三種感染標志物診斷兒童膿毒癥細菌感染的價值

莫慶儀，周濤，黃曉雯，梁桂明，馬力忠，盧象對

(南方醫科大學附屬中山博愛醫院兒科1、檢驗科2，廣東中山528403)

三種感染標志物診斷兒童膿毒癥細菌感染的價值

莫慶儀1，周濤1，黃曉雯1，梁桂明1，馬力忠1，盧象對2

(南方醫科大學附屬中山博愛醫院兒科1、檢驗科2，廣東中山528403)

目的探討C反應蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)及中性粒細胞CD64對兒童膿毒癥細菌感染的診斷價值。方法選取我院2015年6月至2016年12月間收治的膿毒癥細菌感染患者45例為觀察組，同時間段健康兒童45例為對照組。檢測并比較觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平的差異，并與對照組受檢者進行比較，觀察其診斷效力。結果治療前，觀察組患者和對照組的CRP[(21.4±6.5)mg/L vs(6.6±2.3)mg/L]、PCT [(11.9±3.6)μg/L vs(0.5±0.2)μg/L]及中性粒細胞CD64[(66.7±18.4)MFI vs(24.5±6.2)MFI]水平比較，觀察組均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)；觀察組患者治療前后的CRP[(13.6±4.2)mg/L vs(21.4±6.5)mg/L]、PCT [(4.8±1.7)μg/L vs(11.9±3.6)μg/L]及中性粒細胞CD64[(39.8±15.6)MFI vs(66.7±18.4)MFI]水平比較，治療后均明顯低于治療前，差異均有統計學意義(P＜0.05)，但仍均明顯高于對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)；三種感染標志物聯合應用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確度分別達95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。結論膿毒癥細菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平升高，三者聯合應用可以明顯提高診斷效力。

膿毒癥；細菌；C反應蛋白；降鈣素原；中性粒細胞CD64

兒童膿毒癥細菌感染起病急驟、進展迅速，若得不到及時診治，可能導致膿毒癥休克、多器官功能衰竭，患者死亡率極高。研究顯示，兒童膿毒癥細菌感染的死亡率高達23.3%～47.4%[1]。膿毒癥的早期診斷難度較大，主要依靠患者臨床表現、血常規檢查、細菌相關檢查等，但其均缺乏特異性[2]。C-反應蛋白(CRP)及降鈣素原(procalcitonin，PCT)是細菌性感染敏感指標，對評價感染病變存在、嚴重程度方面具有一定的價值[3]。中性粒細胞CD64可以識別IgGFc片段受體，能夠更敏感的反應炎性反應、免疫反應的存在[4]。本研究旨在通過對照研究，探討CRP、PCT及中性粒細胞CD64對兒童膿毒癥細菌感染的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2015年6月至2016年12月期間收治的膿毒癥細菌感染患者45例為觀察組，其中男性26例，女性19例；年齡3～13歲，平均(8.5± 1.2)歲；病程1～7 d，平均(4.1±1.1)d。納入標準：①符合膿毒癥診斷標準[5]：體溫＞38.3℃或≤36℃，心率≥90次/min或高于同齡正常值2個標準差以上，嚴重水腫，血糖＞7.7 mmol/L；白細胞計數＞12×109/L或＜4×109/L，CPR及PCT高于正常值2個標準差以上；血氧降低＜90/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)；尿量＜0.5 mL/kg·h達2 h以上；乳酸＞1 mmol/L。②年齡＜14歲；③初次就診；④臨床、實驗室檢查及影像學檢查資料完整；⑤符合知情同意原則。排除標準：①惡性腫瘤；②先天畸形；③自身免疫系統疾患及結締組織病；④嚴重創傷及應激狀態；⑤2周內手術史者；⑥嚴重心肝腎功能不全；⑦排除死亡及其他各種原因不能配合研究者。選擇同時間段健康兒童45例為對照組，其中男性25例，女性20例；年齡3～14歲，平均(8.2±1.5)歲。兩組受檢者在性別、年齡方面比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法入院后觀察組患者進行血培養，根據藥敏實驗給予抗感染治療，其他治療包括補液治療、維持酸堿、電解質平衡治療等對癥支持治療。

