血管緊張素II-1型受體基因多態(tài)性在佳木斯地區(qū)高血壓患者中的分布①

張欣然，楊 軍， 荊洪英， 張磊藝，雷力力

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

血管緊張素II-1型受體基因多態(tài)性在佳木斯地區(qū)高血壓患者中的分布①

張欣然，楊 軍， 荊洪英， 張磊藝，雷力力

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：通過比較佳木斯地區(qū)健康人與高血壓病患者的血管緊張素II-1型受體(AGTR1)基因多態(tài)性，探討高血壓患者AGTR1不同基因型在佳木斯地區(qū)的分布情況及AGTR1是否是高血壓發(fā)病的易感因素。方法：熒光染色原位雜交法檢測(cè)高血壓患者AGTR1的基因型，使用SPSS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果：佳木斯地區(qū)高血壓患者的AGTR1三種基因型AA、AC、CC 的分布分別為88.1%、11.4%和0.5%；健康人AGTR1三種基因型AA、AC、CC的分布分別為90.5%、9.5%和0。結(jié)論：佳木斯地區(qū)AGTR1基因多態(tài)性對(duì)高血壓的發(fā)病沒有影響。

高血壓；AGRT1；基因多態(tài)性

原發(fā)性高血壓(essential hypertension，EH)是一種常見的心血管系統(tǒng)疾病，影響著全球近十億人口的健康，2000年其患病率為26.4%，預(yù)計(jì)到2025年將增加到29.2%[1]。同時(shí)，高血壓也其他心血管疾病的高危因素。雖然高血壓的發(fā)病機(jī)制尚未明確，但是國(guó)內(nèi)外的學(xué)者也進(jìn)行了大量的研究實(shí)驗(yàn)，普遍認(rèn)為，高血壓是多基因復(fù)雜性狀疾病，主要受生活習(xí)慣和遺傳因素的影響[2]。高血壓的主要治療方法是依靠藥物治療，但是近年來個(gè)體化醫(yī)療逐漸成為研究的重點(diǎn)，遺傳因素對(duì)高血壓和藥物的影響占20%～55%。

AGTR1(angiotensin II receptor, type 1)血管緊張素II-1型受體，是由血管緊張素原(AGT)轉(zhuǎn)化而成，AGT是RAAS系統(tǒng)(腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng))的初始底物，而RAAS系統(tǒng)是人機(jī)體中主要的血壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)，對(duì)高血壓及其他心血管疾病的研究有著重要的意義[3]。AGTR1分布于心臟、血管、腦等組織中，它介導(dǎo)了AngII(血管緊張素II)的大多數(shù)生物作用，而AngII是產(chǎn)生高血壓的主要因素，AngII與血管緊張素受體結(jié)合，導(dǎo)致血管收縮，血壓升高。AGTR1是一種G蛋白偶聯(lián)受體，突變位點(diǎn)較多，其中A1166C是近年來極具研究意義的位點(diǎn)，野生型A被認(rèn)為是高血壓的保護(hù)位點(diǎn)，而突變型C是高血壓的危險(xiǎn)因素[4]。

本研究通過檢測(cè)佳木斯地區(qū)健康人和高血壓患者的AGTR1基因型，通過基因型的比較來分析AGTR1與高血壓的關(guān)系，確定AGTR1基因多態(tài)性在佳木斯地區(qū)的分布情況。并對(duì)佳木斯地區(qū)的基因分布與多地區(qū)的基因分布進(jìn)行了比較。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

病例組：2015-10～2016-05本院門診及住院高血壓患者236例，均為漢族，其中男109例，女127例，平均年齡(50.43±12.00)歲，患者均符合2010年《中國(guó)高血壓病防治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)，收縮壓》140mmHg，舒張壓》90mmHg。對(duì)照組：未患高血壓受試者169例，均為漢族，其中男94例，女75例，平均年齡(48.19±8.44)歲，排除：繼發(fā)性高血壓；心臟疾病；肝腎功能不全；慢性肝臟疾病及膽道梗阻性疾病史；高鉀血癥；妊娠及哺乳期婦女。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑 PHARM-GENE 01 SNP分析保存液，PHARM-GENE 200 SNP分析樣品處理試劑(北京華夏時(shí)代基因科技發(fā)展有限公司)。

