紫花前胡中化學成分的研究

廖志超+姜鑫+田文靜+林挺 陳海峰

[摘要]采用HP20大孔吸附樹脂、ODS、硅膠柱色譜、Sephadex LH20柱色譜和半制備HPLC等色譜分離手段對紫花前胡的化學成分進行研究。結合理化性質及MS， NMR等譜學數據鑒定化合物的結構，從紫花前胡80%乙醇提取物中分離并鑒定了12個化合物，分別是（9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester（1）、 補骨脂呋喃香豆精（2）、順式3′，4′二千里光?；?′，4′二氫邪蒿內酯（3）、（3′R，4′R）3′angeloyloxy4′senecioyloxy3′，4′dihydroseselicalipteryxin（4）、（+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3h]chromen9yl3methylbut2enoate（5）、libanoridin（6）、絲立尼亭（7）、花椒素（8）、crocatone（9）、peujaponisinol B（10）、 peujaponisinol A（11）、ostenol（12）。其中，化合物1～5為首次從當歸屬植物中分離得到，化合物 7～12為首次從紫花前胡中分離得到。

[關鍵詞]當歸屬； 紫花前胡； 香豆素； 化學成分

Chemical constituents from root of Angelica decursiva

LIAO Zhichao， JIANG Xin， TIAN Wenjing， LIN Ting*， CHEN Haifeng*

（School of Pharmaceutical Sciences， Xiamen University， Xiamen 361102， China）

[Abstract]The compounds were isolated and purified by HP20 macroporous adsorption resin， ODS， silica gel， and Sephadex LH20 column chromatography， as well as semipreparative HPLC chromatography from the 80% ethanol extract of the root of Angelica decursiva， and their structures were identified based on their physiochemical properties and spectroscopic data Twelve compounds were structures were identified as （9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester （1）， bakuchicin （2）， （3′， S，4′S）disenecioyloxy3′，4′dihydroseselin （3）， （3′R，4′R）3′angeloyloxy4′senecioyloxy3′，4′dihydroseselincalipteryxin （4）， （+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3h]chromen9yl3methylbut2enoate （5）， libanoridin （6）， selinidin （7）， suberosin （8）， crocatone （9）， peujaponisinol B （10）， peujaponisinol A （11）， and ostenol （12）， respectively Compounds 15 were isolated from the plants of Angelica genus for the first time Compounds 712 were isolated from A decursiva for the first time

[Key words]Angelica； Angelica decursiva； coumarins； chemical constituents

中藥紫花前胡是傘形科Umbelliferae當歸屬Angelica植物紫花前胡A decursiva的干燥根。紫花前胡為多年生草本植物，根圓錐狀，常數支根，表面黃褐色至棕色；具有疏散風熱，降氣化痰的功效[1]。紫花前胡中的主要化學成分為香豆素類化合物。香豆素是廣泛分布于植物界中的次生代謝產物，最早報道于1820年，迄今已有1 300多種[2]?，F代藥理學研究表明，香豆素類化合物具有抗神經衰弱、抗凝血、抗氧化、抗菌、抗癌、抗結核、降血糖、抗抑郁、抗炎等多方面的藥理活性[3]，在藥物的研究開發中發揮了重要的作用。本文以富含香豆素類成分的紫花前胡為研究對象，從其80%乙醇提取物中分離鑒定了12個化合物。

1材料

Thermo Scientific Q Exactive質譜儀（賽默飛公司）；Bruker Avance 600Ⅲ 型核磁共振儀（瑞士Bruker公司）；LC20A 分析型高效液相色譜儀（日本島津公司）；LC8A制備型高效液相色譜儀（日本島津公司）；半制備HPLC色譜柱（北京綠百草科技發展有限公司 Prep C18，10 mm×150 mm，5 μm） ； Sephadex LH20 填料（Pharmacia） ； ODS（40～63 μm，Pharmacia）； 大孔樹脂型號為 HP20（北京綠百草科技發展有限公司） ； 柱色譜用硅膠（200～300目） 及薄層色譜用GF254硅膠預制板（青島海洋化工廠）。有機溶劑均為分析純或色譜純。endprint

