四君子湯與四君子丸干預(yù)脾氣虛大鼠宏觀表征的比較研究

尹玫，竇智勇，張茹玉，高新，王穎，單德紅

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧沈陽110847）

四君子湯與四君子丸干預(yù)脾氣虛大鼠宏觀表征的比較研究

尹玫，竇智勇，張茹玉，高新，王穎，單德紅

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧沈陽110847）

目的從體質(zhì)量、進食水量、肌力和神志方面比較四君子湯和四君子丸的藥效學(xué)差異。方法32只SPF級雄性SD大鼠，隨機分為對照組、脾氣虛組（模型組），四君子丸組（丸劑組）和四君子湯組（湯劑組），每組8只；電子天平檢測大鼠體質(zhì)量；代謝籠計量24 h進食水量；大小鼠抓力測定儀測量前肢抓力；曠場實驗評價大鼠的神志狀態(tài)。結(jié)果與對照組相比，模型組的體質(zhì)量、進食水量、前肢抓力、運動距離、站立次數(shù)和角落停留時間等均顯著減少（P＜0.05），但中心和周邊停留時間明顯延長，而后兩組的體質(zhì)量和進水量均顯著下降，但進食量顯著上升（P＜0.05）。與模型組比較，后兩組的體質(zhì)量、進食量、前肢抓力、運動距離、站立次數(shù)和角落停留時間均顯著上升（P＜0.05），中心和周邊活動時間顯著縮短，但丸劑組飲水量明顯減少（P＜0.05）；與丸劑組比較，湯劑組的飲水量和運動距離均顯著增加（P＜0.05）。結(jié)論四君子湯與四君子丸均有較好的健脾益氣作用，但湯劑在促進飲水和安神益志方面的療效優(yōu)于丸劑。

四君子湯；四君子丸；劑型；脾氣虛；宏觀表征

四君子湯最初見于《太平惠民和劑局方》，由人參、白術(shù)、茯苓和甘草構(gòu)成，是治療脾氣虛的基礎(chǔ)方[1-4]。湯劑該方常用劑型，但煎煮時間長，不能立服，且難以長期保存，因此丸劑也常用于臨床。通常劑型的變化能夠影響療效，但四君子湯與四君子丸在藥效方面是否存在差異，目前還未見報道。本研究以脾氣虛模型大鼠為對象，主要從體質(zhì)量、進食水量、肌力和神志等方面，對比四君子湯與四君子丸的作用差別，為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 臨床資料32只SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量（200± 10）g，購于遼寧省本溪巿實驗動物中心（許可證號:SCXK（遼）-2010-0001），隨機分為對照組、脾氣虛組（模型組），四君子丸組（丸劑組）和四君子湯組（湯劑組），每組8只。飼養(yǎng)于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，室溫18℃～23℃，相對濕度45%～55%，自由飲水進食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，開始實驗。

1.2 脾氣虛模型的復(fù)制方法及評價標(biāo)準(zhǔn)后3組按照文獻(xiàn)方法［5］復(fù)制飲食失節(jié)加勞倦型脾氣虛模型，即14 d內(nèi)，單日飽食，雙日喂飼甘藍(lán)；每天水溫35℃～37℃游泳至力竭。評價標(biāo)準(zhǔn)：消瘦、食少、神疲、乏力、毛色枯槁無光澤等。

1.3 藥物制備及給藥方法四君子丸購于湖北廣仁藥業(yè)有限公司（國藥準(zhǔn)字Z42021149），粉碎至細(xì)粉后加1.5倍蒸餾水煎煮，濃縮為2 g生藥/mL，4℃冷藏。四君子湯由人參9 g、茯苓9 g、白術(shù)9 g和甘草6 g組成,均購于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院。煎煮方法：人參置于砂鍋中，加12倍量蒸餾水浸泡2 h，文火煮沸，60 min×2次；其余3藥共同用武火煎煮，余法同人參；取二煎液文火濃縮至2 g生藥/mL，4℃冷藏。給藥方法：第15天開始，對照組不給藥，后3組分別灌服蒸餾水、四君子湯丸和四君子湯(按成人用量折算為大鼠用量，1 mL/ 100 g,用前加熱至37℃)，早晚各1次，連續(xù)7 d。

1.4 大鼠體質(zhì)量、前肢抓力和進食水量的檢測治療結(jié)束后，先用電子天平測量大鼠體質(zhì)量，再按文獻(xiàn)方法[5]，采用YLS-13A大小鼠抓力測定儀檢測雙前肢抓力，之后放入代謝籠，觀察24 h進食水量。