1.2.2 儀器 TL-988實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(西安天隆科技儀器有限公司)，微測(cè)序基因分析程序(北京華夏時(shí)代基因科技發(fā)展有限公司)，HC-3017高速離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司)。

1.3 方法

基因型檢測(cè)采用熒光染色原位雜交法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，各組間比較采用方差分析和χ2檢驗(yàn)。用Hardy-Winberg平衡定律檢驗(yàn)各等位基因頻率是否符合群體遺傳學(xué)規(guī)律。所有檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

（6）Who Owns Your Dinner?A Discussion of America's Patented Genetically Engineered Food Sources,and Why Reform is Necessary（誰將擁有你的餐桌？論美國(guó)基因工程食品專利及其改革的必要性）。

2 結(jié)果

2.1 基因多態(tài)性分布

對(duì)健康人(169例)和高血壓患者(236例)進(jìn)行AGTR1基因型檢測(cè)，測(cè)得的基因型及基因頻率見表1。健康人與高血壓患者A、C等位基因頻率經(jīng)χ2檢驗(yàn)，χ2=1.000，P=1.000，P>0.05差異沒有顯著性；AAACCC三種基因型χ2檢驗(yàn)，χ2=1.093，P=0.579，P>0.05差異沒有顯著性。

表1 健康人和高血壓患者AGTR1基因型分布頻率(%)

從統(tǒng)計(jì)結(jié)果可見，本研究中高血壓患者的等位基因頻率及基因型分布與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)一致，差異沒有顯著性；本研究健康人與高血壓患者等位基因頻率差異沒有顯著性，三種基因型分布頻率差異無顯著性，提示高血壓的發(fā)生與AGTR1的基因型變異可能不具有相關(guān)性，但由于檢驗(yàn)數(shù)據(jù)比較少，有待于進(jìn)行大樣本數(shù)據(jù)分析。

2.2 佳木斯地區(qū)健康人與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)健康人基因型比較

對(duì)佳木斯地區(qū)健康人與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)健康人AGRT1基因型進(jìn)行比較，見表2。

表2 佳木斯地區(qū)和國(guó)內(nèi)不同地區(qū)漢族健康人AGTR1基因型分布頻率(%)

對(duì)佳木斯地區(qū)健康人基因型分布與國(guó)內(nèi)各地區(qū)健康人基因型分布進(jìn)行卡方檢驗(yàn)得出：佳木斯?jié)h族健康人基因型分布與貴州和四川有差異性，但與其他地區(qū)無差異性，但還需大量樣本研究。

2.3 佳木斯地區(qū)健康人與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)不同民族健康人基因型比較

對(duì)佳木斯地區(qū)健康人與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)不同民族健康人AGTR1基因型進(jìn)行比較，見表3。

表3 佳木斯地區(qū)和國(guó)內(nèi)不同民族健康人AGTR1基因型分布頻率(%)

對(duì)佳木斯地區(qū)健康人基因型分布與國(guó)內(nèi)不同民族健康人基因型分布進(jìn)行卡方檢驗(yàn)得出，佳木斯地區(qū)健康人基因型分布與內(nèi)蒙古蒙古族有差異性，其他地區(qū)并沒有差異性，由此得出基因型分布民族差異性并不明顯。

2.4 佳木斯地區(qū)高血壓患者與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)漢族高血壓患者基因型比較

對(duì)佳木斯地區(qū)高血壓患者與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)漢族的高血壓患者AGTR1基因型進(jìn)行比較，見表4。

表4 佳木斯地區(qū)和國(guó)內(nèi)不同地區(qū)漢族高血壓患者AGTR11基因型分布頻率(%)

對(duì)佳木斯地區(qū)高血壓患者基因型分布與國(guó)內(nèi)各地區(qū)高血壓患者基因型分布進(jìn)行卡方檢驗(yàn)得出，佳木斯地區(qū)的高血壓患者基因型分布僅與湖南地區(qū)有差異性，與其他地區(qū)均無差異性。

2.5 佳木斯地區(qū)高血壓患者與不同種族高血壓患者基因型比較

對(duì)佳木斯地區(qū)高血壓患者與不同種族的高血壓患者AGTR1基因型進(jìn)行比較，見表5。

表5 佳木斯地區(qū)和不同民族高血壓患者AGTR1基因型分布頻率(%)