紫花前胡飲片經永春縣林業局鄒秀紅工程師鑒定為傘形科當歸屬植物紫花前胡A decursiva的干燥根。

2 提取分離

紫花前胡根飲片100 kg，以80%乙醇回流提取2次，每次3 h，合并乙醇提取液，濃縮得到浸膏20 kg。用蒸餾水混懸浸膏后，利用大孔樹脂進行不同極性部分的分離。用乙醇水進行洗脫，得到水洗脫部分、20%乙醇部分、60%乙醇部分和95%乙醇部分。將95%乙醇洗脫部分（4141 g）進行硅膠柱色譜分離，用氯仿甲醇系統（100∶0～0∶1）進行梯度洗脫，得到10個流分（Fr D1～D10）。Fr D1用水混懸，依次用石油醚和氯仿萃取，得到氯仿萃取物Fr D1B（903 g）。Fr D1B經硅膠柱色譜，用石油醚丙酮（30∶1～20∶1）進行梯度洗脫，得到7個流分（Fr D1B1～D1B7）。Fr D1B3 經Sephadex LH20柱色譜、反相柱色譜以及半制備HPLC純化得到化合物2（85 mg） 和其他6個流分（Fr D1B3A1～D1B3A7）。Fr D1B3A3經半制備HPLC純化得到化合物9（29 mg）；Fr D1B3A5經半制備HPLC純化得到化合物7（79 mg）和 8（22 mg）；Fr D1B6經反相柱色譜以及半制備HPLC純化得到化合物10（20 mg），11（28 mg），12（45 mg）；Fr D1B5經反相柱色譜，依次用甲醇水（60∶40～80∶20）梯度洗脫，得到10個流分（Fr D1B5A～D1B5J）；Fr D1B5D經半制備HPLC純化得到化合物6 （58 mg）和 1（71 mg）；Fr D1B5E經半制備HPLC純化得到化合物5（60 mg）；Fr D1B5H經反相柱色譜得到5個流分（Fr D1B5H1～D1B5H5）；Fr D1B5H2經半制備HPLC純化得到化合物3（428 mg）；Fr D1B5H5經半制備HPLC純化得到化合物4（185 mg）。

3結構鑒定

化合物1無色油狀，ESIMS m/z 383 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 624（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），735（1H，d，J=83 Hz，H5），681（1H，d，J=83 Hz，H6），530（1H，d，J=47 Hz，H3′），655（1H，d，J=47 Hz，H4′），209（3H，s，H2″），245（1H，dq，J=160，76 Hz H2），242（1H，dq，J=160，76 Hz H2），120（3H，dd，J=76 Hz，H3），145（3H，s，H5′），141（3H，s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1132（C3），1433（C4），1126（C10），1292（C5），1144（C6），1566（C7），1070（C8），1540（C9），775（C2′），702（C3′），608（C4′），1700（C1″），207（C2″），1734（C1），275（C2），91（C3），227（C5′），248（C6′）。以上數據與文獻[4]對比，確定該化合物為（9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester。

化合物2無色針狀，ESIMS m/z 209 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 640（1H，d，J=95 Hz，H3），781（1H，d，J=95 Hz，H4），744（1H，d，J=83 Hz，H7），738（1H，d，J=83 Hz，H8），770（1H，d，J=19 Hz，H2′），714（1H，d，J=19 Hz，H3′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1609（C2），1445（C3），1141（C4），1169（C10），1574（C5），1135（C6），1238（C7），1088（C8），1485（C9），1041（C2′），1459（C3′）。以上數據與文獻[5]對比，確定該化合物為補骨脂呋喃香豆精。

化合物3白色粉末，ESIMS m/z 449 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 620（1H，d，J=95 Hz，H3），759（1H，d，J=95 Hz，H4），734（1H，d，J=84 Hz，H5），680（1H，d，J=84 Hz，H6），540（1H，d，J=49 Hz，H3′），662（1H，d，J=49 Hz，H4′），144（3H，s，H5′），142（3H，s，H6′），567（1H，q，J=12 Hz，H2″），188（3H，d，J=09 Hz，H4″），187（3H，d，J=09 Hz，H5″），562（1H，q，J=12 Hz，H2），219（3H，d，J=08 Hz，H4），215（3H，d，J=08 Hz，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1131（C3），1432（C4），1125（C10），1290（C5），1144（C6），1568（C7），1076（C8），1540（C9），777（C2′），694（C3′），598（C4′），251（C5′），226（C6′），1651（C1″），1152（C2″），1575（C3″），274（C4″），203（C5″），1652（C1），1153（C2），1582（C3），274（C4），203（C5）。以上數據與文獻[6]對比，確定該化合物為順式3′，4′二千里光?；?′，4′二氫邪蒿內酯。

