Bmi-1在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

莫凱迪，吳勝明，楊建榮，李碧錦，何二松，

林昌榮1，許宇彪1，唐 毅1，潘頤聰1，李 軍1，凌凱南1，季志強1

（1．廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院普通外科，廣西 南寧 530021；2．廣西壯族自治區(qū)腫瘤醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021）

Bmi-1在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

莫凱迪1，吳勝明2*，楊建榮1，李碧錦1，何二松1，

林昌榮1，許宇彪1，唐 毅1，潘頤聰1，李 軍1，凌凱南1，季志強1

（1．廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院普通外科，廣西 南寧 530021；2．廣西壯族自治區(qū)腫瘤醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021）

目的 探究Bmi-1在乳腺癌組織中表達及其臨床意義。方法 采集60例乳腺癌和癌旁組織，采用免疫組化法檢測Bmi-1的蛋白表達水平和組織定位，再用配對T檢驗進行統(tǒng)計分析，比較癌和癌旁的表達差異。結(jié)果 Bmi-1主要定位于細胞核，其表達水平在癌組織中顯著高于癌旁組織（P＜0.05）；Bmi-1表達水平在浸潤性導(dǎo)管癌和其他病理類型的乳腺癌組織中無顯著差異（P＞0.05）；在腫瘤組織＜2 cm和≥2 cm的乳腺癌組織中亦無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的Bmi-1表達水平則顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P＜0.05）。結(jié)論 Bmi-1在乳腺癌組織中高表達，其表達水平與病理類型和腫瘤大小無關(guān)，但是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

Bmi-1蛋白；乳腺癌；表達

Bmi-1基因是多疏基因家族中的一員，其能夠?qū)myc相互協(xié)同，從而達到幫助細胞轉(zhuǎn)化和細胞增值的作用，所以其在某種程度上也與腫瘤的生成有關(guān)。本篇文章的主要目的是探究Bmi-1在乳腺癌組織中的表達，從而探究Bmi-1基因的表達與乳腺癌的發(fā)生之間的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 一般資料

隨機選取廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫醫(yī)院收治的60例乳腺癌患者，患者年齡在4 3～7 5歲，平均年齡為（68.5±7.3）歲。所有患者均為女性，并且經(jīng)過手術(shù)病理組織全部確診為乳腺癌，根據(jù)病理類型分組，浸潤性導(dǎo)管癌占有50例，其他病理類型為10例；根據(jù)腫瘤的大小分組，37例患者的腫瘤直徑為2 cm以下，23例患者的腫瘤直徑超過2 cm；根據(jù)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的情況分組，其中33例患者發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，27例患者沒有出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2 實驗試劑和方法

本實驗通過免疫組化SP法對乳腺癌組織中Bmi-1蛋白的表達進行分析。

主要實驗試劑：鼠抗Bmi-1單克隆抗體購自ABCAM公司（貨號：ab14389）、免疫組化SP法試劑盒購自中杉金橋公司（貨號：sp9000），DAB試劑盒、蘇木素、中性樹脂、PBS粉末等相關(guān)試劑均購自中杉金橋公司。

實驗方法：將石蠟標本置于二甲苯中脫掉石蠟，時間為15 min，2次；使用乙醇進行梯度水化處理，并用蒸餾水沖洗3 min；EDTA修復(fù)液進行修復(fù)4 min，高火加熱使其沸騰，然后中低火加熱20 min充分暴露其抗原位點，自然冷卻之后用PBS漂洗，使用3%過氧化氫孵育10 min，從而將其內(nèi)部的內(nèi)源性過氧化物酶活性消除，PBS漂洗，滴加鼠抗人Bmi-1單克隆抗體，孵育過夜，使用PBS漂洗，使用DAB進行顯色，5 min之后終止顯色，使用蘇木素復(fù)染，然后使用鹽酸乙醇分化，乙醇梯度脫水，二甲苯透明處理后，中性樹膠封片。最后進行觀察。以上PBS漂洗步驟均為3 min×3次。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

運用SPSS 14.0軟件對數(shù)據(jù)進行處理。癌和癌旁的比較使用配對T檢驗進行統(tǒng)計分析，根據(jù)臨床特征分組的結(jié)果使用成組設(shè)計的t檢驗進行比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中的表達

Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中均有表達，其表達位置主要集中在細胞核（圖1）。配對T檢驗結(jié)果顯示Bmi-1在乳腺癌組織中的表達水平顯著高于癌旁（P＜0.05）。

