辛伐他汀對大鼠腎缺血再灌注損傷后心肌氧自由基代謝的干預效應

荊 嬌 馬海玲 張永忠 閆文升 張玉清 焦宗偉

（石家莊醫學高等專科學校，河北石家莊 050000）

辛伐他汀對大鼠腎缺血再灌注損傷后心肌氧自由基代謝的干預效應

荊 嬌 馬海玲 張永忠 閆文升 張玉清 焦宗偉

（石家莊醫學高等專科學校，河北石家莊 050000）

目的 觀察辛伐他汀預處理對腎缺血再灌注損傷大鼠遠程器官心肌氧自由基代謝的影響。方法 采用夾閉雙側腎動靜脈45min后去夾再灌的方法復制腎缺血再灌注損傷（RI/RI）模型。36只SD大鼠隨機分成3組①假手術組；②腎缺血再灌注組；③辛伐他汀組，每組12只。取血清測定血肌酐（SCR）、尿素氮（BUN）含量；取心臟組織測定組織抗氧化酶丙二醛（MDA）含量、脂質過氧化反應的最終產物超氧化物歧化酶（SOD）活性，免疫組化。結果 與假手術組比較腎缺血再灌注組肌酐、尿素氮、丙二醛含量升高，超氧化物歧化酶活性降低（p＜0.05），辛伐他汀組肌酐、尿素氮、丙二醛含量高于缺血組，而超氧化物歧化酶活性則升高（p＜0.05）。結論 辛伐他汀可能通過減輕超氧化物歧化酶活性的降低和丙二醛含量的升高而改善缺血再灌注后心肌氧自由基代謝的失衡。

辛伐他汀；丙二醛；超氧化物歧化酶

他汀類藥物是三羥基理三甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑，目前普遍用于臨床治療高脂血癥。近年來發現，他汀類藥物作用的多效性除降血脂作用外，還有其他非降脂方面的作用，在防治心臟疾病方面也日益重視[1]。本實驗就此進行了初步研究。

1 材料與方法

材料：成年健康雄性S D（河北省實驗動物中心）；辛伐他汀（杭州上虞京新藥業有限公司）；S Cr、B U N試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公司）；M D A、S O D、考馬斯亮藍蛋白測試盒（南京建成生物制品公司）。

方法：成年健康雄性S D大鼠 36只，體重16～230 g，在20～26 ℃實驗室安靜飼養兩天后隨機分為3組①假手術組。②腎缺血再灌注組。③辛伐他汀組。每組12只。分組后，辛伐他汀組每日給予辛伐他汀20 m g/k g灌胃，持續2周。假手術組和缺血再灌組每日給予等量的生理鹽水灌胃。2周之后復制動物模型。

10%水合氯醛腹腔麻醉，開腹，暴露雙側腎動、靜脈。除假手術組只開腹不夾閉腎動、靜脈外，其余各組均需夾閉雙側腎動、靜脈45 min，然后除夾再灌。逐層縫合。于再灌后24 h取血清測定血肌酐、尿素氮的含量，分別取心臟腦組織測定組織M D A含量、S O D活性。

采用苦味酸不除蛋白法完成血清肌酐測定；血清尿素氮含量測定采用O P A法；M D A含量測定采用硫代巴比妥法；S O D活性測定采用黃嘌呤氧化酶法；各項指標檢測方法嚴格按說明書操作。

統計學分析：定量數據以均數±標準差表示，采用SPSS23.0統計軟件進行單因素方差分析和t檢驗。以p＜0.05表示有統計學意義。

表 1 Effect of Sim地 s on activities of SOD and contents of MDA、 BUN、Scr of myocardium cells in RIRI rats（，例數 =12）

表 1 Effect of Sim地 s on activities of SOD and contents of MDA、 BUN、Scr of myocardium cells in RIRI rats（，例數 =12）

