王 仲,賴鐘雄,金琦芳,郭玉瓊,常笑君
(1.賀州學院 食品與生物工程學院,廣西 賀州 542899;2.福建農林大學 園藝植物生物工程研究所,福建 福州 350002)
茶樹錳超氧化物歧化酶基因CsMSD克隆及其表達分析
王 仲1,賴鐘雄2,金琦芳1,郭玉瓊2,常笑君2
(1.賀州學院 食品與生物工程學院,廣西 賀州 542899;2.福建農林大學 園藝植物生物工程研究所,福建 福州 350002)
為了解茶樹CsMSD在干旱脅迫下的表達規律,采用RT-PCR和RACE技術,對茶樹干旱脅迫響應相關重要基因錳超氧化物歧化酶基因CsMSD進行克隆和生物信息學分析,并采用實時熒光定量PCR技術,對其在不同程度干旱脅迫下的表達規律進行分析。結果顯示,茶樹CsMSD核苷酸序列全長1013bp,開放閱讀框長693bp,共編碼230個氨基酸;CsMSD蛋白分子量為25.47kD,理論等電點pI=6.38,存在9個磷酸化位點,亞細胞定位于線粒體中,且蛋白質序列中具有MSD特征結構域;qPCR分析干旱脅迫下茶樹葉片中CsMSD的表達變化情況發現,CsMSD在干旱脅迫下的相對表達量與對照組相比顯著上調。研究認為鐵觀音茶樹CsMSD在應對干旱脅迫中發揮著重要的作用。
鐵觀音茶樹;CsMSD;基因克隆;干旱脅迫;qPCR
植物體內超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一類與清除活性氧有關的金屬酶,對保護細胞免受氧化損傷具有十分重要的作用,是植物防御系統中第一個清除活性氧的關鍵酶[1]。1969年,McCord等[2]首次發現了SOD在生物體內能夠歧化超氧陰離子。植物中SOD依據活性中心金屬輔因子不同主要有三類:CuZnSOD、FeSOD和MnSOD[3]。不同類型SOD在植物細胞中的亞細胞定位不同,MnSOD可能存在于線粒體和過氧化物酶體中?!?br>