1.3 觀察指標檢測并觀察膿毒癥患者治療前后、對照組CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平的差異。計算和比較CRP、PCT及中性粒細胞CD64對兒童膿毒癥細菌感染的診斷效力。

1.4 檢測方法分別于治療前、治療后2周抽取觀察組患者清晨空腹靜脈血5 mL，檢測CPR、PCT及中性粒細胞CD64。并取對照組受檢者清晨空腹靜脈血檢測CPR、PCT及中性粒細胞CD64為對照。血液標本經抗凝、離心(美國BECKMAN A1330011型離心機，3 000 r/min離心10 min)處理后冷藏(-20℃環境)備檢。檢查設備選擇美國Becton-Dickinson公司生產的流式細胞分析儀，CRP檢測采用免疫比濁法，PCT檢測采用免疫熒光雙抗體夾心法，中性粒細胞CD64檢測采用流式細胞術。試劑盒均由深圳國賽生物技術有限公司提供。以CRP≥8.0 mg/L、PCT≥0.5 ug/L、中性粒細胞CD64≥35 MFI為陽性。

1.5 統計學方法應用SPSS18.0統計軟件包進行數據分析，正態分布的各統計指標均以均數±標準差()表示，組間數值比較采用t檢驗，相關性分析采用Spearman相關性分析，均以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平與對照組比較治療前，觀察組患者的CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平均明顯高于對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療后，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平均明顯低于治療前，差異具有統計學意義(P＜0.05)，但仍均明顯高于對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平與對照組比較()

表1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平與對照組比較()

注：與對照組比較，at=8.765、9.857、10.654、3.482、4.812、5.235，P＜0.05；與觀察組治療前比較，bt=5.436、7.637、8.564，P＜0.05。

組別觀察組例數45時間治療前治療后對照組45 CRP(mg/L) 21.4±6.5a13.6±4.2ab6.6±2.3 PCT(mg/L) 11.9±3.6a4.8±1.7ab0.5±0.2中性粒細胞CD64(MFI) 66.7±18.4a39.8±15.6ab24.5±6.2

2.2 CRP、PCT及中性粒細胞CD64診斷膿毒癥細菌感染的效力三種感染標志物中，CRP對膿毒癥細菌感染患者診斷效力最低，中性粒細胞CD64最高。三種聯合應用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確度分別達95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。

表2 CRP、PCT及中性粒細胞CD64診斷膿毒癥細菌感染的效力

3 討論

若細菌感染得不到有效的控制，感染擴散及反復的刺激會導致全身性惡性炎癥性反應性疾病，稱為膿毒癥。膿毒癥患者體內多個器官存在感染，細菌隨著血液循環播散，導致機體免疫系統激活、炎性因子大量釋放，患者病情變化復雜，死亡率高[6]。及時和準確的診斷是采取合理治療方案的基礎，以往膿毒癥的診斷依靠臨床癥狀體征，體溫、實驗室培養及白細胞計數等常規檢查指標，診斷效力有限，不能滿足臨床診療的需要。

CRP由肝臟合成和釋放，在急性炎性反應及應激狀態下合成明顯增加，它屬于一種急性相蛋白，反映機體非特異性免疫機制的功能，一般認為CRP水平高于100 mg/L代表存在嚴重的炎性病變[7]。PCT是一種糖蛋白，含116個氨基酸，是降鈣素的前肽物質。正常人血清PCT含量極低，但在炎性反應及應激狀態下，患者PCT水平會明顯升高，這可能與甲狀腺C細胞以外的其他細胞大量分泌有關。有研究顯示，膿毒癥細菌感染患者會抑制PCT分解成降鈣素，導致血清內PCT積聚增多[8]。也有研究顯示，在嚴重炎性反應的刺激下，膿毒癥細菌感染患者肝臟、腎臟、肌肉中會產生和釋放大量的PCT，且隨著患者病情的加重，其血清PCT水平明顯升高[9]。中性粒細胞CD64是免疫球蛋白超家族的一員，其分子量為72 kD，可以識別IgGFc片段受體。在膿毒癥細菌感染患者，細菌直接刺激或者通過釋放相關的炎性因子刺激中性粒細胞表達大量的CD64，在患者發病4～6 h，中性粒細胞CD64即可以明顯升高[10]。

