馮航
摘要 根據微核誘導原理,利用蠶豆根尖細胞微核檢測技術對洗衣粉的毒性狀況做出客觀評價。結果表明:洗衣粉會誘導微核的產生,說明洗衣粉在超過一定濃度時對生物細胞是有毒的。
關鍵詞 蠶豆根尖細胞;洗衣粉;微核誘變效應
中圖分類號 R961 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2016)16-0177-01
現階段,全球生態破壞、資源浪費和短缺、環境污染等問題嚴重。為探明環境污染對生物機體是否有蓄積毒作用,必須從環境的一致性下手。環境的一致性指環境中物理或化學污染物對生物的致畸、致癌、致突變性。“三致”中的致畸、致癌常常是致突變的結果。
微核是真核生物細胞經各種理化因子作用后引起染色體畸變,在間期細胞中的一種變現形式。微核是常用的遺傳毒理指標之一,指示染色體或紡錘體的損傷。由于這種損傷會與細胞受到的外界因子的劑量呈正比,因此可用微核出現的頻率來評價環境誘發因子[1]。
蠶豆根尖細胞微核試驗(MCNT)技術是以染色體斷裂及紡錘體損傷為測試終點的植物微核監測方法。它靈敏度高、操作技術簡單,用于監測環境致突變的誘變活性對人體和其他生物體遺傳物質產生危害的技術。本試驗以蠶豆作試驗材料,采用MCNT技術,來檢測洗衣粉。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
蠶豆(根尖細胞的染色體大,DNA含量高,對誘變因子反應敏感)、奇強洗衣粉。95%乙醇、鹽酸、吉姆薩染液。顯微鏡、試管、蠶豆培養盆、紗布、燒杯、培養皿、載玻片、凹面載玻片、小刀、恒溫水浴鍋、鑷子、血細胞計數板。
1.2 試驗方法
1.2.1 浸種胚芽。將試驗用蠶豆按需要放入盛水燒杯中,在25 ℃下浸泡24 h。在此期間至少換2次水,所換水應25 ℃預溫。種子吸脹后用毛巾松散包裹置洗臉盆中,保持溫度,催芽12~24 h,待初生根長2~3 mm,再取發芽良好的種子,放入鋪滿濾紙的洗臉盆中,25 ℃繼續催芽,經36~48 h,大部分初生根長至1~2 cm,根發育良好,此時可用來進行試驗[2]。
1.2.2 檢測因子處理根尖。選取初生根生長良好、根長一致的種子,放入盛有被測液的培養皿中,被測液浸沒根尖即可。
1.2.3 根尖細胞恢復培養。處理后的種子用自來水浸洗3次,每次2~3 min。洗凈后再置入有濕潤濾紙的瓷盤中,25 ℃下再恢復培養24 h。
1.2.4 制片。從根尖頂端切下1 cm長的幼根,用卡諾固定液固定24 h,用蒸餾水浸洗固定好的幼根,60 ℃水浴鹽酸酸解15 min。取適量根尖用吉姆薩染液染色15 min,壓片。
1.2.5 鏡檢。細胞核呈紫紅色,背景基本為無色,然后在視野內統計微核數目。
2 結果與分析
根據《全國生物技術監測規范—蠶豆根尖微核技術》規定的污染指數劃分標準,參考陳光榮等的試驗方法,利用污染指數(PI)值來劃分污染程度。洗衣粉對蠶豆根尖微核率百分比和污染指數的統計結果見表1??梢钥闯?,3個試驗組的微核率分別為4.62%、5.37%、5.06%,遠遠超過了對照組的1.94%的微核率。由此表明,各試驗組的洗衣粉均具有一定的污染性,且污染程度隨著微核率的上升而加重。污染指數(PI)為試驗組的微核百分率與對照組的微核百分率的比值,PI≤1.5時,洗衣粉幾乎沒有污染;1.5
3 結論與討論
前人研究結果表明,不同長度的蠶豆根尖對于微核率有較大的影響,雖然在選材時選用了顆粒飽滿、體積重量相近的蠶豆,但在同樣時間的成長中卻不可避免地造成根尖生長程度不可能絕對相同,因此對于微核率有相對的影響。
由不同的洗衣粉的微核率可得,不同洗衣粉的濃度對人們的傷害是不同的,因此應該減少洗衣粉的用量。洗衣粉是人們生活中洗衣服的必需品,它的作用就是幫助人們花更少的精力洗凈衣服上的污漬。但洗衣服使用過多對人體是有損傷的,人們選擇洗衣粉的時候應根據自身的實際情況選擇低濃度的洗衣粉。
該試驗結果表明,日常洗漱用品可能具有一定的毒性,作用于蠶豆根尖后引起染色體畸變,由此可推斷對人體也有可能致癌、致畸、致突變,提醒人們選擇安全的洗漱用品,減少使用含有害化學物質的日常用品。
4 參考文獻
[1] 蠶豆根尖微核試驗的應用與發展[J].癌變·畸變·突變,1999,11(3):337.
[2] 王玉鵬.微核試驗方法及在環境監測中應用的發展趨勢[J].環境與健康雜志1999,16(6):378-379.
[3] 胡振東,蠶豆微核測定技術及其應用[J].淮北煤師院學報,2000,21(4):65-67.
[4] 鄧冰,穆龍,周銀行.采用蠶豆根尖細胞微核技術檢測核設施周圍水域的遺傳毒性[J].癌變·畸變·突變,2016,28(2):141-144.