PCR及細(xì)菌培養(yǎng)法應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價(jià)值

靳紅

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.20.056

[摘要] 目的 對(duì)比研究PCR法及細(xì)菌培養(yǎng)法在應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的意義與價(jià)值。方法 該研究病例觀察時(shí)間段為2016年1—6月，方便收集該院產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對(duì)象，對(duì)患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析。所有患者分別應(yīng)用PCR法以及細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行檢測。以最終診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比PCR法與細(xì)菌培養(yǎng)法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的準(zhǔn)確度以及特異性差異。結(jié)果 應(yīng)用PCR法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對(duì)比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準(zhǔn)確度、特異性均顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中，應(yīng)用PCR法的檢測效果明顯優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)法，具有準(zhǔn)確度高、特異性高的優(yōu)勢，值得推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] B族鏈球菌感染；孕婦；PCR；細(xì)菌培養(yǎng)

[中圖分類號(hào)] R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2017）07（b）-0056-03

Application Value of PCR and Germiculture in the Infection Test of Prenatal Group B Streptococcus

JIN Hong

Second Department of Clinical Laboratory， Laiwu Central Hospital of Xinwen Mining Group of Laiwu， Laiwu， Shandong Province， 271103 China

[Abstract] Objective To compare and research the significance and value of PCR and germiculture in the infection test of prenatal group b streptococcus. Methods 100 cases of delivery women suspected with group b streptococcus admitted and treated in our hospital from January 2016 to June were convenient selected and the clinical data were reviewed and all patients were tested by the PCR and germiculture， and the differences in the accuracy and specificity between the two methods were compared by taking the final diagnostic results as the golden standards. Results The accuracy and specificity of the PCR were obviously higher those of germiculture，[97.37%（74/76）， 95.83%（23/24） vs 81.58%（62/76）， 70.83%（17/24）]， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion The test effect of PCR method in the prenatal group b streptococcus of delivery women is obviously better than that of germiculture with high accuracy and specificity， and it is worth promotion and application.

[Key words] Group b streptococcus infection； Delivery women； PCR； Germiculture

既往報(bào)道中指出，B族鏈球菌是侮辱鏈球菌，是臨床常見革蘭氏陽性鏈球菌，在直腸以及陰道組織中廣泛存在[1]。B族鏈球菌感染是導(dǎo)致產(chǎn)婦出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局，如胎膜早破、早產(chǎn)、流產(chǎn)等的最主要因素之一。并且，B族鏈球菌具有一定的母嬰垂直傳播風(fēng)險(xiǎn)，新生兒垂直感染B族鏈球菌感染會(huì)增加其圍產(chǎn)期死亡風(fēng)險(xiǎn)[2]。因此，臨床必須盡早針對(duì)孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染帶菌情況進(jìn)行診斷，以及時(shí)用抗菌藥物進(jìn)行預(yù)防性之一。為對(duì)比研究PCR法及細(xì)菌培養(yǎng)法在應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的意義與價(jià)值，該研究中將該院2016年1—6月期間產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對(duì)象，分別應(yīng)用PCR法以及細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行檢測，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究病例觀察時(shí)間段為2016年1月—2016年6月，方便收集該院產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對(duì)象，對(duì)患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析。100例產(chǎn)婦中，85例為初產(chǎn)婦，15例為經(jīng)產(chǎn)婦，產(chǎn)婦年齡平均為（29.1±1.3）歲，孕周平均（36.7±0.3）周。

