不同抗凝劑濃度及最佳抗凝劑不同放置時間對血細胞參數的影響

張京霞 鄭紅琴

(登封市婦幼保健院檢驗科，河南 登封 452470)

不同抗凝劑濃度及最佳抗凝劑不同放置時間對血細胞參數的影響

張京霞 鄭紅琴

(登封市婦幼保健院檢驗科，河南 登封 452470)

目的：探討不同抗凝劑濃度及最佳抗凝劑不同放置時間對血細胞參數的影響。方法：選擇2015年12月于我院行健康體檢的35例健康成年人的靜脈血為研究標本，分別制成抗凝濃度為2.4 mg·mL-1、3.6 mg·mL-1、4.8 mg·mL-1的A、B、C三組血液檢測標本。采用全自動血細胞分析儀進行檢測，其中B組放置時間延長至15 min再次檢測。比較三組血細胞參數變化情況，分析不同放置時間血細胞參數。結果：A組、B組、C組以及B組不同放置時間血細胞參數之間均無明顯差異(P>0.05)。結論：EDTA-K2濃度在接近標準濃度時，或放置時間在15 min以內，抗凝劑的使用濃度與放置時間對血細胞參數均無明顯影響。

抗凝劑；放置時間；血細胞參數

血液分析是臨床醫學常規檢驗項目之一，在評估機體健康狀態、診斷疾病方面具有重要意義[1]。由于客觀因素的影響，不少患者標本無法得到及時檢查，故臨床普遍應用抗凝劑以確保檢驗結果[2]。乙二胺四乙酸鹽(Ethylene diamine tetraacetie acid，EDTA-K2)是臨床公認為抗凝效果佳、對血細胞參數影響較小的一種抗凝劑。但抗凝劑濃度及放置時間等因素可能對血細胞檢驗結果造成不同的影響[3]。因此，本研究采用全血細胞分析儀對EDTA-K2抗凝標本進行檢驗，探討抗凝劑濃度及放置時間對血細胞參數的影響，現報道如下。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年12月于我院行健康體檢者35例，男19例，女16例；年齡20-58歲，平均年齡41.52±3.83歲。所有受檢者均知曉本研究，并自愿接受研究內容，均于入組后簽署知情同意書。排除患有影響血液循環及相關性疾病者。

1.2 方法

1.2.1 儀器

選用產自日本的希森美康XT-1800血細胞分析儀以及希森美康配套試劑、定標液、質控物等。

1.2.2 制備抗凝劑

分別稱量240 mg、360 mg、480 mg EDTA-K2，將不同劑量EDTA-K2各自加至5 mL蒸餾水內，從而制成濃度為48 mg·mL-1、72 mg·mL-1、96 mg·mL-1的EDTA-K2溶液。所有患者均抽取6 mL靜脈血，分別置入A組、B組、C組試管，各2 mL。三組試管均含有100 μL的EDTA-K2溶液，其中A組試管內EDTA-K2濃度為48 mg·mL-1、B組為72 mg·mL-1、C組為96 mg·mL-1，最終A組試管內EDTA-K2抗凝濃度為2.4 mg·mL-1、B組為3.6 mg·mL-1、C組為4.8 mg·mL-1。3組標本均放置5 min時采用全血細胞分析儀進行檢測，另選B組標本于放置15 min時再次檢測，詳細記錄測定結果。

1.3 觀察指標

采用電阻抗法檢測白細胞(White blood cell，WBC)、紅細胞(Red blood cell，RBC)、血紅蛋白(Hemoglobin，HGB)、血小板(Platelet，PLT)、淋巴細胞(Lymphocyte，LYM)等血細胞參數，具體方法如下：采用等滲電解質溶液對細胞懸液進行稀釋，后加入不導電容器內，插入小孔管，小孔管內外各有一個電極，接通電源產生穩定電流，細胞懸液經小孔管外側流向小孔管內部，增高小孔感應區電阻，改變瞬間電壓，產生脈沖信號。脈沖振幅與細胞體積正相關，脈沖數量則反映細胞數量，進而獲得血細胞參數。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 三組血細胞參數比較

三組間血細胞參數相比，無顯著差異(P>0.05)，見表1。

2.2B組不同時間血細胞參數比較

最佳濃度抗凝劑不同時間放置時間血細胞參數相比，無明顯差異(P>0.05)，見表2。

表1 三組血細胞參數比較

表2 B組不同時間血細胞參數比較±s)

3 討論

血液分析作為臨床常規的一項檢測環節，其檢測結果的準確性與患者及時診斷與治療緊密相關。樣本分析的質量把控是減少檢測誤差的重要保證，故如何控制好樣本分析前階段質量已成為臨床關注的重點[4]。EDTA-K2與血液中鈣離子親和力較強，結合鈣離子后，可經膜離子通道到達血小板膜內，阻止凝血酶原轉化為凝血酶，最終達到血液抗凝的目的[5-6]。本研究即通過觀察EDTA-K2不同濃度及不同放置時間對血細胞參數的影響，探討檢驗血液指標最佳的抗凝劑濃度及放置時間。

