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綜合干預對D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌自由基和激素代謝影響的研究

2017-07-18 11:20:44劉豐彬
大連大學學報 2017年3期
關鍵詞:血清

劉豐彬

(大連大學 體育學院,遼寧 大連 116622)

綜合干預對D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌自由基和激素代謝影響的研究

劉豐彬

(大連大學 體育學院,遼寧 大連 116622)

討論負重跑的運動訓練和補充大豆多肽的營養干預對D-半乳糖衰老大鼠的骨骼肌組織激素代謝和自由基代謝的影響。56只健康雄性SD大鼠隨機分為7組:對照組,模型組,小負重跑組,大負重跑組,補肽組,補肽小負重跑組,補肽大負重跑組。造模過程中每天觀察各組大鼠外觀體征的變化。6周后處死大鼠,測試血清以及骨骼肌組織各項指標。所有造模組大鼠均出現不同程度的衰老外觀體征,負重跑訓練和補肽可以在一定程度上緩解這種現象;與對照組實驗結果相比,模型組大鼠的骨骼肌MDA含量、SOD活性、脂褐素含量都明顯地升高,SOD/MDA有降低的趨勢,但沒有顯著性差異,負重跑訓練或補肽除了可以進一步提高骨骼肌SOD活性外,均可顯著性地逆轉其他的趨勢,并且效果更為顯著多為小負重跑組,同時在以上情況下,兩種手段均具有顯著的交互作用;與成年組相比,模型組大鼠血清的T和GH含量、T/C比值顯著性降低,血清C含量顯著性升高,血清IGF-I含量有下降的趨勢,但無顯著性差異,負重跑訓練或補肽均可以有效的反轉上述的趨勢,多數以小負重跑訓練組的干預效果更為明顯,并且兩種干預手段交互作用明顯。負重跑的運動訓練或補充大豆多肽的營養干預均可以顯著改善D-半乳糖衰老大鼠的骨骼肌組織中激素代謝紊亂和自由基代謝紊亂的狀況,以小負重跑訓練組的效果最好,兩種干預手段疊加使用有更顯著的效果。

骨骼肌;大豆多肽;負重跑訓練;自由基;激素;衰老

0 引言

隨著經濟的發展和醫學科學水平的提高,人口的老齡化已經成為我國一個新的突出的社會問題。截至2015年底,我國60歲及以上老年人口2.22億人,占總人口16.1%,其中65歲及以上人口1.44億人,占總人口10.5%。面對這樣一個巨大的數字,衰老和抗衰老的研究已經受到社會普遍的關注。眾所周知,骨骼肌是人體進行體育運動最重要的器官,而且研究顯示,骨骼肌也是人體最早出現衰老的機體組織之一。[1,2]目前,針對骨骼肌衰老領域的研究已經成為國內外體育科研工作者、專家和學者關注的重點內容之一。

本文采用了衰老基礎醫學研究中常采用的 D-半乳糖經經皮下注射的方法,來建立大鼠骨骼肌衰老的亞急性模型,并在衰老形成的過程中,選擇負重跑運動訓練干預和補充大豆多肽營養干預兩種方法,結合對大鼠的外部表現、自由基代謝和激素代謝等相關指標變化的觀察,分析運動和營養對骨骼肌衰老發生過程中出現過早的干預效果,接下來探討其中可能的機制,為今后研發出更加科學和合理營養補充物,以及提出更有針對性的運動方式來對應對老年人骨骼肌的衰老進程,進行必要的實驗嘗試,并開辟一條有益的途徑和方法。

1 研究方法

1.1 實驗分組

Sprague Dawley雄性大鼠56只,體重平均300 g左右,清潔級,3月齡,河北醫科大學動物實驗中心提供。所有大鼠購回后要適應性飼養一周,并統一編號和稱重,隨機分 7組:對照組(C):大鼠常規飼養六周,并且維持日常活動;模型組(M):大鼠皮下注射 D-半乳糖造模六周,維持日常活動;小負重跑組(S):造模和生理鹽水灌胃六周,進行小負重的跑臺運動訓練;大負重跑組(B):造模和生理鹽水灌胃六周,進行大負重的跑臺運動訓練;補肽組(P):造模和生理鹽水灌胃六周,維持日常活動;補肽+小負重跑組(PS):造模和大豆多肽灌胃六周,進行小負重的跑臺運動訓練;補肽+大負重跑組(PB):造模和大豆多肽灌胃六周,進行大負重的跑臺運動訓練

