藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的測(cè)定

趙曼陜西能源職業(yè)技術(shù)學(xué)院

藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的測(cè)定

趙曼
陜西能源職業(yè)技術(shù)學(xué)院

目的建立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定藥用鹵化丁基膠塞中的抗氧劑1010和抗氧劑330。方法Agilent C18（250×4.6mm, 5μm）柱為色譜柱，以乙腈：四氫呋喃：水（55∶35∶10）作為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm。結(jié)果抗氧劑1010在0.003286～0.2103mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，抗氧劑330在0.003138～0.2008mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，兩種抗氧劑的回收率均大于85%，RSD均小于5.0%。結(jié)論本研究建立的高效液相色譜方法可滿(mǎn)足對(duì)抗氧劑1010和抗氧劑330的檢測(cè)需要，目前藥用鹵化丁基膠塞生產(chǎn)工藝中使用的抗氧劑種類(lèi)較多，對(duì)于各種類(lèi)型的抗氧劑的控制十分必要。

藥品包裝；鹵化丁基膠塞；抗氧劑；HPLC；檢測(cè)

藥品包裝影響藥品質(zhì)量安全，與藥品直接接觸的包裝材料和藥品質(zhì)量關(guān)系更為密切[1-2]。其中藥用鹵化丁基膠塞作為直接接觸藥品的包裝材料，因其具有耐化學(xué)腐蝕性好、耐酸堿和極性溶劑等諸多優(yōu)越性能在臨床上得到廣泛使用。目前臨床上注射液及注射劑品種眾多，很大部分藥品包裝使用的是鹵化丁基膠塞[3-6]。鹵化丁基膠塞是一種高分子材料，其在許多方面因素的影響下會(huì)發(fā)生老化，因此在鹵化丁基膠塞的工藝生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)加入抗氧劑改善其性能，抑制延緩其老化進(jìn)程[7-9]。抗氧劑按結(jié)構(gòu)可分為酚類(lèi)、亞磷酸酯類(lèi)、硫酯類(lèi)、金屬離子類(lèi)、天然抗氧劑等，由于其結(jié)構(gòu)，可與藥物產(chǎn)生相互作用，影響藥物穩(wěn)定性，另外抗氧劑還可能從包裝材料遷移到藥液中，影響患者用藥安全[10]。因此本研究建立了抗氧劑330、抗氧劑1010的檢測(cè)方法，考察藥用鹵化丁基膠塞中抗氧劑的添加情況，為藥用鹵化丁基膠塞的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1.儀器與試劑

圖1 混合對(duì)照溶液圖譜

1.1 儀器液相色譜儀（LC-20A型，日本島津）紫外檢測(cè)器（SPD-20A型，日本島津）；紫外分光光度計(jì)（UV-1700型，日本島津）Agilent C18色譜柱（250×4.6mm,5μm）；柱溫箱（AT-330型，日本島津）；電子天平（AUY220型，日本島津）。

1.2 試劑四[β-（3，5-二叔丁基-4-羥基苯基）丙酸]季戊四醇酯，簡(jiǎn)稱(chēng)為抗氧劑1010；1,3,5-三甲基-2,4,6-三（3,5-二叔丁基-4-羥基芐基）苯，簡(jiǎn)稱(chēng)為抗氧劑330；兩種抗氧劑均購(gòu)于EKEAR公司；本研究收集了6批藥用鹵化丁基橡膠塞包裝（購(gòu)自某醫(yī)藥公司，兩種輸液瓶：0.9%氯化鈉輸液瓶，批號(hào)分別為20170101、20170102、20170103，葡萄糖輸液瓶，批號(hào)分別為20161228、20161229、20161230，各三批）；其余試劑均為分析純或者色譜純。

2.方法

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇分別稱(chēng)取兩種抗氧劑適量，加溶劑配制成對(duì)照品溶液，使用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃面，選擇275nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2 色譜條件的選擇經(jīng)過(guò)多次調(diào)試，對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行篩選，選擇流動(dòng)相為乙腈：四氫呋喃：水=55∶35∶10，檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml/min，進(jìn)樣量為20μl。

2.3 溶液制備

2.3.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)定抗氧劑1010、330適量，加流動(dòng)相溶解稀釋?zhuān)苽浜寡鮿?010、330含量分別約為1.0mg/ml的對(duì)照品溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備

輸液包裝上藥用鹵化丁基橡膠塞取下，洗凈，常溫晾干，剪碎成顆粒。精密稱(chēng)取膠塞顆粒1.0g,的包裝放入燒瓶中，加甲苯40ml，搖勻，加熱回流2小時(shí)，冷卻至50～60℃，攪拌加入甲醇40ml，過(guò)濾，用甲苯和甲醇的等比例混合液10ml清洗燒瓶和濾渣，合并后再加等比例混合液稀釋至100ml。取上述溶液50ml，水浴蒸干，用流動(dòng)相溶解并定容至10ml，即為供試品溶液。同時(shí)，按照方法制備空白溶液。

