基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑和轉(zhuǎn)化生長因子-β1在中鼻甲息肉中的表達(dá)

鐘泗華

（廣東省五華縣人民醫(yī)院，廣東 梅州 514400）

基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑和轉(zhuǎn)化生長因子-β1在中鼻甲息肉中的表達(dá)

鐘泗華

（廣東省五華縣人民醫(yī)院，廣東 梅州 514400）

目的研究中鼻甲息肉中MMPs、TIMPs和TGF－β1的表達(dá)情況。方法選取我院2015年12月至2016年6月收治的20例復(fù)發(fā)性中鼻甲息肉患者 （復(fù)發(fā)組）和20例初發(fā)性中鼻甲息肉患者 （初發(fā)組），另選取正常鼻黏膜者20例作為對照組。經(jīng)手術(shù)病理取其鼻息肉組織，并采用免疫組化SP法檢測三組的MMP－1及其TIMP－1和TGF－β1的表達(dá)情況。結(jié)果復(fù)發(fā)組的MMP－1和TGF－β1表達(dá)水平高于初發(fā)組，初發(fā)組則高于對照組 （P均＜0.05）；三組的TIMP－1表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。三組的MMP－1、TGF－β1陽性表達(dá)率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）；三組的TIMP－1陽性表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）。結(jié)論MMP－1、TGF－β1在中鼻甲息肉中的表達(dá)陽性率較高，尤其是復(fù)發(fā)性中鼻甲息肉。MMP－1、TGF－β1可作為中鼻甲息肉預(yù)后的判斷指標(biāo)。

基質(zhì)金屬蛋白酶；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；中鼻甲息肉

基質(zhì)金屬蛋白酶 （MMPs）及其抑制劑 （TIMPs）在基膜斷裂和組織重建中具有明顯作用［1］。研究［2］顯示，鼻息肉的發(fā)生、發(fā)展與MMPs／TIMPs密切相關(guān)。炎性細(xì)胞因子和生長因子可增加大多數(shù)MMPs的表達(dá)［3］。本研究通過對離體復(fù)發(fā)中鼻甲息肉、初發(fā)中鼻甲息肉和正常下鼻甲黏膜組織中 MMPs和TIMPs以及TGF－β1的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，分析中鼻甲息肉中的基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP－1）及其組織抑制劑-1（TIMP－1）和轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF－β1）的表達(dá)情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2015年12月至2016年6月期間收治的復(fù)發(fā)性中鼻甲息肉和初發(fā)性中鼻甲息肉患者各20例，分別為復(fù)發(fā)組和初發(fā)組。所有患者均未經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療。復(fù)發(fā)組中，男 12例，女 8例；年齡 20～64歲，平均年齡 （38.8± 4.3）歲。初發(fā)組中，男 11例，女 9例；年齡 21～68歲，平均年齡 （39.2±4.5）歲。取正常鼻黏膜組織20例作為對照組，其中男12例，女 8例；年齡 20～63歲，平均年齡 （39.1± 4.3）歲。三組的一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本制作與采集 手術(shù)切除的鼻息肉和正常下鼻甲黏膜組織切成碎塊，放入10%中性福爾馬林溶液中固定24 h。常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片制成5 μm石蠟切片。

1.2.2 免疫組化SP法檢測MMP－1、TIMP－1和TGF－β1表達(dá)水平 常規(guī)脫蠟，PBS緩沖液沖洗后室溫下加入3%H2O2溶液反應(yīng)6 min，再加入檸檬酸緩沖液和山羊血清后封閉，加1∶100稀釋的一抗，4℃冰箱過夜，復(fù)溫后用0.01 M PBS洗滌2 min×3次；滴加生物素化山羊抗兔IgG／山羊抗鼠IgG／兔抗山羊 IgG，37℃ 30 min。0.01 M PBS洗滌 2 min×3次；滴加SABC，37℃30 min，0.01 M PBS洗滌5 min×4次；DAB顯色：將配好的DAB加至切片，室溫顯色，顯微鏡下控制反應(yīng)時間，一般為1～3 min，蒸餾水充分洗滌；蘇木素輕度復(fù)染，酒精脫水，二甲苯透明，封片。陰性對照：第一抗體用抗體稀釋液代替。