1.2 實驗處理

依據國內成熟的方法進行了 D-半乳糖衰老骨骼肌亞急性模型的復制[3],其中 D-半乳糖(5%,200 mg/kg/d)進行了大鼠后頸背部的皮下注射,每日 1次,連續六周。

跑臺負重跑運動訓練方案參考Bedford等[4]和劉豐彬[5]的方法,跑速15 m/min,坡度0°,跑和休息各2 min交替進行為1組,每天6組連續進行,周日休息,共進行六周。根據之前預實驗的測試結果,大鼠最大負重的30%和70%作為小負重和大負重的標準。

灌胃的大豆多肽主要包括五肽、六肽和八肽,分子量在200~600 D之間,總蛋白含量超過90%,純度超過80%。每次負重訓練后的30分鐘以內,所有補肽組大鼠灌胃大豆多肽溶液(15%,0.15 g/100g),每天1次,連續進行6周,所有負重跑訓練組大鼠灌胃等量的生理鹽水溶液[6]。

1.3 動物取材

實驗進行到6周結束后,所有大鼠斷食12小時后開始取材。戊巴比妥鈉麻醉(1%,50 mg/kg),取血并分離血清,-30℃保存待測生物化學指標。取少量大鼠腓腸肌組織,按照1:9(W/V)加入4℃生理鹽水中,-30℃保存勻漿上清液,待測骨骼肌生化指標。

1.4 測試指標

1.4.1 大鼠外觀體征

每日觀察各組大鼠體毛、精神狀態和活動等一般情況。

1.4.2 大鼠骨骼肌組織的勻漿指標

超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定,采用黃嘌呤氧化酶法;丙二醛(MDA)含量的測定,采用硫代巴比妥酸法;脂褐素(Lipofuscin)含量的測定,采用物理熒光比色法。

1.4.3 大鼠血清指標

睪酮(T)、皮質醇(C)和生長激素(GH)均采取液相平衡競爭的放射免疫分析法(RIA)測試;胰島素樣生長因子-1(IGF-I)采用酶聯免疫(ELISA)的方法測試。

1.5 統計分析

數據采用平均值±標準差表示。用SPSS 13軟件進行數據分析處理。單一因素如方差齊,采用單因素方差分析,顯著性差異用 S-N-K的方法進行比較,如方差不齊,采用秩和檢驗或自然對數轉換。多個研究因素對主效應和交互作用的影響,采用雙因素方差分析。P<0.05和P<0.01確定差異為顯著性和非常顯著性水平。

2 結果

2.1 大鼠外觀體征觀察

實驗前所有大鼠反應、毛發、飲食、飲水和活動均正常。在造模過程中,C組大鼠的狀態良好,毛色發亮并且有光澤。隨著造模時間的增加,除C組外,其他各組大鼠均出現了不同程度的衰老表現,比如反應遲緩,行動緩鈍,體毛發黃、干枯和無光澤等。M組大鼠背部和兩頰部均出現了不同程度的掉毛現象,尾部部分有色素和斑點的沉著。PS組和S組的大鼠每次干預后能維持正常活動,疲勞感小,還有部分大鼠還能夠站立張望。PB組和B組的大鼠在每次干預后均出現懶動、俯臥和疲勞的現象,但第二天再次訓練時能恢復正常表現。

2.2 丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的比較

如表1、2所示:和C組相比較,M組大鼠的骨骼肌組織丙二醛(MDA)的含量顯著性上升(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)的活性顯著性升高(P<0.05),SOD/MDA比值表現為下降的趨勢,但無統計學差異(P>0.05)。

經過雙因素的方差分析,補肽或負重跑訓練都可以導致 D-半乳糖衰老大鼠的骨骼肌組織的SOD/MDA比值和SOD的活性顯著性升高(P<0.01和P<0.05),以P組的表現最為顯著,MDA的含量雖然表現出下降的趨勢,但無統計學差異(P>0.05);負重跑訓練疊加補肽使 D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌組織的 SOD/MDA比值和 SOD的活性顯著性升高(P<0.01),以PB組的表現最為顯著,而MDA的含量顯著性降低(P<0.05),但以PS組的表現最為顯著,兩者交互作用明顯。

