魏 升 王建康 蔡旭東 鐘光輝
浙江省寧波市中醫院 浙江 寧波 315010
泄化濁瘀方總皂苷對痛風及高尿酸血癥HK-2細胞有機陰離子轉運蛋白基因表達的影響*
魏 升 王建康 蔡旭東 鐘光輝#
浙江省寧波市中醫院 浙江 寧波 315010
泄化濁瘀方 總皂苷 痛風 高尿酸血癥 HK-2細胞 有機陰離子轉運蛋白 基因表達
泄化濁瘀方臨床主要用于痛風及高尿酸血癥(痰瘀痹阻證)的治療,臨床療效確切。前期實驗及臨床研究表明[1],其具有抑制黃嘌呤氧化酶的活性,抑制尿酸生成,促進尿酸排泄,降低血尿酸水平的作用,能明顯改善痛風及高尿酸血癥的臨床癥狀。本研究以有機陰離子轉運蛋白(OATs)尿酸鹽轉運蛋白為切入點,探討泄化濁瘀方治療高尿酸血癥(痰瘀痹阻證)的作用機制。
1.1 藥品:泄化濁瘀方(土茯苓30g,萆薢、薏苡仁各15g,牛膝、澤蘭、澤瀉、當歸、桃仁、紅花各10g),組方由寧波市中醫院提供,藥物購于浙江省立同德醫院中藥房。經本實驗室提取、分離、純化,得泄化濁瘀方總皂苷,含量為62.24%。
1.2 主要試劑:苯溴馬隆片(德國赫曼大藥廠,批號:1600695);逆轉錄試劑盒(Thermo,批號:00350176);OAT1、OAT2、OAT3引物[生工生物工程(上海)股份有限公司];熒光定量 PCR試劑盒(Promega,批號:0000163908)。
1.3 主要儀器:xCELLigence RTCA DP多功能實時無標記細胞分析儀[艾森生物(杭州)有限公司];E-Plate 16檢測板[艾森生物(杭州)有限公司,批號:20160310];7300型實時熒光定量PCR儀(ABI公司);TC-20細胞計數儀(Bio-Rad公司)。
1.4 xCELLigence RTCA DP實時細胞分析系統檢測泄化濁瘀方總皂苷對人腎小管上皮細胞(HK-2)細胞增殖的影響:取對數生長期的HK-2細胞,胰酶消化后……