抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義

陳向華 王建吉 耿學麗 丁萌 朱亞芹 華正祥

·論著·

抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義

陳向華 王建吉 耿學麗 丁萌 朱亞芹 華正祥

目的 對抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在SLE及其他自身免疫性疾病診斷中的意義進行深入的分析和研究。方法 收集收治的110例自身免疫性疾病患者(56例SLE、26例類風濕關節炎、10例干燥綜合征、4例強直性脊柱炎、5例系統性血管炎、6例混合性結締組織病、3例皮肌炎)的基本資料，應用蛋白印跡法對患者體內的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體等自身抗體的水平進行分析和研究，進而衡量自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義。結果 本次研究的110例自身免疫性疾病患者的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體診斷SLE的敏感性分別是38.26%、53.66%、28.18%、34.55%、30.9%。特異性分別是99.19%、99.83%、99.09%、96.45%、86.43%。抗核糖體P0蛋白抗體在本研究的110例患者中的陽性率為11.82%，抗dsDNA抗體在本研究的110例患者中的陽性率為17.27%，抗-sm抗體在本研究的110例患者中的陽性率為3.64%,抗核小體抗體在本研究的110例患者中的陽性率為4.55%,抗組蛋白抗體在本研究的110例患者中的陽性率為10.91%。結論 抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中有良好的應用價值，在實際的操作過程中要注意選擇多種類型的抗體進行組合，可以實現各種抗體之間的相互補充，有利于提高身免疫性疾病診斷的正確率。

抗核糖體P0蛋白抗體；抗dsDNA抗體；自身免疫性疾病

一般來說，自身免疫性疾病是非常嚴重的疾病類型，這種疾病的危害性比較大，治療起來也比較困難，被稱為疑難雜癥。比如系統性紅斑狼瘡(SLE)就是一種典型的自身免疫性疾病[1]。系統性紅斑狼瘡是由多種因素引起的，可累及全身多個器官和組織的炎癥性結締組織病。產生的多種自身抗體及免疫復合物可累及心臟、腎臟、肝臟等器官[2]。其發病機制主要是由于機體細胞免疫和體液免疫功能紊亂，產生多種自身抗體，形成免疫復合物，進而引起組織、器官的損傷[3]。對于自身免疫性疾病的治療來說，前期的診斷非常關鍵，相關的醫學研究指出，大多數自身免疫性疾病患者的血清里面會出現自身抗體[4]。本文進一步對抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義進行深入的分析和研究，收集我院收治的自身免疫性疾病患者110例的一般資料，然后對這些患者體內的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體等自身抗體的水平進行分析，報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 收集承德醫學院附屬醫院2015年9月至2016年9月收治的自身免疫性疾病患者110例的基本資料，經過相關的醫學檢驗，患者全部符合自身免疫性疾病的診斷標準，排除嚴重的肝腎功能障礙和精神疾病的情況。其中男45例，女65例;年齡17～87歲，平均年齡(49.11±1.55)歲。

1.2 方法 (1)對患者的血液標本進行有效收集，然后將收集到的血液標本分離出血清(3 000 r/min離心10 min)，將其放置在-20℃的冰箱中保存，以備進一步檢驗。(2)準備好本研究使用的試劑：抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體均用蛋白印跡法進行檢測，試劑由德國歐蒙醫學診斷實驗公司提供。操作方法及步驟：用樣本緩沖液將患者血清做1∶101倍稀釋，用1.5 ml樣本緩沖液預處理膜條5 min,吸去孵育槽中的液體，加入1.5 ml 稀釋好的血清樣本，室溫搖床上孵育30 min,用配好的1∶10清洗液清洗3次，每次5 min,吸去孵育槽中的液體,加入1.5 ml稀釋的酶結合物，室溫孵育30 min,用配好的1∶10清洗液清洗3次，每次5 min,吸去孵育槽中的液體,加入1.5 ml底物液，室溫孵育10 min,用蒸餾水清洗膜條3次，每次1 min,取出膜條風干并按照膜條上的條帶標記位置判讀結果，陽性反應在相應的抗原處呈現深色條帶，抗原位置無條帶出現則判讀為陰性。

1.3 評價指標 本研究主要對110例自身免疫性疾病患者的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體的敏感性和特異性陽性率進行對比。

