.01

2.4 T2DM超重組、體質量正常組及體質量偏低組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較 與正常對照組比較，T2DM體質量偏低組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低30%(P<0.05)；T2DM體質量正常組較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低35%(P<0.01)；T2DM超重組較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低38%(P<0.01)；T2DM超重組較T2DM體質量正常組及偏低組空腹血漿Ghrelin水平有所降低，但三者之間無顯著差異(P>0.05)。見表4。

表4 T2DM不同體重組與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較

與正常對照組比較：1)P<0.05,2)P<0.01

2.5 T2DM不同白蛋白尿水平與正常對照組空腹血漿Ghrelin比較 與正常對照組〔(108.12±38.35)pg/ml〕比較，1組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低30%〔(78.33±41.13)pg/ml,P<0.01〕；2組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低33%〔(72.43±37.54)pg/ml,P<0.01〕；3組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平降低35%〔(69.96±42.21)pg/ml,P<0.01〕；4組患者較正常對照組空腹血漿Ghrelin水平升高19%〔(132.76±43.08)pg/ml,P<0.05〕。1組與2組及3組患者，隨白蛋白尿的增多，空腹血漿Ghrelin水平均有所降低，但三者之間無顯著差異(P>0.05)。4組患者的空腹血清Ghrelin水平較1～3組均明顯升高(P<0.01)。

2.6 空腹血漿Ghrelin與T2DM代謝指標的相關性分析 空腹血漿Ghrelin與BMI(r=-0.309，P<0.01)、HbA1c(r=-0.264，P<0.01)、收縮壓(r=-0.535，P<0.01)、舒張壓(r=-0.604，P<0.01)呈負相關；與Scr水平呈正相關(r=0.330，P<0.01)。與年齡(r=0.112)、性別(r=0.107)、病程(r=0.115)、TC(r=0.105)、TG(r=0.106)、FPG(r=0.115)均無顯著相關性(均P>0.05)。

2.7 多元逐步回歸分析T2DM患者空腹血漿Ghrelin與代謝指標的相關性 以空腹血漿Ghrelin為因變量，年齡、性別、BMI、血壓、血脂、FPG、HbA1c、MAU為自變量進行多元逐步線性回歸，結果顯示Scr(β=0.326，P=0.000 9)、BMI(β=-0.265，P<0.000 1)及HbA1c(β=-0.231，P<0.000 1)共同決定空腹血漿Ghrelin。

3 討 論

T2DM是多因素引起的代謝性疾病，肥胖是T2DM的重要危險因子。Ghrelin是胃腸道分泌的一種小分子活性肽，在能量代謝中發揮重要作用，與胰島素分泌有密切關系，在糖尿病及其并發癥的發病機制中可能起一定的作用。本研究表明，T2DM患者的BMI、收縮壓、舒張壓、TC、TG、FPG、HbA1c、Scr 、24 h MAU水平均明顯高于正常對照組；T2DM患者的空腹血漿Ghrelin水平明顯低于正常對照組。這與Poykko等〔3〕的研究發現一致。高血壓是糖尿病心腦血管并發癥的主要原因。有研究表明，Ghrelin有保護內皮細胞功能的作用。Ghrelin受體在人動脈粥樣硬化的冠狀動脈表達上調〔4〕，并且通過非生長激素依賴的機制，發揮改善血管內皮功能的作用〔5〕。人和動物實驗證實，皮下或靜脈注射Ghrelin能劑量依賴的降低平均動脈壓〔6〕。Poykko等〔7〕報道 519例中年高血壓患者饑餓時血漿中Ghrelin的濃度降低，其水平與收縮壓及舒張壓呈負相關。肥胖是T2DM患者心腦血管并發癥的獨立危險因素，有研究表明，在健康受試者及伴有和不伴有并發癥的T2DM患者中，血漿Ghrelin濃度與BMI負相關〔8，9〕。DN與腎小球硬化為基本病理特征的病變，發病機制復雜，目前未完全闡明。Kuloglu等〔10〕用免疫組織化學的方法，觀察了Ghrelin在鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠腎臟的表達。將Wistar大鼠按時間點(2、4、6 w)處死后觀察，結果發現正常對照組中Ghrelin在遠曲小管表達，隨時間延長表達無差別；在糖尿病大鼠中，Ghrelin在遠曲小管及集合管均有表達，且隨時間延長，表達強度增加，提示Ghrelin在DN發生的病理生理機制中可能起一定作用。Yoshimoto等〔11〕報道，血漿Ghrelin水平在輕至重度慢性腎衰竭的患者的血清肌酐呈正相關，與肌酐清除率呈負相關。在終末期腎臟病患者，一次血液透析可以使血漿Ghrelin水平下降50%。本文結果提示Ghrelin在能量代謝方面發揮重要作用，并且與胰島素之間的相互調節和對胰島素抵抗的影響也有不容忽視的作用。Ghrelin的基因突變也直接和間接地參與了糖尿病的發生發展。

1 Kojima M，Hosoda H，Date Y，etal.Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach〔J〕.Nature，1999；402(6762)：656-60.

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3 Poykko S，Ukkola O，Kauma H，etal.Ghrelin Arg51Gln mutation is a risk factor for type 2 diabetes and hypertension in a random sample of middle-aged subjects〔J〕.Diabetologia，2003；46(4)：455-8.

4 Katugampola SD，Pallikaros Z，Davenport AP.〔125I-His(9)〕-Ghrelin，a novel radioligand for localizing GHS orphan receptors in human and rat tissue：up-regulation of receptors with atherosclerosis〔J〕.Br J Pharmacol，2001；134(1)：143-9.

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6 Nagaya N，Kojima M，Uematsu M，etal.Hemodynamic and hormonal effects of human ghrelin in healthy volunteers〔J〕.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2001；280(5)：R1483-7.

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10 Kuloglu T，Dabak DO.Determination of ghrelin immunoreactivity in kidney tissues of diabetic rats〔J〕.Ren Fail，2009；31(7)：562-6.

11 Yoshimoto A，Mori K，Sugawara A，etal.Plasma ghrelin and desacyl ghrelin concentrations in renal failure〔J〕.J Am Soc Nephrol，2002；13(11)：2748-52.

〔2016-01-30修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

河北省引進留學人員資助項目(2016年)

胡志娟(1972-)，女，副主任醫師，博士，碩士生導師，主要從事腎臟疾病的診斷和治療研究。

R587.1

A

1005-9202(2017)13-3195-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.13.031