精氨酸復合體對釉質人工齲的影響①

王佳琦，王健平，董 波，李冬梅，馮 瑤

(佳木斯大學附屬口腔醫院，黑龍江 佳木斯 154002)

精氨酸復合體對釉質人工齲的影響①

王佳琦，王健平，董 波，李冬梅，馮 瑤

(佳木斯大學附屬口腔醫院，黑龍江 佳木斯 154002)

目的：研究含精氨酸復合材料對人工釉質齲是否具有促進早期齲再礦化的作用。方法：30顆健康前磨牙標本唇側脫礦2周后隨機分為3組分別浸泡在精氨酸復合體溶液，氟化鈉溶液及人工唾液內，3次/d，10min/次，循環浸泡 20d。結果：電鏡下觀察浸泡在精氨酸復合體溶液中的牙釉質表面較浸泡在其他兩溶液中的牙釉質表面無空隙存在；浸泡在精氨酸復合體溶液中的牙釉質表面顯微硬度高于浸泡在其他兩溶液中的牙釉質表面顯微硬度(P<0.01)。結論：含氟精氨酸復合體在體外實驗中能促進早期釉質齲的再礦化。

精氨酸；生物活性玻璃；釉質人工齲

齲病是口腔最主要的高發病之一，齲病的預防也是口腔醫學工作者主要研究內容[1]。牙釉質在牙體組織的最外層，承擔著的防御細菌侵蝕的作用。齲損早期是逆轉齲病進展的最佳時期[2]。在齲病的發生早期進行干預治療可以有效防止齲病的發展。氟在口腔醫療中的應用為齲病的早期治療帶來了福音，但是人體內含氟量過高，對牙齒、骨骼影響很大。一旦出現慢性氟中毒現象，會使恒牙表面釉質無光澤，呈白堊色[3]。如何在低氟環境下取得更大的礦化效果成為口腔醫務人員的共同目的。精氨酸牙膏對牙本質過敏的顯著作用已經有過多次報道，但對牙釉質的再礦化作用卻沒有相關研究[4]。在口腔正常的生理條件下，口腔環境呈堿性，精氨酸與碳酸鈣結合更有利于鈣和磷酸在釉質表面沉積，從而促進早期齲再礦化[5]。本實驗主要將精氨酸復合體作用于早期釉質齲的標本上，觀察實驗材料對早期釉質齲的再礦化作用，為精氨酸的臨床應用提供理論支持。再礦化是對抗致齲因素的一種自然修復過程。唾液蛋白具有半透膜作用，可以調節口腔菌群的平衡和各種離子的平衡[6]，同時，可以在釉質表面形成無細胞結構的薄膜，精氨酸還是pH緩沖劑[7]。可以使鈣離子和磷酸根離子在堿性環境下沉積在釉質表面，更有利于早起釉質齲的礦化。

1 材料和方法

1.1 設計

對照觀察實驗。試驗材料：頜面外科提供正畸需要拔除的第一二前磨牙，要求釉質發育良好，無脫鈣、無齲壞、無劃痕和裂紋，非氟斑牙、四環素牙。

精氨酸復合體：主要成分精氨酸，生物活性玻璃(天津市凱通化學試劑有限公司)。0.14%氟化鈉溶液用氟化鈉(天津市凱通化學試劑有限公司)。人工唾液(20mmol/L次氯酸鈉，3mmol/L磷酸二氫鈉，1mmol/L氯化鈣 pH值7.0～7.2)；脫礦液(2.2mmol/L硝酸鈣，2.2mmol/L磷酸二氫鉀，50mmol/L乙酸 pH值4.5)。

精氨酸復合體對釉質人工齲的影響實驗用到的主要儀器。DK-600B 型電熱恒溫水槽上海森信實驗儀器有限公司。HVS-1000 型數顯顯微硬度計上海聯爾實驗設備有限公司。硬組織切割機 Struers Minitom,丹麥。JSM-6360LV 型掃描電鏡日本電子株式公社。

1.2 實驗方法

離體牙人工釉質齲標本的制備：將挑選的30顆離體牙用清水沖洗干凈，用高速渦輪去除根部，去除牙菌斑、色素。在唇側齦方預留邊長4mm的方形開窗實驗區，其他區域用紅色抗酸指甲油覆蓋。開窗區依次在600，800，1 000，1 200，2 400#碳化硅砂紙流水下磨平拋光，去離子水沖洗吹干,將30顆離體浸泡在脫礦液中，置于37℃的恒溫水浴箱中2周，每日更換脫礦液(8:00am)。2周后取出離體牙，去離子水清洗，觀察離體牙頰面開窗區已形成的白堊色脫礦區。

1.3 實驗分組及標本的藥物處理

1.3.1 將30顆制備好的離體牙釉質人工齲標本的隨機分為ABC三組，每組10顆，A組為精氨酸復合體溶液處理組，B組為氟化鈉溶液處理液處理組，C組為人工唾液處理液處理組。

模擬人群作息時間采用循環法，A組浸泡在精氨酸復合體處理液中10min后取出再放置于脫礦液中1h，再放置于去離子水中4h；脫礦液中放置1h，取出后浸泡在處理液中10min,再放置于去離子水中4h；脫礦液中放置1h，取出后浸泡在處理液中10min,再放置于去離子水中至次日清晨。BC組按照相同循環方法相同時間在氟化鈉處理液或人工唾液中循環24h。實驗的總循環時間為20d，在37 ℃水浴槽中進行。浸泡完畢用去離子水沖洗牙面1min。

