氣相色譜法同時(shí)測定鹽酸坦洛新原料藥中4種有機(jī)溶劑殘留量

徐麗

（河南省駐馬店市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 駐馬店 463000）

·檢驗(yàn)檢測·

氣相色譜法同時(shí)測定鹽酸坦洛新原料藥中4種有機(jī)溶劑殘留量

徐麗

（河南省駐馬店市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 駐馬店 463000）

目的 建立鹽酸坦洛新原料藥中有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷）殘留量的測定方法。方法 采用毛細(xì)管氣相色譜法。色譜柱為 DB－FFAP毛細(xì)管氣相色譜柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm），載氣為氮?dú)猓瑲浠鹧骐x子化檢測器；程序升溫，40℃保持6 min，后以30℃ ／min的速率升溫至200℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度200℃，檢測器溫度250℃，分流比為20∶1。結(jié)果 4種有機(jī)溶劑完全分離，甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷質(zhì)量濃度分別在13．50～270．00，11．56～231．20，9．57～191．32，1．36～27．20 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積比線性關(guān)系良好，加樣回收試驗(yàn)結(jié)果理想。結(jié)論 所建立的檢測方法靈敏度和準(zhǔn)確度均達(dá)到有機(jī)溶劑殘留量的檢測要求，適用于坦洛新原料藥中有機(jī)溶劑殘留量的檢測。

鹽酸坦洛新；原料藥；有機(jī)溶劑；殘留量；氣相色譜法

鹽酸坦洛新（tamsulosin hydrochloride）是新型抗前列腺增生藥物，屬于α－腎上腺素受體阻滯劑[1－3]，臨床主要用于治療前列腺肥大引起的排尿障礙及良性前列腺增生[4－6]。本品原料藥在合成過程中用到了多種有機(jī)溶劑[6－10]，其中甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷是2015年版《中國藥典(四部)》規(guī)定需要檢查的有機(jī)溶劑[11]，人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會（ICH）亦明確其有限度規(guī)定[12－13]。但關(guān)于同時(shí)對鹽酸坦洛新原料藥中 4種溶劑殘留量的測定，目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道[14－15]。氣相色譜法是采用氣體為流動相（載氣）流經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進(jìn)行分離測定的色譜方法，是一種高效能、選擇性好、靈敏度高的儀器分析方法，在石油化工、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測、生物化學(xué)等領(lǐng)域都得到了廣泛應(yīng)用，目前在藥品檢測中應(yīng)用最為廣泛[11]。根據(jù)我國新藥審批中對有機(jī)殘留量的要求，為了有效地控制藥品質(zhì)量保障用藥安全，本研究中采用氣相色譜法建立了同時(shí)測定鹽酸坦洛新原料藥中上述4種有機(jī)溶劑殘留量的方法。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

1．1 儀器

Agilent GC－7890A型氣相色譜儀（美國Agilent公司）；BS124S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。

1．2 試劑及樣品

甲醇、乙醇、乙腈為色譜純（進(jìn)口試劑，美國TEDIA公司）；二氯甲烷、二甲基甲酰胺為分析純（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；鹽酸坦洛新原料藥（駐馬店天方藥廠，批號分別為20160701，20160702，20160703）。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件

色譜柱：DB－FFAP毛細(xì)管氣相色譜柱（30 m× 0．53 mm，3．0 μm，美國Agilent公司）；檢測器：氫火焰離子化檢測器；載氣：氮?dú)猓贿M(jìn)樣口溫度：200℃；柱流速：1．0 mL／min；分流比：20∶1；柱溫：40℃保持6 min，然后以30℃ ／min的速率升至200℃，保持5 min；檢測器溫度：250℃；進(jìn)樣量1．0 μL。

2．2 溶液制備

分別稱取甲醇150 mg、乙醇100 mg、乙腈100 mg、二氯甲烷15 mg，精密稱定，置500 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備溶液。精密量取對照品貯備溶液5．0 mL，置10 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻即得對照品溶液。稱取樣品1．0 g，精密稱定，置10 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺適量使溶解，并用二甲基甲酰胺稀釋至刻度，作為供試品溶液。取空白溶劑適量，作為陰性對照品溶液。

