水蛭素對(duì)喉癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

馬 濤，劉為民，曲 琳，楊笑染，薛希均，劉銘芳，鄧 斌，周智勇，陶寶鴻

·臨床研究·

水蛭素對(duì)喉癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

馬 濤1，劉為民1，曲 琳1，楊笑染1，薛希均2，劉銘芳1，鄧 斌1，周智勇1，陶寶鴻3

目的觀察水蛭素對(duì)喉癌荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法將40只小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，小鼠左前腋窩下皮下種瘤建立實(shí)體瘤模型，陽(yáng)性對(duì)照組以氟尿嘧啶20mg/kg腹腔注射；水蛭素高劑量組以2.5g/(kg·d)灌胃；陰性對(duì)照組以生理鹽水0.1mL/(10g·d)灌胃；水蛭素低劑量組以1.2g/(kg·d)灌胃。連續(xù)用藥14 d后處死小鼠取荷瘤鼠腫塊稱(chēng)重，并將瘤組織包埋、固定、切片、染色等，計(jì)算抑瘤率，利用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件檢測(cè)瘤組織中C-met的表達(dá)。結(jié)果水蛭素高、低劑量組對(duì)小鼠喉癌細(xì)胞均有明顯的抑制作用，抑瘤率分別為40.1%、26.92%，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；4組中C-met均呈陽(yáng)性表達(dá)，水蛭素高、低劑量組C-met的表達(dá)均下調(diào)，與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論水蛭素對(duì)小鼠喉癌細(xì)胞抑制作用顯著。

水蛭素;喉癌;C-met;抑瘤作用

美國(guó)的一項(xiàng)研究分析表明喉癌的發(fā)病率占頭頸癌的25%[1]，我國(guó)喉癌的發(fā)病率約占全身癌癥的1%～5%[2]。從水蛭中可以提取出一種活性成分較高的物質(zhì)——水蛭素(Hirudin),它可以抑制凝血酶。多項(xiàng)研究表明在全身腫瘤中，C-met基因均呈現(xiàn)過(guò)度表達(dá)。本研究中，我們建立喉癌荷瘤小鼠模型，觀察水蛭素對(duì)小鼠喉癌的抑制作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料：2015年自寧夏醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心購(gòu)買(mǎi)小鼠雌雄各半共40只，周齡(8±1)周，體質(zhì)量(20±0.5)g。小鼠喉癌瘤細(xì)胞由南京科佰科技有限公司提供。自上海信裕生物科技公司購(gòu)買(mǎi)重組人水蛭素；自天津金耀氨基酸公司購(gòu)買(mǎi)氟尿嘧啶注射劑，規(guī)格10 mL，25 g/支；自北京哲成科技有限公司購(gòu)買(mǎi)C-met SP免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒。……