銀線草提取物的抑菌活性測定

李黎星

【摘 要】以研究銀線草提取物的不同萃取相對大腸桿菌等6種細菌的抗菌作用為目的，將銀線草提取分離，每種萃取相進行抑菌實驗。結(jié)果表明，銀線草提取物中抑菌活性最強的為乙酸乙酯相，且對蠟狀芽孢桿菌、表皮葡萄球菌和大腸桿菌抑制作用較強。

【關(guān)鍵詞】銀線草；提取物；抑菌活性

銀線草（Chloranthus japonicus Sieb.）也稱四葉七，白毛七，四塊瓦，屬于金粟蘭科金粟蘭屬植物。該屬植物為民間傳統(tǒng)草藥，以根、根莖或全草入藥，具有舒經(jīng)活絡(luò)，祛風散寒，消腫止痛等功效[1]。近年來，從金粟蘭屬植物中分離到的化合物主要為萜類，其余還有香豆素類、木脂素類、甾體類等，現(xiàn)代藥理學研究還表明，其具有抑菌、抗腫瘤、抗病毒等作用[2-3]。本文為開發(fā)利用天然、高效、低毒的抑菌藥物提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

銀線草采自陜西省寧陜縣，自然陰干；大腸桿菌，蠟狀芽孢桿菌，巨大芽孢桿菌，金黃色葡萄球菌，白色葡萄球菌，表皮葡萄球菌均購于陜西省微生物研究所。

1.2 方法

1.2.1 銀線草的提取與分離

取干燥的銀線草全草500g，粉碎，用甲醇回流提取3小時，抽濾，收集甲醇濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，然后濃縮液在干燥箱40～50℃條件下烘干，得甲醇提取物浸膏。將此浸膏用過MCI柱脫去色素，進而得到銀線草的甲醇提取物，然后依次用乙酸乙酯和正丁醇進行多次萃取，分別得到乙酸乙酯層、正丁醇層和水層，每個萃取層濃縮除去溶劑，濃縮液于干燥箱40～50℃烘干，即獲得銀線草的乙酸乙酯相部分、正丁醇相部分及水相部分，置于冰箱4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品液的制備

分別取上述銀線草提取物的三種萃取相，配制成濃度為100 mg/ml的樣品液，過濾除菌備用。

1.2.3 培養(yǎng)基及菌懸液的配置

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，瓊脂 15～20g，水1000ml，充分溶解，pH于7.0～7.2，高壓滅菌，備用。

將6種供試菌分別在斜面培養(yǎng)基上活化后，無菌條件下，挑取活化好的菌種于生理鹽水中，調(diào)節(jié)菌懸液濃度為106CFU/ml（實驗用）。

1.2.4 抑菌活性測定

用牛津杯法測定各種提取物的抑菌活性。無菌操作臺中將培養(yǎng)基倒入平皿，每個平皿約15～20mL，待凝固。吸取0.1mL配好的菌懸液加入凝固的平板，將其涂布均勻，每個平板放3個牛津杯，每個牛津杯加入50μL的樣品溶液，另設(shè)陽性對照和空白對照。平板在4℃放置2h，然后在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h。測定抑菌圈直徑，每組實驗重復三次。

2 實驗結(jié)果與分析

銀線草提取物的三種萃取相分別對6種細菌的抑菌活性見表1。結(jié)果顯示，銀線草提取物對供試菌種有不同程度的抑制作用，抑菌活性最強的為乙酸乙酯相，其次是正丁醇相，水相無抑菌圈。乙酸乙酯相抑菌效果最好，表明銀線草抑菌的有效成分多存在于此相中。銀線草提取物乙酸乙酯相對表皮葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌的抑制效果較明顯。

3 結(jié)論

當今社會，科技飛速發(fā)展，生活水平迅猛提高，但人類受到更多疾病的威脅，開發(fā)具有抗菌，安全無毒，無毒副作用等的藥物已然成為研究熱點，因此，具有抗菌活性的天然藥物便備受關(guān)注。人們對金粟蘭科中的植物草珊瑚一直有所研究和臨床應用，而銀線草卻只作為民間中草藥使用，其開發(fā)和利用便受到限制。本實驗證明銀線草具有良好的抑菌作用，雖作用不及陽性對照，但它們是天然的抑菌藥物，其的價值有待我們進一步研究，從中開發(fā)出更多的有效成分。

【參考文獻】

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志，第20卷，第1分冊[M].北京：科學出版社，1982：79-80.

[2]曹聰梅，彭勇，肖培根.金粟蘭屬植物的化學成分和藥理作用研究進展[J].中國中藥雜志，2008，33（13）：1509-1515.

[3]鄒雍，劉傳珍.金粟蘭屬藥用植物研究進展[J].江西中醫(yī)學院學報，2009，21（3）：98-100.

[責任編輯：朱麗娜]endprint