化合物4白色粉末，ESIMS m/z 449 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），758（1H，d，J=95 Hz，H4），735（1H，d，J=86 Hz，H5），680（1H，d，J=86 Hz，H6），540（1H，d，J=49 Hz，H3′），665（1H，d，J=49 Hz，H4′），144（3H，s，H5′），149（3H，s，H6′），611（1H，qq，J=74，13 Hz，H2″），196（3H，dq，J=74，13 Hz，H4″），185（3H，q，J=12 Hz，H5″），561（1H，m，H2），219（3H，d，J=12 Hz，H4），187（3H，d，J=13 Hz，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1133（C3），1432（C4），1125（C10），1291（C5），1144（C6），1567（C7），1076（C8），1540（C9），775（C2′），703（C3′），595（C4′），255（C5′），225（C6′），1663（C1″），1272（C2″），1394（C3″），158（C4″），204（C5″），1659（C1），1151（C2），1579（C3），274（C4），204（C5）。以上數據與文獻[7] 對比，確定該化合物為（3′S，4′S）disenecioyloxy3′，4′dihydroseselin。endprint

化合物5無色油狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），760（1H，d，J=95 Hz，H4），740（1H，d，J=84 Hz，H5），690（1H，d，J=84 Hz，H6），450（1H，d，J=65 Hz，H2′），700（1H，d，J=65 Hz，H3′），142（3H，s，H2″），140（3H，s，H3″），560（1H，brs，H2），190（3H，s，H4），220（3H，s，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1131（C3），1436（C4），1133（C10），1314（C5），1078（C6），1639（C7），1129（C8），1517（C9），917（C2′），683（C3′），711（C1″），269（C2″），261（C3″），1648（C1），1145（C2），1615（C3），277（C4），207（C5）。以上數據與文獻[8] 對比，確定該化合物為（+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3 h]chromen9yl3methylbut2enoate。

化合物6白色粉末，ESIMS m/z 289 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），726（1H，d，J=83 Hz，H5），675（1H，d，J=83 Hz，H6），516（1H，dd，J=100，80 Hz，H2′），338（1H，dd，J=160，100 Hz，H3′），328（1H，dd，J=160，80 Hz，H3′），199（3H，s，H4″），157（3H，s，H1″CH3），151（3H，s，H1″CH3）。13CNMR（CDCl3， 150 MHz） δ： 1610（C2），1123（C3），1439（C4），1131（C10），1289（C5），1067（C6），1639（C7），1134（C8），1513（C9），887（C2′），276（C3′），821（C1″），1703（C3″），219（C4″），223（C1″CH3），209（C1″CH3）。以上數據與文獻[9] 對比，確定該化合物為libanoridin。

化合物7白色粉末，ESIMS m/z 351 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 623（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），724（1H，d，J=82 Hz，H5），679（1H，d，J=82 Hz，H6），521（1H，t，J=53 Hz，H3′），325（1H，dd，J=178，52 Hz，H4′），310（1H，dd，J=178，53 Hz，H4′），610（1H，qq，J=73，14 Hz，H3″），191（3H，dq，J=73，14 Hz，H4″），185（3H，q，J=14 Hz，H5），139（3H，s，H5′），138（3H，s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1612（C2），1125（C3），1438（C4），1121（C10），1267（C5），1142（C6），1564（C7），1073（C8），1534（C9），766（C2′），693（C3′），232（C4′），248（C5′），228（C6′），1668（C1″），1274（C2″），1392（C3″），158（C4″），206（C5″）。以上數據與文獻[10] 對比，確定該化合物為絲立尼亭。