2．3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性及專屬性試驗(yàn)：取按2．2項(xiàng)下方法配制的對照品溶液、供試品溶液及陰性對照品溶液，依法進(jìn)樣，氣相色譜圖見圖1。可見，理論板數(shù)以甲醇計(jì)均不低于10 000，4種有機(jī)溶劑間分離度均大于3．0，拖尾因子符合要求，其他雜質(zhì)不干擾4種有機(jī)溶劑測定。

線性關(guān)系考察：精密量取對照品貯備溶液 0．5，1．0，2．0，4．0，8．0，10．0 mL，分別置10 mL容量瓶中，再加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。依法進(jìn)樣，以各待測殘留溶劑的峰面積比為縱坐標(biāo)（Y）、質(zhì)量濃度（μg／mL）為橫坐標(biāo)（X）進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表1。

精密度試驗(yàn)：取同一供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣8次，測定峰面積。結(jié)果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷峰面積的RSD分別為 1．91%，1．83%，1．64%，2．02%（n＝8），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于配制后0，2，4，8，12，24，48，72 h時(shí)依法進(jìn)樣測定。結(jié)果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷峰面積的 RSD分別為2．28%，1．97%，1．92%，2．58%（n＝8），表明供試品溶液在72 h內(nèi)穩(wěn)定。

圖1 氣相色譜圖

表1 線性關(guān)系考察及定量限、檢出限試驗(yàn)結(jié)果

重復(fù)性試驗(yàn)：按照2．2項(xiàng)下方法配制6份供試品溶液和1份對照品溶液，在擬訂的色譜條件下進(jìn)樣測定。結(jié)果樣品中甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷平均百分含量分別為0．005 6%，0．007 8%，0．008 5%，0．002 3%，RSD分別為1．89%，2．19%，2．21%，2．80%（n＝6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：取鹽酸坦洛新原料藥1．0 g，精密稱定，共9份，分別置10 mL容量瓶中，各加入適量二甲基甲酰胺使其溶解，按照各溶劑檢查限度的80%，100%，120%，依次精密量取對照品貯備溶液4．0，5．0，6．0 mL各3份，分別加入9份樣品中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。另再配制供試品溶液1份，作為空白溶液。在擬訂的檢測條件下進(jìn)樣測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。結(jié)果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷的回收率 RSD在1．24%～1．78%范圍內(nèi)，表明方法回收率良好。詳見表2。

定量限和檢出限試驗(yàn)：稱取，甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷適量，精密稱定，加二甲基甲酰胺稀釋配制成系列不同質(zhì)量濃度溶液，分別依法進(jìn)樣分析。當(dāng) S／N＝10±1時(shí)和當(dāng) S／N＝3±1時(shí)，定量限和檢出限見表1。

2．4 樣品檢測

按照2．2項(xiàng)下方法分別配制3批供試品溶液和對照品溶液1份，在擬訂的檢測條件下進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。計(jì)算樣品中有機(jī)溶劑殘留百分含量。結(jié)果見表3，各有機(jī)溶劑殘留量均符合《中國藥典》及ICH的限度規(guī)定。

表2 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

表3 3批鹽酸坦洛新原料藥中4種有機(jī)溶劑殘留檢測結(jié)果（%）

3 討論

3．1 限度的規(guī)定

甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷均為ICH規(guī)定必須限制使用的第二類毒性試劑，限度分別為 0．300 0%，0．500 0%，0．004 1% 和 0．060 0%[13]。《中國藥典》2015年版對此四種有機(jī)溶劑殘留量的規(guī)定與ICH一致[11]。因此，選擇甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的限度分別為0．300 0%，0．500 0%，0．004 1%，0．060 0%作為鹽酸坦洛新原料藥的有機(jī)殘留限度。

