養胃顆粒對大鼠慢性萎縮性胃炎的藥效學研究

劉建

江蘇省如東縣第四人民醫院 江蘇 如東 226400

養胃顆粒對大鼠慢性萎縮性胃炎的藥效學研究

劉建

江蘇省如東縣第四人民醫院 江蘇 如東 226400

目的：探討養胃顆粒對慢性萎縮性胃炎(CAG)胃液pH值和胃壁厚度及大鼠白細胞介素-β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響及機制。方法：將健康Wistar大鼠隨機分為6組，即正常組，CAG組，養顆粒低、中、高劑量組，酶維素組。MNNG灌胃綜合法建CAG模型，正常組予蒸餾水灌胃。造模成功后開始給予藥物治療，養胃顆粒按1.5、3.0、4.5g/kg的劑量連續60天灌服，取材后檢測胃液pH值和胃壁厚度，采用放射免疫法測定血清IL-1β和TNF-α的含量。結果：與正常組比較，CAG組胃液pH值升高(P＜0.01)，胃壁厚度明顯減少(P＜0.01)、IL-1β和TNF-α水平顯著升高(P＜0.0l)；與CAG組比較，養胃顆粒(高劑量)組胃液pH值顯著降低(P＜0.01)，養胃顆粒(高、中劑量)組胃壁厚度明顯增厚(P＜0.01)，(高、中劑量)組IL-1β和TNF-α水平顯著降低（P＜0.01）；與酶維素組比較，養胃顆粒高劑量組均有顯著性差異（P＜0.01）。結論：養胃顆粒對CAG模型有較好的治療作用，促進胃酸分泌，提高胃酸水平，保護胃粘膜并使病變明顯改善、抑制IL-1β和TNF-α等細胞因子可能是其部分作用機制。

慢性萎縮性胃炎 養胃顆粒 胃液pH值 胃壁厚度 白細胞介素-β 腫瘤壞死因子-α

慢性萎縮性胃炎(CAG)是以胃粘膜局灶性或廣泛性上皮和固有腺體萎縮，粘膜變薄，粘膜肌層增厚，伴有腸上皮化生和異型增生為特征的慢性疾病，阻止和逆轉慢性萎縮性胃炎向胃癌發展，對減少胃癌發生率有重要意義，現代醫學對CAG缺乏有效治療手段，中醫藥對其治療顯示出優越性[1]。筆者根據CAG的發病特點，觀察養胃顆粒對大鼠慢性萎縮性胃炎模型的治療作用，以期探討其防治CAG的可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物：健康Wistar大鼠78只，重量180～230g，由浙江中醫藥大學實驗動物中心提供，按清潔級要求飼養［實驗動物許可證號SYXK(浙2008-0115）］。

1.2 實驗藥物：N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍(MNNG) (日本TCI公司)；75%無水乙醇(北京化工廠)；鹽酸雷尼替丁膠囊(石家莊中諾藥業有限公司)；養胃顆粒［正大青春寶藥業有限公司，批號：1605007，每袋裝5g(無糖型)，臨床用量3次/天，1次1袋］，維酶素片(新鄉恒久遠藥業有限公司，批號：20150814)，上述藥物臨用時以蒸餾水配成所需濃度混懸液。IL-1β和TNF-α試劑盒，由北京華英生物技術研究所提供。

1.3 儀器：高速離心機HHR21型，北京醫用離心機廠；電熱恒溫水浴箱HWS-20型，江蘇太倉市實驗設備廠；SN-682型放射免疫γ計數器，上海核福光電儀器有限公司生產；美國BS-200S分析天平，北京賽多利斯天平有限公司。