△P ＜0.05 v s S h a m g r o u p；* p＜ 0.05，v s I/R g r o u p

Scr（μmol/L） BUN（mmol/L） SOD（U/mgPro） MDA（nmol/mgPro）Sham 56.96±2.01 6.84±0. 51 250.94±17.55 2.11±0.21 I/R 141.51±3.80△ 17.58±1.12△ 149.01±14.12△ 3.47±0.42△Sim 119.76±1.12* 14.86±1.54* 219.61±14.14* 2.47±0.37*

2 結果

2.1 辛伐他汀對血清尿素氮和血清肌酐含量的影

I/R組大鼠腎功能明顯受損，B U N、S c r含量均明顯高于S h a m組，S i m組B U N、S c r含量明顯低于I/R組（p＜0.05），差異有統計學意義，見表1。

2.2 辛伐他汀對心肌組織SOD活性、MDA含量的影響

I/R組心肌組織S O D活性降低，M D A含量高于S h a m組，與I/R相比，S i m組S O D活性升高，M D A含量降低（p＜0.05），差異均有統計學意義，見表1。

3 結論與討論

自由基損傷是公認的缺血再灌注損傷機制。生理狀態下，體內產生的超氧化物歧化酶等能迅速清除O F R。當超過機體清除能力的時候，產生的O F R生成過氧化脂質，使膜的流動性及通透性發生障礙，并產生代謝產物M D A，因此，M D A的濃度及S O D活力可作為膜脂質過氧化損害程度的標志。缺血再灌注期間產生的大量的O F R可通過血液循環可造成遠隔器官的損傷，經體循環后的濃度降低，但局仍可以引起遠隔器官自由基的相對增加，從而導致遠隔器官的損傷，也有研究指出腎缺血后遠端器官腦組織也有不同程度的損傷[2]。

本實驗復制腎缺血再灌注損傷模型后，觀察各項指標，缺血再灌注后，S c r、B U N 均顯著升高，腎組織損傷，模型復制成功。心肌脂質過氧化物M D A產生增多，同時作為重要的抗氧化劑的S O D活性明顯下降，說明心肌受損。而給予辛伐他汀干預后，M D A降低，而S O D升高，從而改善了心肌氧自由基的代謝失衡。

[1] 姜華，尹微.辛伐他汀對膿毒癥大鼠心肌保護作用的研究[J].臨床合理用藥雜志，2016，9（21）：48-49.

[2] 戎浩，夏曉紅.褪黑素對腎缺血再灌注損傷大鼠腦組織氧自由基和細胞凋亡的影響[J].中國病理生理雜志，2015，31（10）：1861.

Intervention Effect of Simvastatin on Myocardial Oxygen Free Radical Metabolism after Renal Ischemia-reperfusion Injury in Rats

Jing Jiao Ma Hailing Zhang Yongzhong Yan Wensheng Zhang Yuqing Jiao Zongwei
（Shijiazhuang medical college，shijiazhuang hebei，050000，China）

Objective to investigate the effect of simvastatin preconditioning on oxygen free radical metabolism in myocardial cells of rats subjected to renal ischemia-reperfusion injury. Methods the renal ischemia reperfusion injury（RI/RI）model was established by clamping the bilateral renal arteries and veins for 45 minutes and then clamping and reperfusion. 36 SD rats were randomly divided into 3 groups：①sham operation group；②renal ischemia reperfusion group；③simvastatin group，12 rats in each group. Determination of SCR，BUN content；heart samples determination of tissue antioxidant enzymes MDA content of the final product of lipid peroxidation，SOD activity，immunohistochemistry. Results compared with the sham operation group，the content of SCR、 BUN and MDA were increased in I/R group，SOD activity was decreased（p＜0.05）. In simvastatin group，the content of SCR、 BUN and MDA were dncreased，but SOD activity was increased（p＜0.05）Conclusion simvastatin may ameliorate the imbalance of oxygen free radical metabolism after myocardial ischemia and reperfusion by reducing the decrease of SOD activity and the increase of MDA content.

simvastatin；malondialdehyde；superoxide dismutase

荊嬌，醫學碩士，講師，研究方向：心血管生理。

河北省教育廳高等學校科學技術指導性研究項目（編號：Z2014020）