玉米須藥材質量標準研究*

王眾寬，明孟碟，石 磊，楊紅兵

（湖北中醫藥大學藥學院，湖北 武漢 430065）

·實驗研究·

玉米須藥材質量標準研究*

王眾寬，明孟碟，石 磊，楊紅兵△

（湖北中醫藥大學藥學院，湖北 武漢 430065）

目的 修訂玉米須藥材現有的質量標準。方法 觀察玉米須藥材的性狀及顯微特征，測定其水分、灰分、浸出物、多糖及木犀草素的含量。結果 在玉米須藥材現有質量標準中，其性狀特征需要修正，可增加顯微鑒別、檢查及含量測定等項目。結論 應更新有效的鑒別項目和內容，補充和完善玉米須藥材的質量標準。

玉米須；質量標準；修訂

玉米須，別名玉麥須、棒子毛等，為禾本科植物玉蜀黍 Zea maysL．的花柱和柱頭[1]。玉米須入藥始載于《滇南本草》，性平、味甘，主要活性成分為多糖、黃酮等[2－3]，具有降血糖、降血壓、利尿、利膽等作用，民間常用作治療高血壓、高血脂、糖尿病的輔助藥物[4－8]。1977年版《中國藥典（一部）》[9]及1992年版《衛生部藥品標準·中藥材（第一冊）》[10]均有收錄，含來源、性狀、鑒別、性味、功能與主治、用法與用量、貯藏等項目。由于這些標準的內容比較簡略，時間也比較久遠，有必要重新修訂，以適應市場經濟發展的需要，保障臨床用藥的安全、有效。對此，本研究中觀察了市售玉米須藥材的性狀及顯微特征，并測定了其水分、灰分、浸出物、多糖及木犀草素的含量，現報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Dionex P680型高效液相色譜儀（戴安中國有限公司）；UV－1800型分光光度計（島津企業管理有限公司）；BM1000型生物顯微鏡（江南永新光學有限公司）；AL104型電子分析天平（梅特勒－托利多儀器有限公司）；DGB／20－002A型電熱干燥箱（重慶銀河試驗儀器有限公司）；SK250H型超聲波清洗器（上海科導超聲儀器有限公司）。

1．2 試藥

玉米須藥材10批，分別購自湖北蘄春、安徽亳州及重慶；木犀草素對照品（批號為PS1032－0025，成都普思生物科技有限公司）；甲醇為色譜純，水為娃哈哈純凈水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2．1 性狀特征觀察

通過對10批玉米須藥材的形狀、長度、直徑、顏色、表面特征、質地及氣味等方面的特征進行細致觀察、研判，同時對比觀察玉米原植物及新鮮玉米須的外觀性狀，歸納出玉米須有以下性狀特征：呈細長條形或須狀，邊緣被茸毛，常卷曲成團；完整者可長達30 cm，寬約0．5 mm；黃棕色至棕紅色，柱頭部位常呈黑褐色；質柔軟；氣微，味淡。

2．2 粉末顯微特征觀察

將玉米須藥材打粉過4號篩，制作水合氯醛透化裝片，置顯微鏡下觀察。本品粉末呈黃棕色至棕褐色。非腺毛多列性，長約500 μm；花粉粒完整者呈類球形，多數干癟呈不規則形；直徑80～120 μm；單個萌發孔明顯。環紋或螺紋導管較細，直徑約10 μm，周圍薄壁組織含棕色物質。詳見圖1。

圖1 玉米須粉末特征

2．3 檢查項目指標測定

依照2015年版《中國藥典（一部）》方法，分別對10批玉米須藥材的水分、總灰分和水溶性浸出物進行測定，結果見表1。根據測定結果，結合藥材的生產、貯存與銷售情況，擬訂玉米須藥材的水分不得超過14．0%，總灰分不得超過7．0%，水溶性浸出物不得少于8．0%。