1.4 方法：分述如下。

1.4.1 動物模型的建立：空白組的大鼠自由飲食飲水，同時每天灌胃去離子水10ml/kg；模型組采用以MNNG為主的綜合造模方法，具體如下：用去離子水配制成濃度為lg/L的母液，存放于4℃冰箱備用，每周制備1次，使用時將其稀釋成150μg/ml的溶液，置于黑色飲水瓶中，自由飲用，每天更換，同時每日灌胃雷尼替丁溶液(0.03g/kg)，期間不予其他食物，配以饑飽失常的方式，即雙日飽食，單日禁食，單日禁食時，大鼠給予45%的乙醇(1ml/只)灌胃，連續造模l6周。注意MNNG溶液飲用時置入黑膠布包裹的避光飲水瓶內供大鼠飲用。

1.4.2 分組和給藥：Wistar大鼠78只，隨機分為兩組，正常對照（空白）組14只。模型組64只，按上述方法進行造模，實驗第12、16周末各組隨機抽檢2只大鼠，檢查造模情況，第16周末單純造CAG模成功，將60只模型組大鼠隨機分為空白模型組，養胃顆粒低、中、高劑量組，酶維素組，每組12只，在繼續造模的基礎上分別給予養胃顆粒低、中、高劑量組給藥劑量分別為1.5、3.0、4.5g/ kg體重，維酶素組按0.5g/kg給藥，蒸餾水每日1次，給藥體積為l0ml/kg體重，連續給藥60天。

1.4.3 檢測指標[2]：大鼠腹腔注射350mg/kg(10ml/kg)水合氯醛麻醉，經腹主靜脈采血，3500r/min離心10min，分離血清于-70℃下保存。按試劑盒說明書操作，采用放射免疫法測定血清IL-1β和TNF-α的含量。大鼠仰臥位固定于手術板上，沿腹正中線剪開，結扎賁門和幽門，在賁門標記上方和幽門標記下方剪開分離胃組織，沿大彎側剪開胃組織，放入30ml去離子水中沖洗，將沖洗液放入50ml離心管中用1500r/min離心10min，用pH儀測量胃液pH值。收集胃酸后用去離子水將胃組織沖洗干凈，每個胃隨機選取5個點以游標卡尺測量厚度，取平均值作為其胃壁厚度。

1.4.4 統計學處理：用SPSS17.0統計軟件進行分析。數據均采用±s表示,組間比較方差齊采用單因素方差分析以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組胃酸值pH及胃壁平均膜厚度比較：見表1。

表1 各組大鼠胃酸ph值、胃壁平均厚度的比較（±s）

表1 各組大鼠胃酸ph值、胃壁平均厚度的比較（±s）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與CAG組比較，##P＜0.01；#P＜0.05；與酶維素組比較，&&P＜0.01。

pH值4.56±0.89 6.78±0.56**6.23±0.81 5.67±0.5##4.83±0.74##&&5.88±0.63#組別正常組CAG組養胃顆粒低劑量組養胃顆粒中劑量組養胃顆粒高劑量組酶維素組例數10 10 11 11 12 11胃壁平均厚度（μm）670±28 417±22**470±33 513±42##594±26##&&467±32

2.2 各組大鼠血清IL-1β和TNF-α：見表2。

表2 各組大鼠血清IL-1β和TNF-α含量比較(±s)

表2 各組大鼠血清IL-1β和TNF-α含量比較(±s)

注：與正常組比較，&&P＜0.01；與CAG組比較，**P＜0.01，*P＜0.05；與酶維素組比較，##P＜0.01。

組別正常組CAG組養胃顆粒低劑量組養胃顆粒中劑量組養胃顆粒高劑量組酶維素組TNF-α(μg/L) 27.89±7.83 52.47±9.75&&42.25±8.77**36.33±6.54**##30.67±9.34**##40.27±9.28**例數10 10 11 11 12 11 IL-1β(μg/L) 63.39±16.87 105.81±17.94&&97.66±18.12*79.43±17.79**##68.81±17.94**##95.03±16.89*