表1 大鼠骨骼肌組織MDA含量、SOD活性及SOD/MDA比值的比較(n=8)

表2 大鼠骨骼肌組織MDA含量、SOD活性及SOD/MDA比值雙因素的方差分析

2.3 脂褐素含量的比較

如表3、4所示:和C組相比較,M組大鼠的骨骼肌組織脂褐素(Lipofuscin)的含量顯著性升高(P<0.01)。

表3 大鼠骨骼肌組織的脂褐素含量比較(n=8)

表4 大鼠骨骼肌組織的脂褐素含量的雙因素方差分析

經過雙因素的方差分析,負重跑的運動干預可以使 D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌組織 Lipofuscin的含量出現下降的趨勢,但無統計學差異(P>0.05),補肽可以使Lipofuscin的含量出現顯著性下降(P<0.05),以P組的表現最為顯著,負重跑訓練疊加補肽可以使D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌組織的 Lipofuscin含量出現進一步的下降(P<0.05),以PS組的表現最為顯著,兩者交互作用顯著。

2.4 睪酮和皮質醇含量的比較

如表5、6所示:和C組相比較,M組大鼠的血清中睪酮(T)含量和T/C比值顯著性降低(P<0.01),而皮質醇(C)含量顯著性升高(P<0.01)。

表5 大鼠血清的C含量、T含量及T/C比值的變化(n=8)

表6 大鼠血清的C含量、T含量及T/C比值的雙因素方差分析

經過雙因素的方差分析,補肽或負重跑訓練都可以使D-半乳糖衰老大鼠血清的T含量和T/C比值出現顯著性升高(P<0.01),C含量顯著性降低(P<0.05),以S組的表現最為顯著;負重跑訓練疊加補肽使D-半乳糖衰老大鼠血清的T含量和T/C比值都可以進一步升高(P<0.01),C 含量則進一步降低(P<0.05),以PS組的表現最為顯著,兩者交互作用明顯。

2.5 生長激素含量和胰島素樣生長因子-1含量的比較

如表7、8所示:和C組比較,M組大鼠血清胰島素樣生長因子-1(IGF-I)含量表現出降低的趨勢,但無統計學差異(P>0.05),而M組大鼠血清的生長激素(GH)含量則表現出顯著性降低(P<0.01)。

表7 大鼠血清的IGF-I含量和GH含量的比較(n=8)

表8 大鼠血清的IGF-1含量和GH含量的雙因素方差分析

經過雙因素的方差分析,補肽或負重跑訓練都可以使D-半乳糖衰老大鼠血清的IGF-I含量和GH含量表現出顯著性升高(P<0.01,P<0.05),以 S組的表現最為顯著;負重跑訓練疊加補肽能使 D-半乳糖衰老大鼠血清的IGF-I含量和GH含量表現出進一步升高(P<0.01,P<0.05),以PS組的表現最為顯著,兩者交互作用顯著。

3 討論與分析

從我國古代煉丹術和長生不老藥到現代醫學的抗衰老手段與藥物,各國科學家都在不斷地探索攻克衰老這個國際性醫學難題的方法和手段[7,8]。運動和營養干預在人體退行性變化和與衰老有關疾病的發生、發展中發揮作用也越來越受到重視。如何通過運動和營養這兩種相對安全的方法,對人體機能退行性改變重要表現之一骨骼肌的衰老進行相應干預,并探討其可能的機制,值得深入研究。

目前,體育科學領域普遍認同的觀點,老年人的骨骼肌本身具有良好的可訓練性,進行科學和合理的力量訓練,尤其是適宜的抗阻力訓練能夠有效改善老年人力量素質,從而提高和改善老年人的健康水平。但目前,多數相關研究只是停留在定性層面,指標也較為單一,缺乏定量指標和作用機理的綜合研究[9-11]。因此,本研究借鑒本課題組以往的研究經驗[5,13],采取大鼠負重跑模型模擬人體抗阻力訓練,根據相關的訓練參數和訓練原則,最終確定了本研究的大鼠運動訓練方案。