表1 玉米須樣品水分、總灰分、浸出物及含量測定結果（%，n＝10）

2．4 多糖含量測定

2．4．1 測定方法

采用硫酸－苯酚比色法測定。

2．4．2 葡萄糖貯備液及供試品溶液制備

葡萄糖貯備液：稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖50 mg，精密稱定，加水溶解，并定容至50 mL，即得。

供試品溶液：取玉米須粉末（過3號篩）約1 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水30 mL，浸泡1 h，然后置水浴鍋中冷凝回流1 h，趁熱過濾，濾渣中加水30 mL，重復上述過程，提取2次合并濾液。所得濾液采用Seveg法[11]除去蛋白，離心，取上清液，加入活性炭脫色，置90℃水浴加熱10 min，過濾，定容至250 mL，即得。

2．4．3 線性關系考察

精密吸取葡萄糖貯備液1，2，4，6，8，10 mL，分別置100 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液1 mL，置10 mL具塞試管中，加入5%苯酚溶液1 mL，混合后迅速加入濃硫酸5 mL，搖勻，于40℃水浴30 min，在490 nm波長處測定吸光度。以溶液吸光度（X）為橫坐標、質量濃度（Y）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程 Y＝0．081 2 X＋0．001 4，r＝0．999 4（n＝6）。結果表明，多糖質量濃度在0．01～0．10 g／L范圍內與吸光度線性關系良好。

2．4．4 樣品含量測定

精密吸取供試品溶液1 mL，分別置10 mL具塞試管中，加入苯酚溶液 1 mL，混合后迅速加入濃硫酸5 mL，搖勻，于40℃水浴30 min，在490 nm波長處測定吸光度，計算多糖含量，結果見表1。根據測定結果，結合藥材的生產、貯存與銷售情況，擬訂玉米須藥材多糖含量不得少于0．30%。

2．5 木犀草素含量測定

2．5．1 測定方法

采用高效液相色譜法測定。

2．5．2 色譜條件

色譜柱：Dionex C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），流動相：甲醇－0．1%磷酸水溶液（55∶45）；流速：1 mL／min；檢測波長：254 nm；柱溫：25℃；進樣量：20 μL。

2．5．3 溶液制備

對照品溶液：稱取木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成質量濃度為20 μg／mL的溶液，即得。

供試品溶液：取玉米須粉末（過3號篩）約3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇25 mL，稱定質量，靜置過夜，超聲提取2 h，冷卻后稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，過濾，取續濾液，即得。

2．5．4 方法學考察

線性關系考察：分別精密吸取木犀草素對照品溶液2，5，10，15，20 μL，注入液相色譜儀，測定木犀草素峰面積。以木犀草素進樣量（μg，X）為橫坐標，峰面積值(Y)為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程 Y＝1．062 1 X－0．101 3，r＝0．999 4（n＝5）。結果表明，木犀草素質量濃度在2．12～21．20 μg／mL范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取同一木犀草素對照品溶液20 μL，重復進樣5次，測定木犀草素峰面積。結果的RSD＝1．37%（n＝5），表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，2，4，6，8 h時各進樣 20 μL，測定木犀草素峰面積。結果的RSD＝1．80%（n＝5），表明供試品溶液在8 h內穩定。

重復性試驗：分別稱取同批玉米須樣品5份，約3 g，精密稱定，按2．5．3項下方法制備供試品溶液，測定木犀草素峰面積，計算木犀草素含量。結果的 RSD＝1．49%（n＝5），表明方法重復性良好。

加樣回收試驗：分別稱取已知含量的同批玉米須樣品5份，約1．5 g，精密稱定，加入對照品溶液適量，按2．5．3項下方法制備供試品溶液，測定木犀草素含量，計算加樣回收率。結果平均加樣回收率為98．95%，RSD＝2．00%（n＝5），表明方法回收率良好。

2．5．5 樣品含量測定

分別稱取不同批次的玉米須粉末約3 g，精密稱定，按2．5．3項下方法制備供試品溶液，測定木犀草素含量，結果見表1。根據測定結果，結合藥材的生產、貯存與銷售情況，并參考文獻[12]，擬訂玉米須藥材木犀草素含量不得少于0．005 0%。

