陳潔茹, 陳曉偉,楊利敏,3
(1.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,黑龍江 佳木斯154007;2.北京大學(xué)分子研究所,北京100871;3.大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院,遼寧 大連 116600 )
果蠅幼蟲(chóng)的甘油三酯和蛋白的測(cè)定方法①
陳潔茹1, 陳曉偉2,楊利敏1,3
(1.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,黑龍江 佳木斯154007;2.北京大學(xué)分子研究所,北京100871;3.大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院,遼寧 大連 116600 )
目的:了解果蠅三齡幼蟲(chóng)甘油三酯和蛋白質(zhì)的提取方法和操作的注意事項(xiàng)。方法:選取同時(shí)間段收集的WT1118果蠅三齡幼蟲(chóng)雌雄各10只,以自制裂解液PBST進(jìn)行裂解研磨。取材后,利用甘油三酯測(cè)定試劑盒(凍干粉型)GPO-PAP法和BCA蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒,測(cè)量果蠅幼蟲(chóng)體內(nèi)甘油三酯和蛋白質(zhì)含量,對(duì)雌雄幼蟲(chóng)的甘油三酯和蛋白質(zhì)含量進(jìn)行分析。結(jié)果:發(fā)現(xiàn)雌性幼蟲(chóng)體內(nèi),無(wú)論是甘油三酯或蛋白質(zhì)含量都高于雄性幼蟲(chóng)。結(jié)論:以果蠅三齡雌性幼蟲(chóng)各10只為例,雌性幼蟲(chóng)的甘油三酯和蛋白含量均高于雄性幼蟲(chóng)。
果蠅幼蟲(chóng);提取方法;甘油三酯和蛋白質(zhì)測(cè)試盒測(cè)定法;注意事項(xiàng)
果蠅(Drosophila)是生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中不可缺少的模型,作為經(jīng)典的模式生物,本身具有自身特異的優(yōu)勢(shì)。首先,它的生長(zhǎng)周期快,在25℃條件下,大約10~14d可繁殖一代至成蟲(chóng)[1,2]。所以,為相同條件下,同時(shí)期收集同等大小及數(shù)量相同的蟲(chóng)卵提供了條件。其次,果蠅培養(yǎng)基的制作方法已經(jīng)成熟,可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)條件而改變,在此所述為果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基的制法:例如制作200mL培養(yǎng)基,(1)瓊脂:3g(2)酵母:16g(3)玉米面:15g(4)葡萄糖:4g(5)加滅菌的超純水或三蒸水補(bǔ)齊,溶質(zhì)溶劑共200mL。……