對(duì)佳木斯地區(qū)高血壓患者基因型分布與不同民族高血壓患者基因型分布進(jìn)行卡方檢驗(yàn)得出，佳木斯地區(qū)高血壓患者的基因分布與內(nèi)蒙古蒙古族有差異性，與其他地區(qū)無差異性，可以得出高血壓患者的基因分布民族差異性并不大。

3 討論

隨著精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展，一些藥物相關(guān)基因多態(tài)性與疾病的相關(guān)性研究越來越受關(guān)注，為臨床疾病的診斷和治療提供了依據(jù)[9,10]。黑龍江東部地區(qū)佳木斯為高血壓的高發(fā)區(qū)，而高血壓又是多種心腦血管疾病的危險(xiǎn)因素，本研究通過檢測(cè)AGRT1的基因突變，首次報(bào)道佳木斯地區(qū)高血壓患者中AGTR1基因多態(tài)性分布，比較了佳木斯地區(qū)高血壓患者和健康人之間的基因型分布差異，結(jié)果顯示本地區(qū)高血壓患者與健康人等位基因頻率無差異顯著性，三種基因型分布頻率無顯著性，提示高血壓病的發(fā)生與AGTR1的基因變異可能不具有相關(guān)性，但由于檢驗(yàn)數(shù)據(jù)比較少，有待于進(jìn)行大樣本數(shù)據(jù)分析。對(duì)佳木斯地區(qū)的健康人和高血壓患者的基因分布與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)進(jìn)行了對(duì)比，得出AGTR1的基因分布國(guó)內(nèi)差異較小，但是湖南地區(qū)健康人與高血壓患者的基因型分布均與佳木斯地區(qū)有顯著差異性，考慮為地域或者生活環(huán)境因素造成的影響，還需進(jìn)一步研究。

[1]Thoenes M, Neuberger H R, Volpe M, et al. Antihypertensive drug therapy and blood pressure control in men and women: an international perspective[J]. J Hum Hypertens, 2010, 24(5):336-334

[2]袁芳. 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶和血管緊張素II受體-1基因多態(tài)性與原發(fā)高血壓的關(guān)聯(lián)研究[D].寧波大學(xué), 2013

[3]David F,Friedrich CL, Michaelib B, et al. Emergence and evolution of the rennin-Angiotensin-aldosteron system[J]. J MOL Med, 2012, 90(5):495-508

[4]湛文博,阿衣古麗·玉努斯,丁瑋,等. AT1R基因A1166C多態(tài)性與新疆維吾爾族人群原發(fā)性高血壓的關(guān)系[J]. 吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2014，(1) ：137-140

[5]種志雄，劉大男，王紹紅，等. AT1R基因A1166C多態(tài)性與貴州布依族、漢族原發(fā)性高血壓的相關(guān)性研究[J]. 臨床心血管病雜志，2016，32(4): 372-376

[6]張迎軍，武慧強(qiáng)，劉曉宇. 蒙古族人群原發(fā)性高血壓與AngII受體1基因多態(tài)性相關(guān)性研究[J]. 中外醫(yī)療，2013，(3):48-49

[7]楊榆玲，龍莉，瞿秋，等. 血管緊張素II-1型受體A1166C多態(tài)性在云南彝族人群中的分布[J]. 昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012(5): 43-46

[8]張強(qiáng),崔天祥,李莉,等.血管緊張素Ⅱ-1型受體基因多態(tài)性與高血壓及血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2012(14):2926-2927

[9]左璐，方芳，楊軍，等.佳木斯地區(qū)健康人群與高血壓患者CYP3A4*1G基因多態(tài)性分析[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2015，38(1):7-9

[10]杜美霖，方洪壯，張?zhí)煊ⅲ?ACE基因多態(tài)性在佳木斯正常人高血壓患者中的分布[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2015,38(3):161

佳木斯大學(xué)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目，編號(hào)：LM2015_090。

張欣然(1990～)女，黑龍江雙鴨山人，在讀碩士研究生。

雷力力(1958～)女，黑龍江佳木斯人，學(xué)士，主任藥師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:leill888@126.com。

R554.1

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1008-0104(2017)04-0065-03

2016-09-09)