3 討論

本研究中擬訂的玉米須藥材新質量標準中保留了現有質量標準中的所有項目，同時對現有標準的性狀特征進行了修正，并增加了顯微鑒別、檢查（水分、灰分、浸出物）及含量測定（多糖、木犀草素）等項目，更切合實際，可有效引導藥材的規范生產和交易。

性狀特征的修訂共有4處：1）藥典描述玉米須“呈線狀”，部標“呈絨狀”，實際藥材（花柱）除柱頭部位卷曲呈須狀以外，主體呈扁平的細長條形，明顯有一定寬度；2）藥典及部標描述玉米須“呈淡黃色至棕紅色”，實際上只有部分藥材樣品帶有少數淡黃色部分，且活性成分（黃酮類）含量深色（黃棕色至棕紅色）玉米須較高，淺色玉米須（淡黃色）較低；3）藥典及部標描述玉米須“柱頭短，2裂”，實際上在藥材柱頭的分裂情況多無法分辨；4）藥典及部標描述玉米須“味微甜”，實際藥材并無甜味。

藥典無鑒別項，部標則收載了理化鑒別（顏色反應），新標準增加了粉末顯微特征。經反復觀察，花粉粒與非腺毛（多列性）是玉米須粉末的主要顯微特征，另外可見環紋或螺紋導管及其周圍薄壁組織含有棕色物質。結果與文獻[13]一致。

此外，本研究中試圖用薄層色譜法對玉米須中黃酮類成分進行鑒別。參考文獻[14]，以甲醇為溶劑，分別采用超聲提取法、索氏提取法，對玉米須供試品進行提取和濃縮，得供試品溶液；另取木犀草素、刺芒柄花素、芹菜素對照品，分別加甲醇制成每1 mL含0．5 mg的對照品溶液；照薄層色譜法[2015年版《中國藥典（四部）》通則0502]試驗，吸取對照品溶液5 μL、供試品溶液10～20 μL分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇（15∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%氯化鋁溶液顯色，晾干后置紫外光燈（365 nm）下檢視；結果對照品顯示黃色及藍色熒光斑點清晰，但供試品溶液在與對照品溶液色譜相應位置上未見斑點。通過加大供試品取樣量，提高供試品溶液濃度，以及加大點樣量等，供試品溶液仍無斑點出現。結合含量測定結果，可認為玉米須中相關成分的含量低于薄層色譜法的檢測限，故在新標準中不采用此鑒別方法。

在進行黃酮類成分的定量研究時，由于上述3種成分含量偏低，只有木犀草素的含量相對較高，重復性、穩定性及峰形也較好，故將木犀草素作為定量指標。

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Quality Standard of Maydis Stigma

Wang Zhongkuan，Ming Mengdie，Shi Lei，Yang Hongbing
（School of Pharmacy，Hubei College of Traditional Chinese Medicine，Wuhan，Hubei，China 430065）

Objective To revise the existing quality standard of Maydis Stigma．Methods The characters and microscopic characteristics of Maydis Stigma were observed，and the contents of water，ash，extract，polysaccharide and luteolin were determined．Results In the existing quality standard ofMaydis Stigma，the characters and characteristics need to be revised，and the microscopic identification，inspection and content determination should be added．Conclusion The valid identification items and contents should be updated so as to supplement and perfect the quality standards of Maydis Stigma．

Maydis Stigma；quality standard；revision

R282．5

A

1006－4931(2017)14－0001－03

2017－03－10)

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．14．001

湖北省食品藥品監督檢驗研究院項目[2016湖北省中藥材質量標準]。

王眾寬（1994－），男，碩士研究生，研究方向為中藥品種、質量與資源，（電話）027－68890106（電子信箱）1339418733＠qq．com。

△通訊作者：楊紅兵(1963－)，男，教授，研究方向為中藥品種、質量與資源，（電子信箱）yanghb321＠126．com。