1.4 統計學分析 應用SPSS 13.0統計軟件，計數資料比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 敏感性和特異性 110例自身免疫性疾病患者的血清抗核糖體P0蛋白抗體和抗dsDNA抗體的敏感性分別為38.26%、53.66%、28.18%、34.55%、30.9%。特異性分別是99.19%、99.83%、99.09%、96.45%、86.43%。見表1。

表1 敏感性和特異性 %

2.2 抗核糖體P0蛋白抗體陽性率 110例患者中陽性率為11.82%，抗dsDNA抗體在110例患者中的陽性率為17.27%,抗-sm抗體110例患者中的陽性率為3.64%,抗核110例患者中的陽性率為4.55%,抗組蛋白抗體在110例患者中的陽性率為10.91%。見表2。

表2 抗核糖體P0蛋白抗體陰性率 n=110

2.3 56例SLE患者中四種自身抗體的敏感性和特異性及對SLE的評價 抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體聯合檢測的特異性和陽性預測值較單項抗體檢測時有所升高，而敏感性和陰性預測值降低。見表3。

表3 四種自身抗體的敏感性和特異性及對SLE的評價 %

3 討論

自身免疫性疾病是指機體對自身抗原發生反應而導致自身組織損傷引起的疾病，這類疾病常導致機體發生病理改變和(或)功能障礙。病因和發病機制不是很清楚，可能與長期感染、物理或化學因素刺激有關，也可能與遺傳因素有關。自身免疫性疾病按致病抗原的分布范圍可分為器官特異性自身免疫性疾病和系統性自身免疫性疾病。自身免疫性疾病種類很多，但具有某些共同的臨床特點：(1)患者的血液中可以檢出高滴度的自身抗體和(或)與自身免疫組織成分起反應的致敏淋巴細胞；(2)患者組織器官為免疫炎癥的病理特征，損傷范圍與自身抗體或致敏淋巴細胞所針對的抗原分布相對應；(3)用相同的抗原在某些實驗動物中可復制出相似的疾病模型，并能通過自身抗體或相應致敏淋巴細胞使疾病在同系動物間轉移；(4)多數病因不明，常呈自發性或特發性，有些與病毒感染或服用某些藥物有關；(5)病程一般較長，多呈反復發作和慢性遷延的過程，病情的嚴重程度與自身免疫應答呈平行關系；(6)有遺傳傾向；(7)發病女性多于男性，老年人多于青少年；(8)多數患者血清中可查到抗核抗體；(9)用免疫抑制劑(如糖皮質激素等)有一定療效；(10)自身免疫病有重疊現象，既一個患者可以同時有多種自身抗體。

一般情況下來說，自身免疫性疾病的臨床表現非常復雜，診斷起來也不容易，因此進一步加強自身免疫性疾病的診斷方式和診斷手段的研究具有十分重要的意義[5]。對于自身免疫性疾病患者來說，其最明顯的特點就是會產生自身抗體，這種抗體在致病過程中發揮著十分重要的作用[6]。反過來講，通過檢測患者產生的自身抗體，可以幫助我們正確把握自身免疫性疾病的病情[7]。

SLE是比較常見的一種自身免疫性疾病。是一種可惡化或緩解的非器官特異性免疫炎性疾病，疾病活動期可累及多種組織和臟器。本病的病程常見緩解期和活動期交替發生，患者血清中可檢測出多種抗體，這些抗體有些是SLE的特異性性抗體，有些與疾病的發展有關[8]。研究發現，許多自身抗體可在其臨床癥狀及并發癥出現前被檢測到。由此可見，自身抗體的早期檢測有利于疾病的早期診斷，有利于疾病的早期治療[2，9]。

抗核糖體P蛋白抗體，又稱抗rRNP抗體，血清中出現此抗體代表SLE活動，幾乎只對SLE特異，為SLE的一標記性抗體，但對SLE患者的診斷敏感度僅為10%～20%，有報道該抗體主要與伴有精神癥狀的中樞神經損傷型SLE相關，在精神癥狀發作前及發作期抗核糖體P蛋白抗體效價升高。具有腦炎和神經病的SLE患者中，抗核糖體P蛋白抗體敏感性達56%～90%[8]。抗核糖體P蛋白抗體以五聚體的形式存在，包括P0(38kd),P19(18kd)和P2(17kd),抗核糖體P0蛋白抗體是一種多功能蛋白。本研究結果顯示抗核糖體P0蛋白抗體對SLE的敏感性達到38.26%，特異性高達99.19%，是診斷SLE比較特異性的指標。