圖1 Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中的表達注：A：乳腺癌癌旁組織；B：乳腺癌組織

2.2 Bmi-1表達水平與乳腺癌臨床特征的關(guān)系

根據(jù)腫瘤大小、病理類型以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對這60例樣本分組進行比較（表1），結(jié)果顯示，根據(jù)腫瘤大小分組，Bmi-1的表達水平在腫瘤直徑＜2 cm和≥2 cm的乳腺癌組織中并無顯著差異；根據(jù)病理類型分組，浸潤性導(dǎo)管癌和其他病理類型的乳腺癌組織的Bmi-1的表達水平亦未見統(tǒng)計學(xué)差異；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織Bmi-1的表達水平顯著高于未見淋巴節(jié)轉(zhuǎn)移組。

表1 乳腺癌組織Bmi-1的表達水平（±s）

表1 乳腺癌組織Bmi-1的表達水平（±s）

注： ★與＜2 cm組比較，P＞0.05；◆與浸潤性導(dǎo)管癌組比較，P＞0.05；▲與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較，P＜0.05

±s） 0.66±0.42 0.61±0.21★0.68±0.33 0.61±0.22◆0.75±0.38 0.60±0.31▲腫瘤直徑 病理類型 是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移＜2cm ≥2cm 浸潤性導(dǎo)管癌 其他 是 否病例數(shù) 37 23 50 10 33 27平均光密度值（x

3 討 論

Bmi-1基因是1991年由荷蘭癌癥中心在轉(zhuǎn)基因鼠的淋巴瘤細胞傳代的過程中發(fā)現(xiàn)的，由于Bmi-1基因能夠阻斷在細胞周期中兩種關(guān)鍵性蛋白（兩種蛋白為p16INK4a和p14ARF），并且其與原癌基因MYC具有相互協(xié)同作用，從而在某些程度上幫助細胞轉(zhuǎn)化和細胞增值，因此推測Bmi-1基因與腫瘤的發(fā)生發(fā)展也有一定的關(guān)系。Bmi-1基因表達產(chǎn)生的蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)錄抑制因子，其隸屬于Ployccmb家族當(dāng)中，其主要定位于染色質(zhì)、染色體或者是細胞質(zhì)進行表達。

Bmi-1基因通過一定的作用和途徑與乳腺癌浸潤轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因進行作用，然后對腫瘤細胞的浸潤轉(zhuǎn)移進行調(diào)節(jié)。其中Bmi-1基因在某種程度上作為一種癌基因，在乳腺癌細胞中高度表達，并且適當(dāng)調(diào)節(jié)細胞周期，從而抑制癌細胞的P53蛋白和PRb蛋白的表達，抑制細胞凋亡，從而導(dǎo)致細胞腫瘤化。另外一方面，Bmi-1基因還能夠進一步激活端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶，從而誘導(dǎo)端粒酶的復(fù)活，從而阻止癌細胞的衰老。端粒DNA一般存在染色體的末端，隨著細胞復(fù)制次數(shù)的增多，端粒酶DNA的長度逐漸縮短，在細胞復(fù)制到足夠多的次數(shù)之后，縮短的端粒使染色體相互融合，從而造成細胞的死亡。而端粒酶的作用就是恢復(fù)縮短的端粒，從而是端粒恢復(fù)原來的長度，這樣就會造成癌細胞的永生。

乳腺癌的發(fā)生和治療均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系，一般淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者均會有不好的后果。從本實驗的結(jié)果能夠看出，Bmi-1基因在乳腺癌組織中高表達，而且與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示了Bmi-1基因與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有非常重要的作用，這為乳腺癌的預(yù)后判斷和治療提供了新的依據(jù)。

[1] 崔美子.miRNA-1及相關(guān)基因調(diào)控乳腺癌生物學(xué)行為的機制.《吉林大學(xué)》,2016.

[2] 陳夢婷.miRNA-373在乳腺癌中的表達及其臨床意義.《遵義醫(yī)學(xué)院》.2016,31(1):159-161.

[3] 劉亞梅,郭興伯.疏肝健脾補腎方對乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因小鼠脾T淋巴細胞及病毒載量的影響.《中國中西醫(yī)結(jié)合雜志》,2011.

[4] 蘆春斌,張 偉,劉 標.抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆飼料對雄性小鼠脾淋巴細胞體外增殖的影響.《大豆科學(xué)》,2012.

[5] 李振宇,魯 光,牟偉偉.Wnt3a轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞對T淋巴細胞增殖的影響.《中華血液學(xué)雜志》,2011.

[6] 林之光.共培養(yǎng)誘導(dǎo)彌漫大B細胞淋巴瘤細胞系Toledo向干細胞樣細胞轉(zhuǎn)化及其機制研究.《復(fù)旦大學(xué)》,2013.

[7] 黃影薇.SALL4與BMI-1在彌漫性大B細胞淋巴瘤組織中表達的研究.《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》,2014.

本文編輯：吳 衛(wèi)

R737.9

B

ISSN.2095-8242.2017.24.4606.02

吳勝明