圖2 空白溶液圖譜

3.結(jié)果

3.1 專(zhuān)屬性取對(duì)照品溶液和空白溶液，分別注入液相色譜儀中，記錄液相色譜圖，溶劑對(duì)三種抗氧劑的主峰沒(méi)有干擾，抗氧劑1010的出峰時(shí)間為10.900，抗氧劑330的出峰時(shí)間為13.700，見(jiàn)圖1-2。

3.2 線性精密量取“2.3.1”項(xiàng)下制備的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液，依次加流動(dòng)相稀釋并定容至刻度，得到線性系列對(duì)照溶液①-⑦，抗氧劑1010的濃度分別為0.2103、0.1052、0.05258、0.02629、0.013144、0.006572、0.003286mg/ml，抗氧劑330的濃度分別為0.2008、0.1004、0.0502、0.0251、0.01255、0.006275、0.003138 mg/ml。注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程。抗氧劑1010的線性回歸方程為y= 5E+06x+25379，r=0.9995；抗氧劑330的線性回歸方程為y=6E+ 06x+34570，r=0.9996；兩種抗氧劑的相關(guān)系數(shù)均大于0.999，表明抗氧劑1010在0.003286～0.2103mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，抗氧劑330在0.003138～0.2008mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.3 檢出限與定量限

取“3.2”項(xiàng)下制備的系列線性溶液⑦，使用流動(dòng)相進(jìn)行逐步稀釋測(cè)定，檢出限信噪比S/N=3，定量限信噪比S/N=10，抗氧劑1010的檢出限為0.548ng，定量限為1.096ng，抗氧劑330的檢出限為0.552ng，定量限為1.095ng。

3.4 精密度

取“3.2”線性試驗(yàn)項(xiàng)下對(duì)照溶液③對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。連續(xù)進(jìn)樣6次，抗氧劑1010的峰面積RSD為1.5%，抗氧劑1010的峰面積RSD為0.8%，均小于2.0%，表明在該條件下兩種抗氧劑精密度良好。

3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“3.2”線性試驗(yàn)項(xiàng)下對(duì)照溶液③對(duì)照品溶液，分別在室溫放置0h和24h后，注入色譜儀。抗氧劑1010的峰面積RSD為1.7%，抗氧劑330的峰面積RSD為1.3%，均小于2.0%，表明在本實(shí)驗(yàn)條件下，兩種抗氧劑在24h內(nèi)穩(wěn)定。

3.6 回收率試驗(yàn)

取“2.3.1”項(xiàng)下制備的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液，0.1、0.5、2.0ml分別加入樣品中，按照“2.3.2”項(xiàng)下供試品溶液的制備方法操作，每個(gè)濃度平行制備3份。注入色譜儀，記錄色譜圖。抗氧劑1010和抗氧劑330的平均回收率均大于85%，RSD小于5.0%，表明在本實(shí)驗(yàn)條件下，兩種抗氧劑的提取回收率良好。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩種抗氧劑的回收率試驗(yàn)結(jié)果

3.7 樣品測(cè)定

按照“2.3.2”項(xiàng)下供試品溶液的制備方法對(duì)6批藥用鹵化丁基膠塞進(jìn)行處理，制備樣品供試液，按照上述色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，樣品中兩種抗氧劑的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表2。6批藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的含量均未檢出（小于檢出限）。

表2 藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的含量測(cè)定結(jié)果

4.討論

目前藥用鹵化丁基膠塞生產(chǎn)工藝中使用的抗氧劑種類(lèi)較多，本實(shí)驗(yàn)對(duì)抗氧劑1010和抗氧劑330進(jìn)行初步研究，實(shí)驗(yàn)中購(gòu)買(mǎi)的市售0.9%氯化鈉注射液和葡萄糖注射液包裝所用的藥用鹵化丁基膠塞中抗氧劑1010和抗氧劑330的含量低于實(shí)驗(yàn)方法的檢出限。另外，研究中也發(fā)現(xiàn)提取出其他未知物質(zhì)，需要進(jìn)行下一步的確證。市場(chǎng)上生產(chǎn)藥用輸液包裝的廠家眾多，并且質(zhì)量參差不齊，對(duì)于各種類(lèi)型的抗氧劑的控制十分必要。

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趙曼（1989-），女，陜西西安人，本科，助教，研究方向?yàn)樯锛夹g(shù)及應(yīng)用。