抗dsDNA抗體對診斷SLE有較高的特異性，70%～90%的活動期SLE患者該抗體陽性，該抗體的滴度與SLE疾病活動程度相平行，隨著疾病的控制，該抗體的滴度可以下降或消失，因此該抗體可以作為SLE患者治療和預后的指標[10,11]。有報道，定期監測抗dsDNA抗體，有助于觀察SLE患者腎損傷程度，可作為狼瘡腎病的觀察指標[12]。抗dsDNA抗體診斷的特異性較高(99.83%)，但診斷的靈敏度較低(53.66%)，因此提示抗dsDNA抗體即使陰性液不能排除SLE的診斷[13]。

抗-sm抗體是SLE的標記性抗體之一，特異性達99%，但靈敏度僅20%～30%。抗-sm抗體水平不與SLE疾病的活動度相關，治療后的SLE患者也可存在抗-sm抗體陽性。抗-sm抗體的檢測對早期、不典型的SLE或治療后的回顧性診斷幫助很大[8]。有報道抗-sm抗體陽性是發生狼瘡性腎炎的特異性指標之一[14]。在本研究中，抗-sm抗體對SLE診斷的敏感性為28.18%，特異性高達99.09%，與文獻報道[12]結果一致，是診斷SLE的理想指標。

抗核小體抗體是公認的診斷SLE的標志性抗體，事實上，人們公認其為SLE血清中最早的標志性抗體[15]。在本研究中，抗核小體抗體的敏感性為34.55%，特異行為96.45%，該抗體的敏感性高于抗-sm抗體。由此證實抗核小體抗體是診斷SLE的有一個標志性抗體。

SLE患者中抗組蛋白抗體的陽性率為30%～80%，并且常常伴有抗dsDNA抗體陽性。95%以上的藥物誘導性狼瘡可出現抗組蛋白抗體[8]。本研究發現，抗組蛋白抗體的敏感性為30.9%，特異性為86.43%。因此，抗組蛋白抗體也被認為是診斷SLE的重要抗體。

自身免疫性疾病患者血清中抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體是最常見的典型抗體，因此在某種程度上來說，做好患者體內的抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA等抗體的檢測，就可以說明患者體內自身抗體的水平，這樣對于我們進一步做好自身免疫性疾病的治療具有重大的幫助作用[16]。

綜上所述，為了進一步對抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義進行深入的分析和研究，本研究收集我院110例自身免疫性疾病患者的基本資料，然后對這些患者體內的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體等自身抗體的水平進行分析。最終的結果顯示，本研究的110例自身免疫性疾病患者的血清抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗-sm、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體診斷SLE的敏感性分別是38.26%、53.66%、28.18%、34.55%、30.9%，特異性分別是99.19%、99.83%、99.09%、96.45%、86.43%。抗核糖體P0蛋白抗體在110例患者中的陽性率為11.82%，抗dsDNA抗體在110例患者中的陽性率為17.27%，抗-sm抗體在110例患者中的陽性率為3.64%,抗核小體抗體在本次研究的110例患者中的陽性率為4.55%,抗組蛋白抗體在本次研究的110例患者中的陽性率為10.91%，抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中有良好的應用價值，由于不同抗體的敏感性和特異性不同，我們在實際的操作過程中要注意選擇多種類型的抗體進行組合，這樣可以實現各種抗體之間的相互補充，有利于我們提高身免疫性疾病診斷的正確率，多種抗體聯合檢測，有助于避免疾病的漏診，從而達到早期診斷、早期治療的目的。抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中有重大意義。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2017.17.015

項目來源：承德市科學技術研究與發展計劃項目(編號：201601A031)

067000 河北省承德市，承德醫學院附屬醫院(陳向華、耿學麗、丁萌、朱亞芹、華正祥)；河北省承德縣醫院(王建吉)

R 593

A

1002-7386(2017)17-2617-04

2017-03-11)