3．2 溶劑的選擇

鹽酸坦洛新易溶于二甲基甲酰胺，且二甲基甲酰胺的沸點(diǎn)較高、出峰時(shí)間比較晚，不干擾各待測組分的分離，有利于各組分的檢測，故選二甲基甲酰胺作為溶劑。

3．3 色譜柱的選擇

分別考察了非極性柱DB－1柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）、中等極性柱 DB－1701柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）和極性柱 DB－FFAP柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）對4種有機(jī)溶劑的分離情況。結(jié)果表明，DB－1柱不能完全分離鹽酸坦洛新中殘留的有機(jī)溶劑；DB－1701柱對乙醇和乙腈的分離度達(dá)不到要求；DB－FFAP柱對測定的4種有機(jī)溶劑分離度明顯較好，各待測物色譜峰與相鄰色譜峰的分離度均大于3．0，符合2015年版《中國藥典》的要求。故選用極性較強(qiáng)的DB－FFAP毛細(xì)管氣相色譜柱作為測定用色譜柱。

3．4 柱溫及分流比的選擇

本研究中所測定的4種殘留溶劑的沸點(diǎn)差異較大，故采用升溫程序進(jìn)行測定。考察了4種程序升溫條件，最終確定為2．1項(xiàng)下條件為最佳程序升溫條件，分離時(shí)間較短，且分離度良好。同時(shí)考察了分流比對測定的影響，分別試驗(yàn)了分流比為20∶1，15∶1，10∶1，1∶1的色譜行為，確定最佳分流比為20∶1。

3．5 樣品的檢測

在測定鹽酸坦洛新中有機(jī)溶劑的殘留量時(shí)，鹽酸坦洛新的沸點(diǎn)較高，會殘留于色譜柱中，故以程序升溫設(shè)定最終溫度為200℃，且保持5 min，使柱子沖洗干凈，以免殘留在色譜柱中的鹽酸坦洛新對測定的目標(biāo)峰造成干擾。

3．6 方法評價(jià)

本研究中建立了同時(shí)測定鹽酸坦洛新原料藥中甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷的氣相色譜法，通過優(yōu)化氣相色譜條件，建立的檢測方法準(zhǔn)確、靈敏、專屬，故可作為鹽酸坦洛新原料藥中有機(jī)溶劑殘留的檢測方法。

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Simultaneous Determination of 4 Kinds of Residual Organic Solvents in Tamsulosin Hydrochloride Raw M edicine by Gas Chromatography

Xu Li
（Institute for Food and Drug Control of Zhumadian，Zhumadian，Henan，China 463000）

Objective To establish a method ofdetermining 4 kinds ofresidualorganic solvents（methanol，ethanol，acetonitrile，dichloromethane）in tamsulosin hydrochloride raw medicine．M ethods Capillary gas chromatography was adopted，the column was DBFFAP capillary gas chromatography column（30 m×0．53 mm，3．0 μm），the carrier gas was nitrogen with hydrogen flame ionization detector．The temperature was programmed to be 40℃ for 6 min，and then programmed to be 200℃ at 30℃ ／min to maintain for 5 min．The inlet temperature was 200℃，the detector temperature was 250℃，and the split ratio was 20∶1．Results The 4 kinds of organic solvents were separated completely，The mass concentrations of methanol，ethanol，acetonitrile and dichloromethane were linear in the range of13．50－270．00，11．56－231．20，9．57－191．32，1．36－27．20 μg／mL．The results ofrecovery testwere good．Conclusion The sensitivity and accuracy of the method can meet the requirement of organic solvent residue．It is suitable for the determination of residual organic solvents in tamsulosin hydrochloride raw medicine．

tamsulosin hydrochloride；pharmaceutical raw materials；organic solvent；residual quantity；gas chromatography

R917；R927．11

A

1006－4931(2017)14－0010－04

2017－03－15；

2017－04－07)

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．14．004

徐麗（1981－），女，碩士研究生，主管藥師，研究方向?yàn)樗幬锓治觥⑺幤窓z驗(yàn)及檢驗(yàn)技術(shù)和方法，（電子信箱）xuli0986＠163．com。