本研究中，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平均顯著高于對照組，治療后，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平均顯著低于治療前，但仍均顯著高于對照組，說明膿毒癥細菌感染患者體內CRP、PCT及中性粒細胞CD64水平存在顯著的升高，三者可以用于膿毒癥細菌感染患者的診斷。通過對三種診斷效力的分析，本研究顯示，CRP對膿毒癥細菌感染患者診斷效力最低，中性粒細胞CD64最高。三種感染標志物聯合應用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確度均達95%以上。提示中性粒細胞CD64檢測對膿毒癥細菌感染的診斷效力更高，且通過CRP、PCT及中性粒細胞CD64的聯合檢測，更有利于對膿毒癥細菌感染進行準確的診斷。

綜上所述，膿毒癥細菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒細胞CD64，三者聯合應用可以明顯提高診斷效力。

[1]李遠華,宋秀嬋,戚應靜,等.血漿N末端腦鈉肽前體對嚴重膿毒癥和膿毒癥休克患者預后判斷的價值[J].重慶醫學,2013,42(33): 4012-4013.

[2]劉占國,蔡靚,龍國良.膿毒癥患者血清白細胞介素-6的檢測及意義[J].廣東醫學,2012,33(24):3762-3764.

[3]孫勝男,呂菁君,魏捷等.膿毒癥患者降鈣素原濃度與病原學感染證據之間的相關性研究[J].中華急診醫學雜志,2013,22(10): 1136-1141.

[4]阮莉莉,杜俊君.CD64指數在新生兒膿毒癥早期診斷中的意義[J].上海交通大學學報:醫學版,2014,34(10):1503-1505.

[5]李玖軍,鄒凝,潘佳麗.兒童膿毒癥診斷標準及鑒別診斷[J].中國中西醫結合兒科學,2015,7(4):289-292.

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[8]劉文娟,韓再萍,田先雨,等.血清PCT和IL-6水平在膿毒癥患兒中的診斷價值[J].中國婦幼保健,2012,27(30):4728-4730.

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[10]柳權,張立明,王潤秀,等.中性粒細胞CD64與C反應蛋白對燒傷膿毒癥的診斷價值[J].中國感染與化療雜志,2014,14(2):89-93.

Value of three kinds of infection markers in the diagnosis of bacterial infection in children with sepsis.

MO Qingyi1, ZHOU Tao1,HUANG Xiao-wen1,LIANG Gui-ming1,MA Li-zhong1,LU Xiang-dui2.Department of Pediatrics1, Department of Clinical Laboratory2,BOAI Hospital of Zhongshan Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528403,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of C-reactive protein(CRP),procalcitonin(PCT)and neutrophil CD64 in children with sepsis.MethodsA total of 45 children with bacterial infection,wo admitted to our hospital from June 2015 to December 2016,were selected as the research subjects.At the same time,45 healthy children were selected as the control group.The differences of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels in the observation group before and after treatment,which also were detected and observed in the control group,and the diagnostic effectiveness were observed.ResultsBefore the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were respectively(11.9±3.6)ug/L,(21.4±6.5)mg/L and(66.7±18.4)MFI,which were significantly higher than(6.6+ 2.3)mg/L,(0.5±0.2)ug/L,(24.5±6.2)MFI in the control group(P＜0.05).After the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were(13.6±4.2)mg/L,(4.8±1.7)ug/L,(39.8±15.6)MFI,which were significantly lower than those before the treatment(P＜0.05),but they were all still significantly higher than those in the control group(P＜0.05).The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic efficacy, the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy were 95.6%, 97.8%,97.7%,95.7 and 96.7%,respectively.ConclusionThe children with sepsis bacterial infection have elevated levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels,and The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic effectiveness.

Sepsis;Bacteria;C reactive protein(CRP);Procalcitonin(PCT);Neutrophil CD64

R726

A

1003—6350（2017）16—2647—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.16.021

2017-03-08)

廣東省中山市科技局2015年度科技計劃項目(編號：2015SYF0104)

周濤。E-mail：taozhoul@163.com