1.5 大鼠神志狀態(tài)評價采用TM-Vision行為學(xué)實驗系統(tǒng)。將大鼠放入箱體中心，觀察5 min內(nèi)大鼠的運動距離、站立次數(shù)和各區(qū)域活動時間等，徹底清潔箱體后，檢測下1只。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行處理分析。計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；主要采用ANOVA進行組間比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

對照組大鼠體格健壯，活動較多，反應(yīng)敏捷，飲食正常，行動迅速，被毛緊密有光澤；模型組大鼠則消瘦，反應(yīng)遲鈍，行動緩慢，懶動，便軟，被毛蓬起無光澤，表明飲食失節(jié)加勞倦型脾氣虛模型復(fù)制成功。

2.1 大鼠體質(zhì)量、進食水量和前肢抓力變化與對照組相比，模型組的四項指標(biāo)均顯著下降,后兩組的體質(zhì)量和飲水量均顯著下降，但進食量顯著上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，后兩組的體質(zhì)量、進食量和前肢抓力均顯著上升，但丸劑組飲水量明顯減少（P＜0.05）；與丸劑組比較，湯劑組的飲水量顯著增加（P＜0.05）。見表1。

表1 4組大鼠體質(zhì)量、進食水量和前肢抓力的變化（x±s）Table 1 Changes of body mass,food and water intake and forelimb grasp strength in 4 groups（x±s）

2.2 大鼠神志變化在運動距離和站立次數(shù)上，與對照組相比，模型組均顯著減少（P＜0.05）；與模型組比較，后兩組均顯著增加（P＜0.05）；與丸劑組比較，湯劑組運動距離明顯增加（P＜0.05）。在活動區(qū)域方面，對照組大鼠主要活動于曠場的角落和周邊，較少通過中心區(qū)域，與其相比，模型組大鼠在中心和周邊停留時間顯著延長，而角落則顯著減少（P＜0.05）；與模型組比較，后兩組大鼠在中心和周邊活動時間顯著縮短，在角落則顯著延長（P＜0.05）。見表2、圖1。

表2 4組大鼠行為學(xué)情況（x±s）Table 2 Rat behavior changes in 4 groups（x±s）

圖1 大鼠典型運動軌跡（0→MAX表示停留時間增加）Figure 1 Typical motion traces of rats(0→M A X sh o w in g th e in c rease of residence time)

3 討論

研究表明，四君子湯的有效成分主要是黃酮類、皂苷類、多糖類和有機酸類[6]，水煎更有利于上述成分的析出[7-8]。不過，由于湯劑常常需要較長的煎煮時間，且不易保存和攜帶，因此多數(shù)患者更喜歡丸劑。通常認(rèn)為改變劑型是會影響藥效的，但四君子湯劑和丸劑之間是否存在差異，目前還不清楚。本實驗主要從體質(zhì)量、進食水量、肌力和神志等方面進行對比。

首先，中醫(yī)認(rèn)為脾主運化，控制水谷的攝取量，氣虛則納少。實驗結(jié)果顯示，模型組大鼠體質(zhì)量下降，進食量和飲水量也顯著減少，說明該組大鼠出現(xiàn)了納少，由此造成氣血化生不足而見消瘦。而藥物干預(yù)之后，丸劑組和湯劑組的進食量和飲水量均明顯高于模型組，表明這二種劑型均有促進飲食的作用，而湯劑組的進水量顯著高于丸劑組，提示四君子湯在恢復(fù)進水量方面效果要優(yōu)于丸劑。

其次，中醫(yī)認(rèn)為脾主四肢肌肉，脾氣虛則肌肉缺乏氣血營養(yǎng)而致無力。研究結(jié)果顯示，模型組的前肢抓力顯著低于對照組，說明脾虛則肌肉失養(yǎng)，肌力不足。而丸劑組和湯劑組的前肢抓力高于模型組，與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，且兩組間無明顯差別，說明這二種劑型在維持肌力方面作用相近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

