落新婦組培快繁技術研究

詹佳++鮑躍群++唐飛++鄔梟楠

摘要 以落新婦種子作為外植體進行組培快繁，結果表明：以嫩葉形成愈傷組織誘導芽的方式，實現叢生芽的再生。適宜誘導分化的培養基為MS+6-BA 0.5 mg/L+ 2，4-D 0.1 mg/L，最適增殖的培養基MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，形成的植株轉接到1/2MS+NAA 0.5 mg/L，生根率達90%以上。

關鍵詞 落新婦；組織培養；快繁技術

中圖分類號 S567.23 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2016）16-0063-02

Abstract Taking Astilbe chinensis seeds as explants in tissue culture and rapid propagation，the results showed that the leaves formed callus induction of bud and adventitious bud regeneration.MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L were the most suitable medium for inducing differentiation，the most suitable medium for MS+BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，the plant was transferred to 1/2MS+NAA0.5mg/L，and the rooting rate reached more than 90%.

Key words Astilbe chinensis；tissue culture；rapid propagation

落新婦（Astilbe chinensis），又名紅升麻、虎麻、金貓兒、金毛等，為落新婦科落新婦屬多年生宿根草本植物[1]，具有較好的藥用價值，還可栽培觀賞、點綴盆景。由于其發芽率低，發芽緩慢，出芽不整齊，加上自然資源越來越少，難以滿足需求[2]。該文研究落新婦組培快繁技術，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

采用引種馴化成功的落新婦種子作外植體，再以此培育的無菌落新婦植物的葉片進行組培試驗。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體消毒。將落新婦種子處理后，在培養的培養中，10 d后觀察不同培養基中種子的污染情況。把無病蟲害的落新婦種子在20 ℃左右溫水浸泡30 min，浸泡洗潔精30 min（同時流水處理）[1]，在操作臺紫外燈處理30 min，無菌條件下用75%酒精溶液浸泡10 s，無菌水沖洗1～2 s，再用0.1%升汞溶液消毒5.5 min，取出用無菌水沖洗2～3次，用消毒濾紙吸干后切塊，均勻撒種于培養基上，污染率最低。

1.2.2 外植體培養。把種子放在培養基上25 d后，將長成的小苗進行轉接、擴繁。

1.2.3 培養基及培養條件。以MS作為初代培養、增殖培養和生根培養的基本培養基，然后在培養基中加入蔗糖30 g/L和瓊脂7.2 g/L。培養溫度（25±2）℃，光照強度3000 lx，光照時間12 h/d，pH值均為5.8。

1.2.4 初代培養。以MS為基本培養基，附加不同濃度的6-BA（0.5、1.0、2.0 mg/L）、2，4-D（0.1、0.2 mg/L）進行組合，每種培養基接種30個外植體。

1.2.5 增殖培養。在增殖培養基上接種誘導出來的芽，附加不同濃度的6-BA（0.3、0.5、0.7、1.0 mg/L），2，4-D 0.1 mg/L，每種培養基分別接種30瓶，觀察記錄增殖效果。

1.2.6 生根培養。在1/2MS培養基上分別添加不同濃度的NAA（0.1、0.5 mg/L）與2，4-D（0.1、0.5 mg/L）進行誘導生根，并在生根過程中進行比較，觀察試管苗生根情況。

2 結果與分析

2.1 不同消毒方式對外植體的影響

在落新婦種子處理后10 d后觀察不同培養基中種子的污染情況。從表1可以看出，把無病蟲害的落新婦種子在20 ℃左右溫水浸泡30 min，浸泡洗潔精30 min（同時流水處理），在操作臺紫外燈處理30 min，用75%酒精溶液浸泡10 s，0.1%升汞溶液處理5.5 s的處理污染率最低，僅為14.28%[3]。

2.2 不同激素配比對芽誘導的影響

在落新婦葉片芽誘導過程中，葉片均可在15 d左右形成愈傷組織從而誘導出芽。從表2可以看出，A3培養基（MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L）芽誘導率明顯高于其他，且芽生長健壯、葉色綠。

2.3 芽的增殖

從表3可以看出，當6-BA分別為0.3～1.0 mg/L時，添加0.1 mg/L的2，4-D，芽均能增殖，增殖倍數在4.5倍以上。從芽苗的增殖倍數、苗的長勢等綜合因素考慮，最終試驗得出最適增殖培養基為MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L（圖1）。

2.4 生根培養

將1～3 cm高的落新婦試管苗接種于添加0.1、0.5 mg/L的NAA或0.1、0.5 mg/L的2，4-D的1/2 MS培養基中，15 d開始生根，25 d進行觀察。從表4可以看出，0.5 mg/L的NAA較低濃度（0.1 mg/L）的效果好，能縮短試管苗生根時間，根粗壯。而0.1、0.5 mg/L的2，4-D生長的根系一般（圖2）。

2.5 試管苗移栽

為了提高移栽成活率，應將試管苗放在自然光下煉苗 2～3 d，洗凈小苗的根部，移栽在腐殖土的苗床上，注意遮蔭保溫，成活率一般可達到80%以上。

3 結論與討論

落新婦以嫩葉形成愈傷組織誘導芽的方式，實現叢生芽的再生。適宜誘導分化的培養基為MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1mg/L，最適增殖的培養基MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L，形成的植株轉接到1/2MS+NAA 0.5 mg/L，生根率達90%以上[9-15]。

4 參考文獻

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