目前，全血分析儀已廣泛應用于臨床檢驗血液參數，使血液分析的準確性得到顯著提升。但由于采血過程受護士主觀因素影響，采血量往往控制欠佳，過多的采血量容易導致EDTA-K2比例失調，從而造成血液標本輕微凝血，嚴重者可堵塞分析儀管道或影響檢測結果的準確性。而采血量過少亦可因血液標本稀釋而降低檢驗結果準確性[7-8]。本研究中，A組、B組、C組試管分別采用不同濃度抗凝劑，三組間WBC、RBC、HGB、PLT等血細胞參數均無顯著差異，表明在濃度為1-3 mg·mL-1范圍內，EDTA-K2濃度的變化對血細胞參數并無明顯影響。本研究采用電阻抗法檢測血細胞參數，其中PLT與RBC檢測時，二次稀釋檢測樣本后進入檢測單元，形成脈沖信號，而通過小孔的細胞數與脈沖數相近，細胞體積與脈沖幅度正相關，故EDTA-K2濃度未低至造成細胞破裂時，PLT與RBC計數未受影響[9]。因此該法檢測結果具備良好的準確性，可避免因檢測方法的不同對血細胞水平造成影響。同時，由于血樣本量與抗凝劑相比為40:1，可忽略抗凝劑對血液的稀釋作用。另有研究顯示，EDTA加入血液后，可改變WBC形態，隨著濃度的增加與放置時間的延長，可造成部分中性粒細胞腫脹、崩解，形成碎片。而本研究中不同濃度組間WBC計數無明顯差異，可能與研究中所采用的EDTA-K2濃度與標準濃度較為接近，且檢測時間較短，WBC的變化尚未顯現。另外，本研究尚對B組進行15 min的檢測，仍未發現血細胞參數存在明顯差異。表明在該時間內，適合檢測血細胞相關參數[10]。因此，抗凝劑濃度為2.4 mg·mL-1～4.8mg·mL-1，放置5-15 min時均可準確檢測血液參數，從而獲得相對理想的檢測結果。由于本研究檢測條件受限，關于EDTA-K2濃度及放置時間對血細胞參數的影響仍需深入探討，后期研究中可適當增加抗凝劑濃度范圍，延長放置時間，以進一步完善研究結果。

綜上所述，EDTA-K2濃度在接近標準濃度時，其濃度的變化對血細胞參數無明顯影響，同時標準濃度下，放置15 min檢測對血細胞檢測結果的影響較小。

1 伍亞云,李霞,郭建華,等. 乙二胺四乙酸二鉀濃度對紅細胞形態影響因素的探討[J]. 國際檢驗醫學雜志, 2014, 35(13): 1806-1806,1817.

2 黃亮,梁瑜金. 抗凝劑對血小板計數結果的影響分析[J]. 國際檢驗醫學雜志, 2015, 36(8): 1104-1105.

3 徐全中,王偉佳,闞麗娟,等. 不同抗凝劑、不同保存溫度和保存時間對降鈣素原檢測的影響[J]. 檢驗醫學, 2013, 28(7): 639-642.

4 王明慧,楊濤. 靜脈血標本放置時間對血細胞分析結果的影響[J]. 中國基層醫藥, 2014, 21(16): 2524-2526.

5 王洪,魏杰,王吉星,等. 兩種抗凝劑對實驗用小型豬血液生理指標的影響[J]. 中國比較醫學雜志, 2014, 24(4): 28-32.

6 龔衛鋒,毛慧. 血液透析患者生化項目檢測中抗凝劑的使用分析[J]. 山西醫科大學學報, 2013, 44(7): 554-556.

7 劉學斌,鄒雪松,黃冬梅,等. 兩種抗凝劑對血小板的影響因素臨床分析[J]. 河北醫學, 2013, 19(10): 1595-1597.

8 馬科,左路廣,常曉彤,等. 體液添加EDTA-K2抗凝劑對細胞計數的影響[J]. 醫療衛生裝備, 2015, 36(4): 91-93.

9 劉曉婷,向代軍,徐菡,等. 邁瑞BC-5000全自動血細胞分析儀性能的可靠性研究[J]. 中國醫學裝備, 2016, 13(4): 36-40.

10顏宇飛,張慶五. EDTA-K2抗凝劑對外周血淋巴細胞形態的影響[J]. 檢驗醫學, 2015, 30(3): 287-288.

Different anticoagulant concentration and anticoagulant effects of different placement time of blood cell parameters

Zhang Jing-xia, Zheng Hong-qin

(Laboratory of Dengfeng Maternal and Child Care Service Centre, Henan Dengfeng 452470)

Objective：To study the different anticoagulant concentration and anticoagulant effects of different placement time of blood cell parameters. Methods: The venous blood in 35 healthy adults in our hospital for health examination of December 2015 as study samples, were made from the anticoagulant concentration of 2.4 mg mL-1, 3.6mg mL-1, 4.8mg mL-1A, B, C three groups of blood samples. Automatic blood cell analyzer was used to detect the B group, and the time was extended to 15 min. The changes of blood cell parameters were compared between the three groups. Results: A group, B group, C group and B group had no significant difference in blood cell parameters (P<0.05). Conclusion: EDTA-K2 concentration towards the standard concentration, or placed in less than 15 min, use of anticoagulant concentration and keeping time on blood cell parameters were not significantly affected.

Anticoagulants; Time; Blood cell parameters

張京霞，女，主管技師，主要從事臨床檢驗工作，Email：dfzhangjingxia@126.com。

2017-3-7)