單寧酸測定方法研究進展

劉 楊，袁廷香，婁 波

（遵義師范學院 化學化工學院，貴州 遵義 563000）

數理研究

單寧酸測定方法研究進展

劉 楊，袁廷香，婁 波

（遵義師范學院 化學化工學院，貴州 遵義 563000）

單寧酸被廣泛應用于食品、醫藥、制革、化妝品等領域，與之相關的檢測技術越來越受到人們的關注.對目前單寧酸的主要測定方法進行了概述，以期為單寧酸檢測方法的選擇提供參考.

單寧酸；測定；研究進展

單寧酸(tannic acid)，又名丹寧酸、單寧、鞣酸、鞣質,是一類具有生物活性的高分子多元酚類化合物.單寧酸因其獨特的化學性質和生理特性，被廣泛應用于食品、醫藥、化妝品、制革、冶金、印染等領域[1-3]，前景十分廣闊.因此對單寧酸進行檢測顯得尤為重要.文中就目前單寧酸的主要測定方法作出綜述，以期為單寧酸檢測方法的選擇提供參考.

1 單寧酸的測定方法

目前測定單寧酸的方法主要有分光光度法、滴定法、蛋白質預沉淀法、電化學分析法、化學發光法、高效液相色譜法、熒光分析法和原子吸收光度法等.

1.1 分光光度法

分光光度法作為測定單寧酸的經典方法之一，因其快速、簡便，應用最為廣泛.李曉文[4]等基于單寧酸可將鐵（Ⅲ）定量還原為鐵（Ⅱ），再以1，10-鄰二氮菲作為測定鐵（Ⅱ）的顯色劑，在醋酸鹽緩沖溶液pH4.4，明膠溶液增敏、增溶，EDTA作掩蔽劑的條件下，在505nm波長處測量吸光度，建立了測定啤酒中單寧酸的新方法，并可用于含有少量抗壞血酸試樣的分析.張縱圓[5]等首次用Folin-Denis(FD)顯色分光光度法測定無花果葉中的單寧酸.在弱堿性條件下，新疆無花果葉中單寧酸與鎢酸鈉-磷鉬酸形成穩定的藍色配合物，在755nm處測定顯色液的吸光度從而確定單寧酸的含量，建立了一種快速、經濟簡便的光度分析法，為進一步開發利用該植物資源提供了依據.

1.2 滴定法

滴定法也是單寧酸含量測定的經典方法之一.單寧酸分子中有多個鄰位酚羥基，可與若干金屬離子（如鋅、鉛、鐵、錫等）絡合，在不同pH條件下生成沉淀.曲祥金[6]等利用單寧酸在一定條件下能與Zn2+發生定量反應，生成沉淀，濾除沉淀物后，用標準EDTA滴定濾液中剩余的Zn2+，建立了操作較簡單、易被分析工作者所掌握的測定啤酒花中單寧酸含量的EDTA滴定法.

1.3 蛋白質預沉淀法

單寧酸具有多酚結構，可與蛋白質結合生成沉淀.佟健[7]等采用牛血清白蛋白定量沉淀單寧后,將沉淀物溶解于十二烷基磺酸鈉 -三乙醇胺（SDS-TEA）水溶液中,在與氯化鈉試劑作用下生成紅色絡合物,該絡合物吸光度值與單寧酸的含量在0～50μg/mL范圍內成線性關系.通過實驗得到單寧酸回收率為98.16～100.66%,與經典方法(目視比色法)相比,該法具有簡便、快速、精確等特點,便于推廣.Cheng[8]等也采用牛血清白蛋白預沉淀單寧后，利用流動注射與光散色聯用技術建立了一種簡單、可靠地測定單寧酸的新方法，該法既可用于pH5溶液中也可于pH7溶液中進行分析.

1.4 電化學分析法

電化學分析法因其靈敏度高、準確性好，裝置簡單，易于操作等優點而被廣泛用于無機、有機、藥物分析等.Vu[9]等利用經預處理的鉛筆芯電極，使用陽極溶出微分脈沖伏安法測定了單寧酸，其線性范圍為5.0～500×10–9mol/L,檢出限為1.5×10–9mol/L，且成功應用于飲料中單寧酸含量的測定.Lü[10]利用多壁碳納米管修飾玻碳電極，采用三電極體系，在開路條件下攪拌富集5min，靜置15s，使用線性掃描伏安法在-0.20～0.60V進行掃描，發現在0.30V出現氧化峰，建立了測定單寧酸的新方法.該法線性范圍為4～2000×10–5mol/L,檢出限為1×10–7mol/L，并用于測定茶葉和五倍子中單寧酸含量.

表1 部分電化學分析法測定單寧酸

部分電化學分析法測定單寧酸見表1.

1.5 化學發光法

化學發光法亦因其靈敏度高、儀器簡單、線性范圍寬等優點被廣泛應用.Li[15]等發現單寧酸對luminol-H2O2-CuO NPs體系的化學發光具有抑制作用，據此建立了流動注射化學發光法測定單寧酸的新方法.該法線性范圍在10～100×10–9mol/L，檢出限為2.6×10–9mol/L，并成功測定中藥五倍子中單寧酸含量.Xie[16]等發現在有表面活性劑吐溫40存在時，KIO4與H2O2反應產生化學發光，而單寧酸的注入會使化學發光增強，在此基礎上建立了測定單寧酸的流動注射化學發光新方法.其單寧酸濃度在7.0×10-9～1.0×10-5mol/L成良好的線性關系，檢出限為2.3×10-5mol/L，并用于工業廢水中單寧酸含量的檢測，結果令人滿意.

部分化學發光體系測定單寧酸見表2.

表2 部分化學發光體系測定單寧酸

1.6 高效液相色譜法

郭佳莉[20]等利用高效液相色譜法測定單寧酸的含量，采用Hypersil ODS(125×4.0mm，5μm)色譜柱，流動相為80%CH3OH及20%H2O，275nm檢測波長、流速0.5mL/min等實驗條件,其線性范圍為120～240ng/mL，在測定樣品余甘子提取液中單寧酸含量時得到其加標回收率在99.7～107.5%之間，3min就能完成單次檢測，可用于多種物質中單寧酸含量的測定.柯煒昌[21]等采用自動固相萃取實現去除干擾組分,反相高效液相色譜法對造紙法再造煙葉濃縮液中的單寧酸進行了測定，該法操作簡單、快速準確.在單寧酸的濃度為2～117μg/mL的范圍內具有良好的線性關系，其檢出限0.2μg/mL.

1.7 熒光分析法

馮素玲[22]等提出了熒光動力學測定單寧酸的方法，該法基于單寧酸對Cu（II）催化過氧化氫氧化羅丹明B的活化作用，其線性范圍為0.04～0.72 mg/L，檢出限為0.025mg/L.在對各種試劑用量影響探究下，優選出最佳的實驗條件，對含量為0.4mg/L的鞣酸標準液平行測定了11次，其RSD為1.8%.對處理后的茶葉樣品進行測定，回收率為95.2～104%，RSD為1.7～3.0%.該法準確、實用、靈敏度高.

1.8 原子吸收光度法

杜曉燕[23]等基于一定條件下，單寧酸可與二價銅離子發生沉淀反應，再用原子吸收光度法測定剩余銅的原理，間接測定了茶葉中單寧酸，此法簡便快速、不受顏色及共存物質的干擾.

2 結束語

因單寧酸具有很強的藥理和生物活性，近年來人們對其研究不斷深入，用途亦不斷拓展.尋找新思路、新方法，加大對單寧酸測定方法的研究，將對單寧酸的開發利用具有重要意義.

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TQ94

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