薛雙/河南駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心
駐馬店市豬群主要疫病流行情況調(diào)查
薛雙/河南駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心
為了解當(dāng)前駐馬店市豬群主要疫病流行情況,掌握豬群主要發(fā)病及死亡原因,定期從市內(nèi)3個(gè)無(wú)害化處理廠采集病死動(dòng)物組織樣品,進(jìn)行豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征(豬藍(lán)耳病)、口蹄疫、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病2型、豬圓環(huán)病毒病3型、豬細(xì)小病毒病、豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉、副豬嗜血桿菌病、弓形蟲(chóng)病共計(jì)11種病的病原核酸檢測(cè),現(xiàn)將具體情況報(bào)告如下。
1.樣品的采集。自2017年5月~7月,每月每廠隨機(jī)按批次采集不少于5份病死豬的脾臟、肺臟、淋巴結(jié)、腦、扁桃體、胸腹腔積液等組織樣品,標(biāo)記清楚,并填寫(xiě)樣品采集登記表,共采集48份組織樣品。

表1 樣品中病原核酸檢測(cè)結(jié)果
2.樣品的處理。每份樣品中將不同組織按1∶1的體積比例剪取后放入2 ml離心管中,加入適量生理鹽水,在高通量組織研磨儀中研磨后-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
3.儀器與耗材。移液器由德國(guó)Eppendorf公司生產(chǎn);實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀及全自動(dòng)核酸提取儀由西安天隆科技有限公司生產(chǎn);高通量組織研磨儀由德國(guó)QIGEN公司生產(chǎn);無(wú)酶Tip頭及PCR管由美國(guó)Axygen公司生產(chǎn)。
4.試劑。豬瘟病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、口蹄疫病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬偽狂犬病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒、豬細(xì)小病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒、弓形蟲(chóng)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒、豬圓環(huán)病毒2型和3型雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒均由北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn);豬繁殖與呼吸綜合征病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬流行性腹瀉病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬傳染性胃腸炎病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、副豬嗜血桿菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒均由洛陽(yáng)萊普生信息科技有限公司生產(chǎn)。
5.檢測(cè)方法。具體操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
6.結(jié)果判定。豬瘟、口蹄疫、豬細(xì)小病毒核酸Ct值≤30為陽(yáng)性,Ct值≥37或無(wú)Ct值為陰性,30<Ct值<37為可疑,復(fù)檢仍是可疑可判為陽(yáng)性;豬弓形蟲(chóng)核酸Ct值≤30為陽(yáng)性,無(wú)Ct值為陰性;豬偽狂犬、豬圓環(huán)病毒(2型和3型)Ct值≤30為陽(yáng)性,Ct值>35或無(wú)Ct值為陰性,30<Ct值≤35為可疑,復(fù)檢仍是可疑可判為陽(yáng)性;豬傳染性胃腸炎病毒核酸Ct值≤30為陽(yáng)性,無(wú)Ct值為陰性;豬流行性腹瀉病毒核酸Ct值≤30為陽(yáng)性,無(wú)Ct值為陰性;副豬嗜血桿菌核酸Ct值≤36為陽(yáng)性,36<Ct值<38為可疑,復(fù)檢仍是可疑可判為陽(yáng)性,無(wú)Ct值為陰性;豬藍(lán)耳病病毒核酸Ct值≤35為陽(yáng)性,35<Ct值≤38為可疑,復(fù)檢仍是可疑可判為陽(yáng)性,Ct值>38或無(wú)Ct值為陰性。
經(jīng)過(guò)對(duì)48份組織樣品進(jìn)行病原核酸檢測(cè),結(jié)果顯示:豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病、豬流行性腹瀉、副豬嗜血桿菌病病原核酸檢測(cè)呈陽(yáng)性,豬瘟、口蹄疫、豬傳染性胃腸炎、弓形蟲(chóng)病原核酸檢測(cè)呈陰性。詳情如表1所示。
1.根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,說(shuō)明近期我市豬只病死原因主要由豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病、豬流行性腹瀉、副豬嗜血桿菌病引起。
2.豬圓環(huán)病毒3型是近期才由國(guó)外率先報(bào)道出的新型病毒毒株,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,48份組織樣品中有2份呈圓環(huán)病毒3型核酸陽(yáng)性,這也表明我市已有該種病毒毒株的存在,實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)加強(qiáng)防控。