3 討論

CAG可歸屬于中醫學“胃脘痛”“痞滿”等范疇。養胃顆粒由黃芪、黨參、白芍、山藥、烏梅、陳皮、香附和甘草8味藥材組成，具有養胃健脾、理氣止痛及和中生津之功效，用于胃脘脹滿、氣滯作痛、食欲不振、消化不良等癥，對臨床上急慢性胃炎、萎縮性胃炎均有較好的療效。現代藥理研究證實[3]，養胃顆粒對冰醋酸所致大鼠潰瘍具有明顯的治療作用，能顯著減小潰瘍面積，提高潰瘍愈合百分率；其作用機制可能與其升高血清SOD活性，降低血清MDA含量，從而提高機體抵抗脂質過氧化反應的能力有關。同時養胃顆粒還能夠明顯促進CAG大鼠血清GAS、SS以及PGE的分泌,從而增強胃粘膜的防御機能。

CAG的發生發展是由多種因素誘發，其中胃酸的分泌水平，尤其是壁細胞的泌酸功能在萎縮性胃炎發生、發展中發揮重要的作用[4]。IL-1β是一種前炎癥因子炎性活細胞素，主要由單核細胞、巨噬細胞等在攝取抗原抗體復合物或抗原遞呈過程中產生。在正常生理條件下，IL-1β可以調節全部類型的胃粘膜上皮細胞的功能，抑制胃酸分泌，由于其抑制作用強烈，故可導致胃粘膜萎縮，甚至發生胃癌[5]，TNF-α主要由T細胞單核細胞分泌，TNF-a在胃粘膜組織炎癥的發生發展中起著重要的作用，可能是胃粘膜炎癥形成初始階段重要細胞因子之一[6]。因此，本研究采用長期飲用MNNG復制大鼠慢性萎縮性胃炎模型，觀察養胃顆粒對慢性萎縮性胃炎的治療作用。

本實驗結果表明，CAG大鼠胃酸pH值較正常組明顯增高，且胃壁平均厚度較正常大鼠胃壁厚度明顯變薄(P＜0.01)；養胃顆粒的治療作用較模型組和霉維素組有顯著性差異（P＜0.01），提示養胃顆粒可明顯提高CAG的胃酸分平，降低胃酸pH值，進而保護胃粘膜并使病變逐漸改善。同時，CAG模型大鼠血清IL-1β和TNF-a水平顯著升高（P＜0.01）。而養胃顆粒組尤其是高劑量組大鼠血清IL-1β和TNF-α的含量明顯降低，提示養胃顆粒治療CAG的機制可能與其抑制IL-1β、TNF-α等細胞因子活性有關。

綜上所述，養胃顆粒對慢性萎縮性胃炎大鼠有明顯的治療作用，明顯促進胃液分泌，對胃泌素分泌具有調節作用，切斷炎癥因素對胃粘膜的損傷，為臨床用藥提供實驗數據和理論依據。

[1]朱永蘋，朱燕華，張學寧，等.中醫治療慢性萎縮性胃炎研究進展[J].實用中醫藥雜志，2014，30(2)：168-169.

[2]徐叔云，卞如濂.藥理實驗方法學[M].北京：人民衛生出版社，2003：13.

[3]周學儉,王香花.養胃顆粒對慢性萎縮性胃炎大鼠胃泌素、生長抑素和前列腺素E2的影響[J].浙江中醫雜志，2013，48（5）：213-215.

[4]周平，李和全，永田博司.丹參提取物F對胃黏膜主細胞的保護作用[J].中國病理生理雜志，1999，15(3)：931-933.

[5]EL-Omar M.The importance of interleukin 1B in Helicobacter pyloriassociated disease[J].Gut,2001,48 (6)：743-747.

[6]RadR,DossumbekovaA,NeuB，eta1.Cytokinegene polymorphisms influence mucosal cytokine expression, gastric inflammation,and host specific colonisation during Helicobacter pylori infection[J].Gut，2004，53 (8)：1082-1089.

2017-03-20