1.3 觀察指標(biāo)觀察三組標(biāo)本中MMP－1、TIMP－1和TGF－β1的表達(dá)水平。胞漿內(nèi)有棕黃色顆粒物為陽性細(xì)胞，取標(biāo)本切片，在光鏡下任意取5個視野觀察，陽性細(xì)胞所占比例百分比為陽性表達(dá)率［4］。 陰性 （－）： 陽性細(xì)胞占 0～5%； 弱陽性 （＋）：陽性細(xì)胞占6%～25%；陽性 （＋＋）：陽性細(xì)胞占26%～50%；強(qiáng)陽性 （＋＋＋）：陽性細(xì)胞所占比例＞50%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，用t檢驗，計數(shù)資料以率表示，用χ2檢驗，多組間比較采用方差分析，用F檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的MMP－1、TIMP－1和TGF－β1表達(dá)水平比較復(fù)發(fā)組的MMP－1和TGF－β1表達(dá)水平明顯高于初發(fā)組，初發(fā)組明顯高于對照組 （P均＜0.05）。三組的TIMP－1表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）。見表1。

表1 三組的MMP－1、TIMP－1和TGF－β1表達(dá)水平比較（，ng／mL）

表1 三組的MMP－1、TIMP－1和TGF－β1表達(dá)水平比較（，ng／mL）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與初發(fā)組比較，＃P＜0.05。

組別 例數(shù) M M P－1 T I M P－1 T G F－β 1復(fù)發(fā)組 2 0 5 8.9 6 ± 1 5.1 2*＃ 4 2 8.5 2 ± 1 0 9.8 6 6 5 1.7 4 ± 1 6 4.8 9*＃初發(fā)組 2 0 5 4.1 7 ± 1 2.6 8* 4 1 6.3 1 ± 1 0 2.7 5 5 5 7.3 6 ± 1 5 5.2 5*對照組 2 0 4 6.8 2 ± 1 0.5 9 4 2 3.1 9 ± 1 0 4.2 8 3 4 8.1 7 ± 1 2 7.6 8 F 4.4 7 0.0 7 2 1.4 3 P＜0.0 5 ＞0.0 5 ＜0.0 5

2.2 三組的MMP－1、TIMP－1和TGF－β1陽性表達(dá)率比較三組的MMP－1、TGF－β1陽性表達(dá)率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。三組的TIMP－1陽性表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 三組的MMP－1、TIMP－1和TGF－β1陽性表達(dá)率比較 （n）

3 討論

鼻息肉是鼻黏膜的慢性炎癥產(chǎn)物，發(fā)病率約為1%～4%，其發(fā)病機(jī)制仍未明確，目前認(rèn)為組織重塑是息肉形成的關(guān)鍵因素［5－6］。MMPs與TIMPs的平衡在細(xì)胞外基質(zhì)和基膜成分更新及穩(wěn)態(tài)維持中具有重要作用［7］，是調(diào)節(jié)組織承建的關(guān)鍵因素。

MMPs由具有相似結(jié)構(gòu)及功能元件而不同基因產(chǎn)生的一類酶組成［8］，該類酶最初由金屬離子的依賴性及活化所需要的pH值與其他類別的酶區(qū)別［9］。MMP－1是膠原酶類，而TIMP－1是MMP－1的天然組織抑制劑，可抑制MMP－1活性。MMPs與TIMPs平衡是維持細(xì)胞基底膜成分更新的關(guān)鍵因素［10－11］。本研究中，與健康者比較，鼻甲息肉患者的MMP－1表達(dá)水平明顯上升，而TIMP－1表達(dá)水平則無明顯差異，則MMP－1／TIMP－1水平隨之上升，提示MMP－1高表達(dá)可能是導(dǎo)致鼻甲息肉發(fā)生的重要因素。TGF－β1是膠原蛋白、糖蛋白及蛋白多糖多種細(xì)胞外基質(zhì)成分的調(diào)節(jié)因子，可促進(jìn)ECM合成和氣道上皮重建。本研究的TGF－β1水平明顯升高，表明鼻甲息肉鼻黏膜炎性增生可能是由于TGF－β1水平引起黏膜增生而導(dǎo)致。另外，復(fù)發(fā)組的MMP－1和TGF－β1表達(dá)水平高于初發(fā)組，可見MMP－1和TGF－β1表達(dá)水平越高，越有可能復(fù)發(fā)。三組的MMP－1和TGF－β1表達(dá)陽性率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05），也進(jìn)一步驗證了MMP－1和TGF－β1表達(dá)水平與鼻甲息肉密切相關(guān)。

綜上所述，MMP－1、TGF－β1在鼻甲息肉中的表達(dá)陽性率較高，尤其是復(fù)發(fā)性鼻甲息肉，MMP－1、TGF－β1可作為鼻甲息肉預(yù)后的判斷指標(biāo)。

[1] 李湘醫(yī),王峰雷,黃見平,等.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑和轉(zhuǎn)化生長因子-β1在中鼻甲息肉的表達(dá) [J].貴州醫(yī)藥,2014,38(3): 204-207.