國內外很多研究表明,補充大豆多肽可以顯著的提高骨骼肌的力量和質量,并且還具有提高機體運動能力和加速疲勞恢復的效果,但多數的研究對象是運動員,缺少針對普通人群,特別是缺少針對營養狀況普遍欠佳的中老人的研究。從不同的角度入手,采用較長的干預時間,選取大豆多肽作為營養補劑,觀察其對骨骼肌衰老的作用和影響效果,并探討其可能的作用機制,國內外目前還沒有見到相關研究的報道[14-16]。因此,本研究在參考之前預實驗和營養實驗一般原則的基礎上,確定了本研究的營養干預方案。

衰老是在生物體成年后出現的一系列漸進性、多器官系統、多功能的退行性改變。所以,動物在衰老的過程中也會在外觀特征上發生一系列的變化。本研究發現:大鼠在注射D-半乳糖以后,從第3周開始,M 組的大鼠開始出現體毛發黃、脫毛、失去光澤的現象,同時皮毛的彈性也在下降;接下來,大鼠出現行動緩慢、發懶、精神萎靡不振、尾部色素附著等現象,并且隨著時間延長而加重,這與以往的研究結果相一致[3,17]。負重跑訓練組和補肽組的大鼠,雖然也注射等劑量的D-半乳糖,但是大鼠多數在D-半乳糖造模第4周或第5周后才開始出現輕微的脫毛現象,并且多數大鼠精神狀態不錯,脫毛程度不明顯,與之前相比日常行為的改變也不十分明顯。由此得知:兩種干預方式可以有效改善 D-半乳糖衰老大鼠因衰老而導致的行為和外觀上的退行性變化,對于大鼠衰老現象過早的出現有積極的預防作用。

上世紀中葉,歐美的科學家提出了衰老的自由基學說,國內外許多科學家都將研究的重點放到了研究衰老、自由基的產生和細胞代謝之間的聯系方面。很多的研究已經證實,生物體細胞膜內的脂肪酸過氧化和代謝垃圾自由基的產生是最終導致細胞受到破壞、機體出現衰老以及一系列相關慢性退行性疾病出現的重要原因之一[18,19]。而對生物體內最重要的抗氧化酶類之一超氧化物歧化酶(SOD)的活性,機體氧化代謝產物丙二醛(MDA)和脂褐素的含量和水平,經常用來直接評價機體氧化應激程度、自由基代謝水平和衰老程度的有效標志物[20,21]。

本研究結果顯示,和C組相比,M組的大鼠骨骼肌組織的SOD活性、MDA和脂褐素的含量顯著性升高,SOD/MDA比值下降但不明顯。提示:隨著研究時間的增加,大鼠體內自由基含量不斷增多,而其清除能力在不斷下降,機體出現一系列的氧化應激反應,引發大鼠衰老程度加深。但機體產生的過多氧自由基反而客觀上刺激了骨骼肌組織內的抗氧化防御系統,引起SOD活性的提高,國內外的相關研究報道也證實了該結果[19,22]。其機理可能為:大量自由基的過量刺激可能激活了抗氧化酶的基因表達,或者骨骼肌細胞中的巰基儲備量減少也會導致SOD活性的升高。

造模6周的過程中,運動干預組大鼠的骨骼肌組織SOD活性和SOD/MDA比值與M組相比顯著性升高,MDA和脂褐素的含量顯著性降低。并且以小負重組的作用效果更為明顯。P組也出現了相似的趨勢,這些與以往的一些研究基本一致[20,21]。除此之外,本研究發現,負重跑疊加補肽比單獨一種方法更能夠顯著提高大鼠機體內自由基的清除能力和抗氧化酶的活性。其中的機理可能是:負重跑這種運動干預可以有效提高大鼠的物質和能量代謝的能力,推遲了 D-半乳糖注射造成的代謝紊亂情況,客觀上提高了大鼠機體內清理自由基的能力,進而減慢了機體內氧化應激的程度;同時,活性肽的補充也可以有效調節大鼠機體的能量代謝。并且,兩種運動和營養干預方法的疊加使用能夠有效地增強 D-半乳糖衰老大鼠對抗自由基的能力。

