碳黑和碳黑與鉛復合物對人肺腺癌細胞A549毒性作用的比較

木 魁，姜 楠，溫海燕，李 響，高祥志，姜雙林

阜陽師范學院1.生命科學學院，2.胚胎發育與生殖調節安徽省重點實驗室，阜陽,236037

碳黑和碳黑與鉛復合物對人肺腺癌細胞A549毒性作用的比較

木 魁1,2，姜 楠1,2，溫海燕1,2，李 響1,2，高祥志1，姜雙林1,2

阜陽師范學院1.生命科學學院，2.胚胎發育與生殖調節安徽省重點實驗室，阜陽,236037

【目的】比較碳黑和碳黑與鉛復合物對人肺腺癌細胞A549的氧化損傷和凋亡方面的毒性。【方法】分別將濃度為40 μg/mL的碳黑和碳黑與鉛的復合物(硝酸鉛∶碳黑為250 ng∶1 g)暴露A549細胞，MTT法測定24、48、72 h時的細胞毒性；檢測細胞上清中乳酸脫氫酶(LDH)活力，胞內超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性和總蛋白含量；熒光染色法檢測細胞產生的活性氧(ROS)的含量；Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測細胞凋亡。【結果】處理組暴露24 h后A549細胞的存活率均降低，碳黑與鉛復合物最低，處理48 h和72 h與處理24 h的趨勢一致；處理組LDH和MDA均顯著高于對照組(P<0.05)，其中碳黑與鉛復合物最高；處理組CAT活性、SOD活性和GSH-Px含量均顯著低于對照組(P<0.01)，碳黑與鉛復合物最低；碳黑處理組ROS高于對照組，碳黑與鉛復合物處理組ROS最高；碳黑處理組凋亡率是空白組的2.73倍，碳黑與鉛復合物處理組凋亡率是對照組的4倍。【結論】碳黑與鉛復合物和碳黑對A549細胞均產生細胞毒性，導致胞內抗氧化酶下降，細胞凋亡率增高，碳黑與鉛復合物比碳黑對A549細胞具有更強的毒性損傷。

碳黑；A549；毒性

我國黑碳顆粒的排放約占全球的四分之一，總量達到181.1×104t[1-2]。黑碳顆粒是PM2.5的主要組分之一，也是PM2.5傳輸和吸附有毒有害物質的載體，能誘發呼吸系統疾病的發生[3]。它的孔隙發達,粒徑小,比表面積大，能極強地吸附重金屬離子(如Pb、Cd、Zn、Mn、Cr等)，形成黑碳-污染物復合體[4]。

空氣中的鉛主要來源于燃油和燃煤排放，它與空氣中的黑碳結合，形成二次黑碳粒子，即黑碳與鉛復合物。Liu等通過黑碳(一次性黑碳)暴露于O3后制備的二次黑碳(黑碳-臭氧復合體)，氧化損傷和細胞毒性效應明顯增強[5]。……