1.4 主要觀察指標

肉眼觀察釉質表面脫礦部位顏色變化，用掃描電鏡觀察各組標本牙釉質表面孔隙及平滑情況。用顯微硬度計測量脫礦前后牙釉質表面顯微硬度值，負荷20g，作用10s，每牙隨機測量5個點，取平均值。

1.5 統計學方法

采用SPSS 13.0軟件數據處理， forWindows中的配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 掃描電鏡結果

釉質人工齲標本顯微鏡下可見釉質表面呈現出凹凸不平有空隙的蜂窩狀的結構，表面極其不平整，見圖1；精氨酸復合體溶液處理的A組掃描電鏡下觀察發現，釉質表面由蜂窩狀凹凸不平的結構轉變為平滑完整的結構，有少量白色顆粒沉積，未見空隙存在，見圖2 。氟化鈉礦化液處理組組B組，掃描電鏡下觀察發現，釉質表面脫礦后的蜂窩狀空隙基本消失，偶爾有小的空隙存在，觀察表面凹凸不平，可見球狀突起，見圖3。人工唾液組C組，掃描電鏡下觀察發現，雖然脫礦后的蜂窩狀空隙有所減輕，但是牙釉質表面仍有空隙，表面不完整，為顆粒狀沉積。

2.2 牙釉質標本顯微硬度檢測結果

實驗組、陽性對照組和陰性對照組兩兩比較顯微硬度值有非常顯著性意義(P<0.01)。見表1。

表1 釉質人工齲標本經各組處理液處理后顯微硬度對比±s)

A組和B性對照組顯微硬度值比較有非常顯著性意義(t=24.15,P<0.01)；A組和C組顯微硬度值比較有非常顯著性意義(t=26.25,P<0.01)；B組和C組顯微硬度值比較有非常顯著性意義(t=14.62,P<0.01)。

3 討論

掃描電鏡作為作為常用檢測儀器，分別對三組再礦化后標本進行檢測：人工唾液組C組，掃描電鏡下觀察發現，雖然脫礦后的蜂窩狀空隙有所減輕，但是牙釉質表面仍有空隙，表面不完整，為顆粒狀沉積。分析人工唾液中的鈣、磷離子含量較少，脫礦與再礦化交替進行的環境下，再礦化效果不明顯。氟化鈉礦化液處理組組B組，掃描電鏡下觀察發現，釉質表面脫礦后的蜂窩狀空隙基本消失，偶爾有小的空隙存在，觀察表面凹凸不平，可見球狀突起。大量密集的白色顆粒出現,比較疏松,可能是CaF2類結晶沉淀。分析可能親骨性的氟離子沉積在釉質表面，鈣離子體積較小迅速滲入釉質孔隙中;磷酸根離子深入釉質孔隙的速度比較慢，因此,電鏡下可見釉質表面大量的大小比較均勻的白色顆粒狀沉積物。精氨酸復合體溶液處理的A組，掃描電鏡下觀察發現，釉質表面由蜂窩狀凹凸不平的結構轉變為平滑完整的結構，有少量白色顆粒沉積，未見空隙存在 。分析原因可能是精氨酸與納米生物活性玻璃混合液能夠將口腔內環境調節至堿性，有利于精氨酸-碳酸鈣基團的沉積，從而促進早期齲再礦化。納米級生物活性玻璃中的鈣、磷、氟離子更容易沉積到釉質脫礦的細小孔隙中，所以較氟化鈉C組釉質更光滑，結構更均勻。氨基酸引導納米生物活性玻璃中的鈣、磷離子沉積進入脫礦的釉質表面，再礦化液能獨立于唾液發揮很好的再礦化效果,再礦化過程所需的鈣、磷、氟離子的大量沉積于釉質表面,填補釉柱間的脫礦間隙，同時也對釉質表面局部的小凹陷進行了修復，所以此組較B組礦化效果更好。3組實驗分別進行顯微硬度值檢測，結果顯示牙釉質表面的硬度值較脫礦后釉質表面硬度值均有增加，精氨酸復合體組處理后，牙釉質表面的硬度值較其他兩組更高，也證明了精氨酸復合體對早期人工牙釉質齲有再礦化的作用。精氨酸(屬堿性氨基酸. 在生理pH條件下,pH10.5～12.0) ,易溶于水，且目前已發現精氨酸是動物體內功能最多的氨基酸。精氨酸具有提高人體的免疫力、促進肌肉合成、促進腸道發育等功效。而精氨酸對牙體硬組織的研究雖主要局限在對牙本質敏感的研究1，但仍已證實精氨酸作為口腔內唾液蛋白中的一種，其本身具有一定的緩沖作用，能降低釉質在酸性溶液中的溶解度。精氨酸與碳酸鈣混合液能夠將口腔內環境調節至堿性，從而有利于精氨酸-碳酸鈣基團的沉積[8]。本實驗證實在體外模擬口內環境的模型上，精氨酸復合體可使發生脫礦的羥基磷灰石形成富含鈣的礦物層沉積到到釉質表面，利于牙釉質的再礦化。能滿足口腔臨床的應用，使用精氨酸復合體對釉質人工齲再礦化是可行的，能擴大在臨床的應用范圍。

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王佳琦(1980～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，主治醫師。

R781.1

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1008-0104(2017)04-0180-02

2015-12-01)