第三，中醫(yī)認(rèn)為脾健則神旺，脾虛則神失所養(yǎng)，導(dǎo)致機體難以正常應(yīng)對外界刺激。大鼠神志狀態(tài)可以采用曠場實驗進行客觀評價[5]。實驗觀察到，對照組大鼠進入新環(huán)境后，表現(xiàn)活躍，在趨暗習(xí)性驅(qū)使下，多活動在角落和周邊等光線較暗區(qū)域，探索距離遠(yuǎn)，站立次數(shù)多，表明其神充氣旺，能夠正常應(yīng)對新的刺激。而模型組大鼠則運動距離短、站立次數(shù)顯著減少，特別是在中心區(qū)域活動較多，提示其對光線并不敏感，其原因是脾失健運，氣血化生不足，神失所養(yǎng)，難以正常應(yīng)對外界刺激。與此對比，丸劑組與湯劑組大鼠的表現(xiàn)與對照組基本相似，明顯優(yōu)于模型組，顯示這二種劑型均有較好的健脾安神作用，但在運動距離方面，湯劑組顯著高于丸劑組，提示湯劑的安神益志效果好于丸劑。

綜上所述，四君子湯與四君子丸均有較好的健脾益氣作用，都能夠增進食欲、維持肌力和安神益志，但湯劑在增加飲水量和安神方面的效果要優(yōu)于丸劑，提示臨床應(yīng)用要有所選擇，針對患者的不同癥狀采用最佳劑型，以充分發(fā)揮各自優(yōu)勢。

[1]鄒超,楊宇飛.四君子湯加減降低胃腸腫瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的研究進展[J].世界中醫(yī)藥,2015,10(2):297-300,303.

[2]趙榮華,謝鳴,李聰,等.肝郁、脾虛和肝郁脾虛證模型大鼠下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能的變化及柴疏四君子湯的作用[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2014,20(4):119-123.

[3]張勇,吳雅楠.四君子湯結(jié)合辨證用藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎92例臨床研究[J].江蘇中醫(yī)藥,2014,46(7):27-28.

[4]宋旭,張耘,黃錦陽,等.四君子湯對后腹腔鏡腎囊腫去頂術(shù)患者細(xì)胞免疫功能影響的臨床研究[J].上海中醫(yī)藥雜志,2014, 48(8):35-36.

[5]劉旭東,劉文俊,孫大宇,等.脾氣虛證模型大鼠神疲乏力的客觀化評價[J].中華中醫(yī)藥雜志,2015,30(3):699-701.

[6]何延良,王曉中,傅蘋,等.四君子湯中化學(xué)成分的含量測定[J].中成藥,1990,12(12):43.

[7]徐秋香,郁紅禮,吳皓,等.四君子湯傳統(tǒng)煎煮規(guī)范化研究[J].中成藥,2013,35(6):1325-1329.

[8]吳林菁,錢海兵,王祥培，等.四君子湯合煎和分煎提取物的指紋圖譜比較[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2012,18(12):94-97.

Comparation of sijunzi decotion and sijunzi pill treating macroscopic tokens of rats in spleen qi deficiency

Yin Mei,Dou Zhi-yong,Zhang Ru-yu,Gao Xin,Wang Ying,Shan De-hong
（Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang,Liaoning,110847,China）

Objective To study the pharmacological difference of sijunzi decotion and sijunzi pill in food and water intakes,muscle strength and consciousness.Methods 32 male SPF SD rats were randomly divided into four groups,the control,spleen qi deficiency group(model group),sijunzi pill group(pill group)and sijunzi decotion(decotion group),8 each group.Rat body mass was measured by the electronic balance,food and water intakes per 24 h were detected in the metabolic cage,forelimb grip strength was tested by the grip strength instrument for rats and mice,and consciousness was valuated with the open field method.Results Compared with those in the control group,values of body mass,food and water intakens,forelimb grasp strength,motion distance,standing times and corner residence time were all increased(P＜0.05),but middle and peripheral residence time were decreased,significantly,in the model group,while body mass and water intaken were reduced obviously in later 2 groups(P＜0.05). Compared with those in the model group,there were significantly increased in the body mass,forelimb grasp strength,motion distance,standing times and corner residence time,and decreased in middle and peripheral residence time,for later 2 groups,while water intaken was reduced obviously in the pill group(P＜0.05);compared with those in the pill group,water intaken and motion distance in the decotion group were increased significantly(P＜0.05).Conclusion Both sijunzi decotion and sijunzi pill have the invigoration of spleen qi,but the former has better effects on promotion of water intake and thought than the later.

Sijunzi decotion;Sijunzi pill;Chinese medicine formulation;Spleen qi deficiency;Macroscopic token

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.26.012

國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃（2013CB531702）通訊作者：單德紅，E-mail：shandehong1971@163.com