1.2 方法

1.2.1 PCR法 將患者陰道直腸拭子標(biāo)本等級(jí)后于4.0℃冰箱中保存，檢測分析前將1.0 mL劑量清洗緩沖液加入拭子管內(nèi)，高速震蕩處理2.0 min后得到標(biāo)本懸浮液，并在13 000轉(zhuǎn)/min的條件下進(jìn)行離心處理，處理時(shí)間為5.0 min，經(jīng)離心處理后棄上層清液，沉淀部分加入100.0 μL劑量清洗緩沖液重懸，加入提取固形物，高速震蕩處理5.0 min，以達(dá)到破碎細(xì)胞的效果。在此基礎(chǔ)之上于95.0℃條件進(jìn)行干浴處理2.0 min，后立即轉(zhuǎn)為冰浴處理5.0 min，再次按照13 000轉(zhuǎn)/min的條件下進(jìn)行離心處理，處理時(shí)間為1.0 min，上層清液用于擴(kuò)增。根據(jù)B族鏈球菌核酸檢測試劑盒以及PCR儀相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)展開檢測，以熒光信號(hào)出現(xiàn)S型擴(kuò)增，CT值低于33為B族鏈球菌感染陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)。endprint

1.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)法 將患者陰道直腸拭子細(xì)菌接種于濃度5.0%養(yǎng)血培養(yǎng)基中，培養(yǎng)箱溫度控制為37.0℃，培養(yǎng)時(shí)間為24.0 h，根據(jù)菌落形態(tài)、溶血特征以及顯微鏡下所見確定鏈球菌，在此基礎(chǔ)之上通過組合型特異性血清免疫實(shí)驗(yàn)的方式最終明確診斷為B族鏈球菌感染。

1.3 觀察指標(biāo)

以最終診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比PCR法與細(xì)菌培養(yǎng)法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的準(zhǔn)確度以及特異性差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)以SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，以（x±s）表示計(jì)量資料，經(jīng)t檢驗(yàn)；以率（%）表示計(jì)數(shù)資料，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

以最終診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，100例疑似B族鏈球菌感染孕婦中，共76例孕婦明確診斷為B族鏈球菌感染陽性，另24例孕婦B族鏈球菌感染檢測為陰性。應(yīng)用PCR法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對(duì)比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準(zhǔn)確度顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法（χ2=13.256，P<0.05），特異性顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法（χ2=11.005，P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1、表2。

3 討論

目前臨床實(shí)踐中針對(duì)疑似B族鏈球菌感染帶菌者孕婦的檢測窗口時(shí)間已有共識(shí)[3]，即在的孕周35～37周時(shí)于陰道肛門同時(shí)取樣并進(jìn)行分析。以往臨床以細(xì)菌培養(yǎng)法為B族鏈球菌感染的首選診斷方案[4]，但近來也有報(bào)道中指出PCR法在診斷B族鏈球菌感染方面的價(jià)值同樣確切[5]。該研究中觀察數(shù)據(jù)顯示：應(yīng)用PCR法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)B族鏈球菌感染檢測的準(zhǔn)確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對(duì)比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準(zhǔn)確度、特異性均顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。提示在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染的診斷中，應(yīng)用PCR法的效果優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)法。該研究結(jié)果與陳明發(fā)等[6]研究結(jié)果“熒光定量PCR檢測法陽性率顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法（19.51% vs.9.72%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義”基本一致，證實(shí)結(jié)論有高度可靠性。

作為一種快速且高效的臨床病原微生物檢測方法，PCR可通過對(duì)不同種屬特異性核算序列設(shè)計(jì)引物以及不同熒光染料標(biāo)記探針的應(yīng)用，在高通量檢測儀器的輔助下完成具有快速性、敏感性且高通量性的閉蓋檢測，具有檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，敏感性高的優(yōu)勢[7]。除此以外，在應(yīng)用PCR法進(jìn)行B族鏈球菌感染檢測的過程中，檢出時(shí)間可控制在6.0 h左右，明顯低于細(xì)菌培養(yǎng)法下的耗時(shí)，因此更具臨床實(shí)踐意義[8]。

綜上所述，在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中，應(yīng)用PCR法的檢測效果明顯優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)法，具有準(zhǔn)確度高、特異性高的優(yōu)勢，值得推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-04-19）endprint