相關文獻表明,伴隨著年齡的增加,有機體的激素代謝水平也會隨之發生相應變化:胰島素樣生長因子(IGFs),生長激素(GH)和睪酮(T)等的含量會下降,皮質醇(C)等的含量會上升[23,24]。在體育科研實踐過程中,通常采用測試血清T/C、T和C和來反映機體激素代謝水平的狀況。

本研究的結果表明,和C組相比較,M組的大鼠血清中 T含量顯著地下降,此結果與以往相關國內外文獻報道基本一致[24,25]。提示:伴隨大鼠衰老程度的加深,大鼠機體內分泌調節系統出現紊亂情況,導致激素代謝和調節能力降低,引起促進合成代謝的激素——T的分泌水平出現下降,可能的機制是:分泌控制軸——下丘腦-垂體-促性腺激素的分泌功能隨著年齡的增加而衰減,睪丸本身也出現了細胞衰老的表現,尤其是Leydig細胞分泌開始減少,導致T的含量減少;同時,睪丸的血供隨年齡的增加而減少,其中的曲精小管也發生了衰老性改變,間質細胞功能減退,從而導致分泌的 T的數量和質量下降。與 C組相比較,造模組大鼠的血清 C含量顯著性上升,血清T的含量顯著性降低,使T/C的比值出現顯著性下降。這好像與之前的有些文獻報道相矛盾。[26,27]其中可能的機制有:造模的過程中,大鼠體內物質代謝出現紊亂,間接影響了下丘腦-垂體-腎上腺內分泌軸(HPA)和下丘腦上級的大腦組織尤其是海馬組織的分泌和調節功能,使有大鼠機體處于長期和慢性的氧化應激狀態,HPA軸的調節功能持續性增強,最終出現大鼠血清C的含量增加。

進行 6周的負重跑訓練或補肽能夠顯著地提高D-半乳糖衰老大鼠的血清T含量,降低血清C的含量,進而使T/C的比值提高,并以小負重跑組的效果更加顯著。提示:長時間的補肽和負重跑訓練和補肽都能夠顯著性地改善 D-半乳糖衰老大鼠的內分泌系統紊亂的狀況,特別是可以有效地改善在機體物質代謝和能量代謝過程中發揮重要作用的C和T的分泌狀況,負重跑訓練疊加補肽比單獨采用一種干預方法改善內分泌紊亂的效果更加顯著。其中機理可能是:作為一種對骨骼肌有效的應激,負重跑訓練是一種外在的機械性刺激,它可以改善下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸等神經調節通路的中樞調控作用,并且能夠有效地改善骨骼肌組織的新陳代謝水平,并與有關的激素調節系統形成正向反饋作用,顯著性地糾正了衰老大鼠機體內分泌紊亂的情況;而大豆多肽這樣的優質植物蛋白質的補充,可以有效地糾正大鼠機體內蛋白質的負平衡狀況,從而改善了大鼠骨骼肌組織中蛋白質的合成代謝能力。因此,兩種運動和營養干預手段的疊加使用可以更加顯著性地改善 D-半乳糖衰老大鼠的血清C和T的含量和水平。

作為一種有機體內重要的促進合成代謝的激素,GH對機體組織發揮生理作用主要是依靠IGF-I進行介導并完成的。相關文獻資料顯示,生物體年齡的增加對GH的分泌會產生消極的作用,而IGF-I代謝和含量水平的降低與機體的衰老程度密切相關。所以,血清中IGF-I含量和水平的變化常作為評價機體衰老的重要參考指標之一[26,28]。

本研究的結果表明,和C組相比較,M組的大鼠血清IGF-I和GH含量均顯著性地下降,這與國內外的大多數文獻報道的結果基本一致[26-28]。提示:隨著大鼠衰老程度的加深,機體內激素代謝和物質代謝出現紊亂的狀況,引發GH的分泌量降低,從而導致與其關系密切的IGF-I的分泌量也隨之降低。其可能的機制是:隨著年齡的增加,會導致 GH—IGF-I和生長激素釋放激素—生長抑素兩個激素調節軸的功能下降,生長激素結合蛋白的水平和周邊組織中生長激素的受體含量及活性緊接著出現降低,間接地引起胰島素樣生長因子的結合蛋白含量和活性也出現下降;同時,機體衰老還會引起分泌IGF-I的主要器官,如骨骼肌、肝、腎等的功能出現減退,胰島素和甲狀腺激素等激素的正向調節能力隨之下降。