[2] 李江華,魏曉麗,詹俊杰,等.VEGF和MMP-9在變應(yīng)性鼻炎鼻腔黏膜中的表達(dá)及相關(guān)性研究 [J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2013,36(3):41-42.

[3] 佘臘枝,魯海濤,謝瓊.嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子和基質(zhì)金屬蛋白酶9在鼻息肉中的表達(dá) [J].醫(yī)學(xué)綜述,2014,20(24):4582-4583.

[4] 佘臘枝,魯海濤,謝瓊.缺氧誘導(dǎo)因子-1α和基質(zhì)蛋白酶-9在鼻息肉嗜酸性粒細(xì)胞浸潤過程中的作用 [J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2014, 11(18):2553-2554,2556.

[5] 阮宇,張媛,張羅.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞信號通路中關(guān)鍵基因單核苷酸多態(tài)性與變應(yīng)性鼻炎免疫治療療效的相關(guān)性研究 [J].中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2016,51(1):34-42.

[6] 易志富.基質(zhì)金屬蛋白酶和金屬蛋白酶組織抑制物在鼻息肉形成中的作用 [J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2011,25(5):236-238.

[7] 孫樹軍,趙立民,殷憲寶.核轉(zhuǎn)錄因子和明膠酶在鼻息肉中的表達(dá)及臨床意義 [J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2015,25(27):36-40.

[8] 趙安濱,楊永國,徐海燕,等.血管內(nèi)皮生長因子和CD34在鼻息肉中的表達(dá)及臨床意義 [J].中國耳鼻咽喉頭頸外科,2013,20 (11):597-599.

[9] 王麗燕,張冬梅.鼻腔鱗狀細(xì)胞癌組織中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表達(dá)變化及意義 [J].山東醫(yī)藥,2013,53(3):74-75.

[10]趙金花,高志光,張燕,等.成纖維細(xì)胞生長因子-2和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在鼻息肉表達(dá)及其意義 [J].黑龍江醫(yī)學(xué),2014,38(8): 897-898.

[11]姜曉丹,魏曉麗,白潔,等.MIP-1α和MMP-9在鼻息肉中的表達(dá)及其臨床意義 [J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2014,37(2):34-35.

（責(zé)任編輯：何華）

Expressions of Matrix Metalloproteinase,Its Inhibitors and Transforming Growth Factor-β1 in Middle Nasal Polyps

ZHONG Sihua(Wuhua County People's Hospital,Meizhou 514400,China)

ObjectiveTo study the MMPs,TIMPs and TGF-β1 expressions in middle nasal polyps.Methods20 cases of patients with recurrent middle nasal polyps(recurrent group)and 20 cases of patients with primary middle nasal polyps(primary group)admitted to our hospital from December 2015 to July 2016 were selected,and another 20 people with normal nasal mucosa were selected as control group.Their nasal polyps tissues were taken by surgical pathology,and the MMP-1,TIMP-1 and TGF-β1 expressions were detected by immunohistochemical SP method.ResultsThe MMP-1 and TGF-β1 expression levels of recurrent group were higher than those of primary group,and the MMP-1 and TGF-β1 expression levels of primary group were higher than those of control group(all P＜0.05).No statistical difference was found in the TIMP-1 expression level among three groups(P＞0.05).Statistical difference was found in the positive expression rates of MMP-1 and TGF-β1 among three groups(P＜0.05),but not found in the positive expression rate of TIMP-1(P＞0.05).ConclusionsThe positive expression rates of MMP-1 and TGF-β1 in middle nasal polyps are higher,especially in recurrent middle nasal polyps.The MMP-1 and TGF-β1 can be used as the judging indicators for prognosis of middle nasal polyps.

Matrix metalloproteinase;Matrix metalloproteinase inhibitor;Nasal polyps

R765.25

A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.07.0985

2017－01－25

2017-05-08

鐘泗華 （1975－），男，廣東籍，大專學(xué)歷，主治醫(yī)師，從事眼耳鼻咽喉臨床工作。