化合物8無色針狀，ESIMS m/z 245 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 623（1H，d，J=95 Hz，H3），762（1H，d，J=95 Hz，H4），718（1H，s，H5），678（1H，s，H8），331（2H，d，J=74 Hz，H2′），528（1H，tq，J=73，13 Hz，H3′），177（3H，s，4′CH3），170（3H，s，4′CH3），390（3H，s，7OCH3）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1616（C2），1128（C3），1439（C4），1119（C10），1274（C5），1275（C6），1607（C7），985（C8），1545（C9），278（C2′），1213（C3′），1337（C4′），258（C4′），178（C5′），559（7OCH3）。以上數據與文獻[11] 對比，確定該化合物為花椒素。

化合物9無色針狀。ESIMS m/z 209 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 714（1H，d，J=12 Hz，H2），727（1H，d，J=12 Hz，H4），606（2H，s，H7），292（2H，q，J=72 Hz，H2′），121（3H，t，J=72 Hz，H3′），395（3H，s，H1OCH3）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1393（C1），1026（C2），1319（C3），1086（C4），1435（C5），1023（C7），1489（C9），1989（C1′），316（C2′），849（C3′），566（C1OCH3）。以上數據與文獻[12] 對比，確定該化合物為crocatone。

化合物10無色油狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 622（1H，d，J=95 Hz，H3），760（1H，d，J=95 Hz，H4），733（1H，d，J=86 Hz，H5），679（1H，d，J=86 Hz，H6），414（1H，d，J=47 Hz，H3′），646（1H，d，J=47 Hz，H4′），147（3H，s，H5′），144（3H，s，H6′），572（1H，m，H2″），224（3H，s，H5″），192（3H，s，H6″）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1606（C2），1125（C3），1439（C4），1125（C10），1287（C5），1146（C6），1561（C7），1107（C8），1542（C9），778（C2′），714（C3′），602（C4′），255（C5′），226（C6′），1656（C1″），1152（C2″），1592（C3″），276（C5″），205（C6″）。以上數據與文獻[13] 對比，確定該化合物為peujaponisinol B。endprint

化合物11無色針狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（600 MHz，CDCl3） δ： 624（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），733（1H，d，J=86 Hz，H5），679（1H，d，J=86 Hz，H6），521（1H，d，J=47 Hz，H3′），543（1H，d，J=47 Hz，H4′），149（3H，s，H5′），142（3H，s，H6′），580（1H，m，H2″），220（3H，s，H5″），192（3H，s，H6″）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1601（C2），1130（C3），1433（C4），1123（C10），1292（C5），1145（C6），1570（C7），1072（C8），1542（C9），787（C2′），717（C3′），629（C4′），255（C5′），212（C6′），1675（C1″），1149（C2″），1598（C3″），277（C5″），206（C6″）。以上數據與文獻[14] 對比，確定該化合物為peujaponisinol A。

化合物12白色粉末，ESIMS m/z 231 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 625（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），723（1H，d，J=86 Hz，H5），680（1H，d，J=86 Hz，H6），362（2H，d，J=72 Hz，H2′），528（1H，m，H3′），176（3H，br s，H5′），183（3H，br s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1616（C2），1132（C3），1441（C4），1127（C10），1266（C5），1125（C6），1362（C7），1147（C8），1583（C9），221（C2′），1203（C3′），1531（C4′），258（C5′），180（C6′）。以上數據與文獻[15] 對比，確定該化合物為ostenol。

4小結

本研究從紫花前胡中分離得到12 個化合物，其中化合物1～5為首次從當歸屬植物中分離得到，化合物 7～12為首次從紫花前胡中分離得到，豐富了紫花前胡香豆素類成分的結構多樣性。前人研究發現化合物1可以發揮抗多重耐藥作用，且與多重耐藥抑制劑verapamil 和cyclosporine A活性相當[16]；化合物2具有血管舒張活性[16]，抗氧化活性[17]和對HepG2腫瘤細胞抑制作用[18]；化合物3具有抗炎[19]，抑制黑色素瘤的作用[20]；化合物6可以調節炎癥過敏反應[21]，治療由于紫外線照射造成的皮膚損傷[22]，另外還可以發揮抗炎作用[23]；化合物7可以調節平滑肌收縮從而調節血管和肌肉的舒張[24]，抗真菌[25]和抗炎作用[26]；化合物8對杜什曼蟲前鞭毛體有作用[27]，還可以發揮抗炎活性[28]。因此，本研究可以為這些化合物的制備提供新的植物來源。

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[責任編輯丁廣治]endprint