獻血標本對檢驗結(jié)果準確性的影響因素分析研究

河南省濮陽市紅十字中心血站（457000）馮蘭潔

血站對于血液樣本中抗原進行檢驗的方法主要有酶聯(lián)免疫檢驗和核酸檢驗兩種，本研究以2016年2月～2016年6月期間我站的200例血液樣本為研究對象，先后采用酶聯(lián)免疫檢驗和核酸檢驗，并對其準確性進行統(tǒng)計，同時對于影響檢驗準確性的因素進行分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年2月～2016年6月期間在我站成功完成自愿獻血的200例獻血者作為考察對象，對其血液樣本進行檢測。其中男性為109例，女性為91例；最小年齡為26歲，最大年齡為54歲，平均年齡為（42.46±2.15）歲。

1.2 檢測方法 先對200例患者進行酶聯(lián)免疫檢驗，再進行核酸檢驗。具體方法如下：酶聯(lián)免疫檢驗：將真空抗凝管中的血液樣本取出5ml放入離心機進行離心，并分離出血漿，采用STAR全自動加樣儀（煙臺澳斯邦生物工程有限公司）進行加樣，再采用FAME全自動酶免分析儀（煙臺澳斯邦生物工程有限公司）進行分析，檢驗人員記錄檢驗結(jié)果。核酸檢驗：AmpliSTAR全自動核酸提取純化儀和ABI7500熒光PCR擴增儀組成的核酸檢測系統(tǒng)對患者血液進行檢測，將真空抗凝管中的血樣取出5ml，放入AmpliSTAR全自動核酸提取純化儀中進行時長為20分鐘的離心純化，溫度以室溫為宜，隨后將經(jīng)過離心的血樣至于5℃的冰箱內(nèi)進行保存，如果血常規(guī)檢查時血液樣品顯示合格，便可將它置于加樣儀樣品條架上，并于B號96孔深孔板中加入A、B洗液以及洗脫液各100ul，于A號96孔深孔板中加入磁珠50ul和結(jié)合液600ul，對血液樣本進行裂解，裂解完成之后，采用三級核酸提取程序?qū)⒑怂崽崛〕鰜恚渲每自龊怂岱磻?yīng)液。采用四級核酸擴增程序?qū)⒔Y(jié)合液置于八聯(lián)管中，最后放入PCR儀器中進行擴增，并采用乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒(1+2型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光法)等試劑進行檢測，最后將結(jié)果進行記錄，確定陽性血液樣本數(shù)量。

附表1 采用酶聯(lián)免疫檢驗陽性率（n/%）

附表2 采用核酸檢驗陽性率（n/%）

1.3 檢驗準確性觀察指標 觀察采用兩種方法對于血液樣本進行檢驗時，檢查樣本中抗原的陽性率。酶聯(lián)免疫檢驗主要篩查HBsAg、抗-HCV和抗-HIV陽性獻血者，再對陰性獻血者采用核酸進行抗-HBV、抗-HCV和抗-HIV篩查。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 將研究數(shù)據(jù)采用SPSS17.0分析，計量資料采用（±s）表示，并采用t 檢驗，計數(shù)資料采用n表示，并采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

在本次研究中，采用酶聯(lián)免疫檢驗HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)分別為13例、12例和13例，共38例，見附表1；將陽性患者篩除后，再對162例陰性獻血者采用核酸檢驗，抗-HBV，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)分別為32例、0例、0例，見附表2。

3 討論

血站中的無償獻血是醫(yī)院急救中的重要血源，但是獻血人員混雜，血液的安全性得不到保證，如果將未經(jīng)過檢驗的血液直接輸入患者體內(nèi)，可能會導(dǎo)致患者遭受病毒的感染，引發(fā)醫(yī)患糾紛。因此在收集血液之后，應(yīng)先對血液的安全性進行檢驗，將帶有病毒的血液剔除，避免病毒通過血液流入患者體內(nèi)[1]。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進步，血液檢驗標本檢測技術(shù)得到了很大的發(fā)展，成為臨床上對于疾病診斷的重要依據(jù)，為臨床診斷做出了較大的貢獻[2]。但是在實際情況下，送檢血液常由于種種原因成分發(fā)生改變，造成檢驗結(jié)果不準確的問題，漏檢的血液被輸入到患者的體內(nèi)時，患者就會感染上病毒，最終引發(fā)醫(yī)患糾紛[3]。因此，我們應(yīng)該給予血液標本采集工作足夠的重視，提高檢測工作的效率，提高血站血液的安全性。目前血站中常用于血液樣本檢驗的方法主要有酶聯(lián)免疫檢驗法和核酸檢驗法兩種，酶聯(lián)免疫檢驗的工作原理為讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過顯色來檢測血液中的病毒。核酸檢驗方法則先采用洗脫液以及洗液將樣本裂解，并將核酸提取出來，再采用先進的技術(shù)將核酸進行擴增，從而分析血液中的相關(guān)抗原與抗體，該方法程序更為詳細。為分析兩種檢驗方法的準確性，本研究特以我站接受血液檢驗的200例血液樣本為考察對象，先后采用酶聯(lián)免疫檢驗方法與核酸檢驗方法對于血液樣本進行檢驗，先采用酶聯(lián)免疫檢驗方法篩查出血液樣本中HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)，再對陰性樣本采用核酸檢驗方法進行檢驗，并對影響檢驗準確性的因素進行討論[4]。

在酶聯(lián)免疫檢驗中，檢出HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性總例數(shù)為38例，而核酸檢驗中檢出抗-HBV陽性例數(shù)為32例。通過分析可知，在檢驗過程中影響檢驗準確性的因素主要有以下幾點：①血液采集量：血液采集量對于檢驗結(jié)果也具有一定的影響。一般來說，過多或者過少的采集量都會影響血凝效果，從而影響檢測的準確性。但是在實際操作中，部分采血人員對于采血量沒有給予足夠的重視，導(dǎo)致采血量不合規(guī)格，影響血液檢驗的結(jié)果。②血液保存時間過長：當(dāng)血液保存時間過長時，部分病毒會發(fā)生變異，在檢驗過程中就會出現(xiàn)漏檢的情況。③免疫沉默：在檢驗過程中，部分抗體會出現(xiàn)免疫沉默的情況，也會導(dǎo)致漏檢。因此在對于血液樣本進行檢測的過程中，應(yīng)該嚴格遵循相關(guān)的程序，各種樣品要進行嚴格匹配，避免檢驗結(jié)果出現(xiàn)誤差[5]。

研究結(jié)果表明，與單純采用酶聯(lián)免疫檢驗方法相比，聯(lián)合核酸檢驗的陽性率更高。因此在血站血液檢驗工作中，除了通過控制血液采集量、血液保存時間等因素之外，可采用兩種檢驗方法進行聯(lián)合使用來提高血液檢驗標本檢測的準確性，對于提高血液的安全性、緩解醫(yī)患關(guān)系具有非常積極的意義。