和M組的大鼠相比較,S組和B組大鼠的血清GH和IGF-I的水平均顯著性地升高,P組也出現了相同的升高趨勢。負重跑這種運動訓練的干預疊加補肽的這種營養干預的方法比使用單一干預方法更可以顯著性地改善 D-半乳糖的衰老大鼠機體GH—IGF-I軸的主動調節功能。其可能的機制是:對大鼠骨骼肌組織刺激量較大的負重跑訓練,可以有效地改善因為機體衰老導致的生長激素釋放激素——生長抑素和 GH—IGF-I兩個激素調節軸功能下降的情況,并且提高和改善了生長激素釋放激素的分泌狀況,并促進了GH分泌的積極性調節,導致血清GH的含量和水平得到提高和改善。并且,這種運動干預可以使IGF-I的結合蛋白及其受體的含量和活性得以提高,輔助于類似于GH等激素的正向調節作用,最終使血清IGF-I的含量和水平也得到了相應提高和增強。而大豆多肽的營養補充,不僅可以提高IGF-I受體和胰島素樣生長因子結合蛋白的活性和含量,還會對IGF-I的自分泌、旁分泌和內分泌產生積極和有效地促進作用,最終使血清IGF-I的水平得以提高。但是,營養干預對IGF-I和GH分泌水平及其激素調節軸的影響作用不及負重跑訓練,從而表現出補肽組的效果不及負重跑組。同時,兩種運動和營養兩種干預手段的疊加使用可以更加顯著性地改善 D-半乳糖的衰老大鼠血清IGF-I和GH的含量和水平。

4 結論

采用本研究的實驗方法,進行長達6周D-半乳糖的注射,可以成功地復制大鼠的亞急性骨骼肌衰老模型。在造模同時,進行大豆多肽的營養補充或負重跑的運動訓練干預,均能夠顯著性地改善大鼠骨骼肌組織中自由基代謝和激素代謝紊亂的情況,并以小負重跑運動訓練的效果最好,兩種干預手段疊加使用的效果更為顯著。其中可能的作用機制是:骨骼肌組織的氧化應激程度得以減輕,機體自由基的生成得以減少,激素代謝和相關因子代謝水平的紊亂狀況得以糾正等。

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The Study of the Effect in Free Radical and Hormone Metabolism of Aging Rat Skeletal Muscle by Weight Training and Soy Polypeptide Supplement

LIU Feng-bin
(College of Physical Education, Dalian University, Dalian 116622, China)

To study of the effect in free radical and hormone metabolism of aging rat skeletal muscle by weight training and soy polypeptide supplement. 56 male SD rats were divided into 7 groups randomly: Control, Model,small load running, big load running, peptide, peptide-small load running, and peptide-big load running. Observed changes of rats‘ appearance in the experiment process every day. The rats were killed after 6 weeks, tested serum, as well as indicators of skeletal muscle. All the model rats showed up the aging appearances in different extent, weight training and soy polypeptide supplement could mitigate this phenomenon in some extent; Compared with Group C,the content of SOD, MDA and Lipofuscin in skeletal muscle of Group M were higher, however, the ratio of SOD/MDA was in decrease tendency and had no difference statistically, load running or the supplement of soy polypeptide could make the SOD in skeletal muscle in a further increase and reverse others tendency, the Group S had much more obvious appearance in most cases, moreover, the above two interventions have significant interaction;Compared with group C, the serum T, GH and T/C in group M were lower, C were higher, but the IGF-I of serum was in a decrease tendency and had no statistical difference, load running or the supplement of soy polypeptide could delay this tendency, group S had much more obvious appearance in all, and the above two interventions have significant interaction. Load running or soy polypeptide supplement can improve the indiscriminate condition in free radical and hormone metabolism in skeletal muscle of aging rats effectively, the running of small load has even the best result, the way combined two interventions together can have much more obvious effects.

load running; soy polypeptide; skeletal muscle; free radical; hormone; aging

R87

A

1008-2395(2017)03-0075-07

2017-04-12

大連市科技局科技計劃項目(2010E15SF165);大連大學博士科研基金項目(0302294)。

劉豐彬(1981-),男,副教授,博士,研究方向:體育健康促進的理論與應用。

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